蛋白激酶抑制剂Roscovitine靶向PB2抑制流感病毒复制的作用及其机制

发布时间：2021-06-08 18:21

　　研究背景:甲型流感病毒（InfluenzaA virus,IAV）因其传染性强、变异速度快、发病率和死亡率高的特点,已经成为严重威胁人类健康和社会安定的病毒之一。目前接种疫苗是预防流感病毒感染的主要手段,但疫苗的更新速度以及流感病毒不断突变的特点致使常规的季节性疫苗不能有效防治病毒。因此抗流感病毒药物的使用在防治病毒中起到至关重要的作用。迄今为止,临床上使用的抗流感药物主要分为两大类:M2离子通道抑制剂和神经氨酸酶抑制剂。但是临床上已出现多种对这上述两种类药物耐药的流感病毒株,使现有抗流感病毒药物的发展应用受到一定影响。因此人们迫切想要寻找到不同于现有作用机制的新型抗流感药物。流感病毒PB2cap结构域基因序列具有高度保守性,已成为抗病毒药物研究的重要靶标之一。然而一个全新的药物从研发到进入临床是一个耗时耗力的过程,因此,对目前已存在且已知安全性的药物进行抗病毒活性研究则可以明显缩短研究周期,如细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂类（cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKI）化合物,已发现不同选择性的CDKI对不同病毒,如人类免疫缺陷病毒、疱疹病毒或流感病... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ对细胞活力的影响??

第一章?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ具有抗甲型洗感病毒的活性???＾???４０－ｊ?＾??＊氺?—??３０－?ＨＢｊ??ｆ?２０＇?■?＾??Ｅ：Ｅ＊ｎｎ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｏｓｃｏ＼ｉｔｉｎｅ?（ｆｉＭ）??Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ?（｜．ｉＭ）??Ｖｉｒｕｓ?１０?５??。礙备？??１００－．?＊??＊??，８０－?■?Ｉ??＾４０－??２０－??￣￣ｉ￣￣￣ｉ???ｙ?１??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｖｉｒａｌ??ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ?ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ?（＾ｌＭ）??图１－２?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ具有抗甲型流感病毒的作用。（Ａ）Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ的化学结构；（Ｂ）Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ??对感染甲型流感病毒的细胞具有保护作用；（ｃ）?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ抑制甲型流感病毒引起空斑的??形成；（Ｄ）空斑实验检测上清液中（分别稀释１０００倍和１００００倍）子代病毒滴度，下图??为上清稀释１００００倍时的病毒滴度。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ａｎｔｉｖｉｒａｌ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ?ｏｎ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?ｖｉｒｕｓｅｓ．?（Ａ）?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ??２０??

第一章?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ具有抗甲型流感病毒的活性??Ｂ??１．２－??ａ?１．０＿??一?—?—??Ｈ?Ｉ?＿ｒ．??■?■?７?ｆｈ??—＇－ｒ．??２：?２?Ｉ??一?〇？〇」，．準＿?Ｉ?，丨丨，丨ｊ?，丨??々?＾?、夕?Ｖ５?４５??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ?（｜ｉＭ）??图１－４?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ能显著抑制病毒在Ｂｅａｓ－２Ｂ细胞中的复制能力。（Ａ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测甲??型流感病毒感染后ＰＢ２，?ＮＰ蛋白的表达，ｌＯ＾Ｍｐｅｒａｍｉｖｉｒ作为阳性对照；（Ｂ）?ｑＲＴ－ＰＣＲ??法检测病毒ＮＰｍＲＮＡ的表达。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ?ｏｎ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?Ａ?ｖｉｒｕｓ?ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｉｎ?Ｂｅａｓ－２Ｂ?ｃｅｌｌｓ??（Ａ）Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｖｉｒａｌ?ＮＰ?ａｎｄ?ＰＢ２?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ，?ｐｅｒａｍｉｖｉｒ?（１０??（ｉＭ）?ａｓ?ａ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?（Ｂ）?Ｖｉｒａｌ?ＮＰ?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｑＲＴ－ＰＣＲ．?（＊＊：?ｐ?＜??０．０１）??四、小结与讨论??甲型流感病毒因其抗原漂移和抗原转变的特点，使疫苗对病毒的预防治疗??作用大大下降，因此抗病毒药物的使用是十分重要的。我们基于细胞水平的抗??病毒药物筛选出Ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ对流感病毒具有较好的抑制作用，己知它是一作为??蛋白激酶

【参考文献】：
期刊论文
[1]蛋白激酶抑制剂Flavopiridol对流感病毒复制的体外抑制作用[J]. 汪世雄,张军杰,叶昕.  微生物学报. 2012(09)



本文编号：3218958