ELF-EMF诱导ROS积蓄对神经元氧化损伤、凋亡和miRNA的影响及LSPCs的调控作用

发布时间：2021-06-15 16:33

　　极低频电磁场（extremely low frequency electromagnetic field,ELF-EMF）是由电力供应（高压输电线）和各类家用电器产生的电磁场（0³00 Hz）。中枢神经系统对ELF-EMF高度敏感,极易产生氧化应激,导致活性氧自由基（reactive oxygen species,ROS）大量积蓄,进而引起神经退行性疾病的发生与发展等。目前研究仍集中在ELF-EMF的危险评估和物理防护上,极少关注饮食调整对ELF-EMF的预防作用和机制的研究。基于此,本论文在前期研究基础上,研究ELF-EMF（50 Hz、8 m T下辐照90 min）引发ROS积蓄在海马神经元氧化应激损伤和凋亡过程中的角色、对microRNA（miRNA）的影响及莲房原花青素（procyanidins from lotus seedpod,LSPCs）的预防和调控作用。主要研究内容和结果如下:1.ELF-EMF诱导ROS积蓄介导海马神经元氧化损伤及LSPCs的预防作用以ROS抑制剂N-乙酰基-L-半胱氨（N-acetyl-L-cystein,NAC）为对照,研究... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写词表
第一章 绪论
    1.1 极低频电磁场及其生物学效应
        1.1.1 极低频电磁场简述
        1.1.2 极低频电磁场诱导ROS积蓄介导氧化损伤
    1.2 miRNA研究概况
        1.2.1 miRNA简介
        1.2.2 miRNA的生物学作用机制
        1.2.3 miRNA与辐射相关生物学效应
        1.2.4 天然活性物质对miRNA的调控
    1.3 莲房原花青素
        1.3.1 LSPCs简介
        1.3.2 LSPCs抗辐射生物效应
    1.4 本论文的研究目的、意义及研究内容
        1.4.1 本论文的目的和意义
        1.4.2 本论文主要研究内容
第二章 ELF-EMF诱导ROS积蓄介导海马神经元氧化损伤及LSPCs的预防作用
    引言
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 实验仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 主要试剂配制
        2.2.2 辐照装置
        2.2.3 海马神经元的分离和培养
        2.2.4 原代海马神经元分组与辐照
        2.2.5 海马神经元内ROS种类及各类含量
        2.2.6 细胞内ROS的来源定位
        2.2.7 细胞内总ROS的含量测定
        2.2.8 海马神经元总抗氧化活力（T-AOC）的测定
        2.2.9 海马神经元中GSH、SOD和SDH含量的测定
        2.2.10 海马神经元内MDA含量的测定
        2.2.11 Western blot检测海马神经元中抗氧化物酶相关蛋白表达
        2.2.12 数据统计
    2.3 结果与分析
        2.3.1 LSPCs对海马神经元内ROS种类及含量的影响
        2.3.2 LSPCs对海马神经元内ROS分布的影响
        2.3.3 LSPCs对海马神经元内ROS总量的影响
        2.3.4 LSPCs对海马神经元内总抗氧化能力的影响
        2.3.5 LSPCs对海马神经元中GSH、SOD和SDH活力的影响
        2.3.6 LSPCs对海马神经元内MDA含量的影响
        2.3.7 LSPCs对SOD-1 和SOD-2 蛋白表达的影响
        2.3.8 LSPCs对GSH-Px蛋白表达的影响
    2.4 本章小结
第三章 ELF-EMF诱导ROS积蓄介导海马神经元凋亡及LSPCs的预防作用
    引言
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 主要实验试剂
        3.1.3 实验仪器设备
    3.2 实验方法
        3.2.1 主要试剂配制
        3.2.2 辐照装置
        3.2.3 海马神经元的分离和培养
        3.2.4 原代海马神经元分组与辐照
        3.2.5 细胞存活率检测
        3.2.6 海马神经元形态学观察
        3.2.7 线粒体膜电位的检测
        3.2.8 细胞内Ca2+含量测定
        3.2.9 海马神经元的细胞周期检测
        3.2.10 海马神经元Cytochrome C蛋白检测
        3.2.11 Bcl-2 家族蛋白检测
        3.2.12 caspase家族蛋白检测
        3.2.13 数据统计
    3.3 结果与分析
        3.3.1 LSPCs对海马神经元存活率的影响
        3.3.2 LSPCs对海马神经元形态学的影响
        3.3.3 LSPCs对海马神经元线粒体膜电位的影响
        3.3.4 LSPCs对海马神经元内游离钙离子浓度的影响
        3.3.5 LSPCs对海马神经元细胞周期的影响
        3.3.6 LSPCs对海马神经元Cytochrome C的释放
        3.3.7 LSPCs对海马神经元Bcl-2 家族蛋白表达的影响
        3.3.8 LSPCs对海马神经元caspase家族蛋白表达的影响
    3.4 本章小结
第四章 ELF-EMF对海马神经元miRNA表达的影响及LSPCs的调控作用
    引言
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 主要实验试剂
        4.1.3 主要实验设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 辐照装置
        4.2.2 海马神经元的分离和培养
        4.2.3 原代海马神经元分组与辐照
        4.2.4 RNA提取（Trizol法）
        4.2.5 RNA质量检测
        4.2.6 富集小RNA
        4.2.7 芯片实验及聚类分析
        4.2.8 生物信息学分析
        4.2.9 数据统计
    4.3 结果与分析
        4.3.1 海马神经元总RNA的质量检验
        4.3.2 miRNA芯片杂交信号扫描图
        4.3.3 各组miRNA表达谱差异及聚类分析
        4.3.4 三组间差异表达miRNA靶基因GO分析
        4.3.5 三组间差异表达miRNA靶基因KEGG Pathway富集性分析
        4.3.6 Mi RNA-Gene-Network分析确定关键的miRNA及靶基因
        4.3.7 差异表达基因综合途径分析
    4.4 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
在学期间发表的学术论文及其他科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]莲房原花青素对极低频电磁场致海马神经元损伤的预防机制[J]. 张海晖,段雯怡,武妍,樊蓉,程燕翔,段玉清.  中国食品学报. 2016(06)
[2]莲房原花青素对极低频电磁场致免疫功能损伤的预防作用[J]. 张海晖,程燕翔,罗孝平,何远清,李长征,曲文娟,段玉清.  现代食品科技. 2016(07)
[3]极低频电磁场诱导人骨肉瘤细胞凋亡及其机制研究[J]. 杨敏丽,叶招明.  浙江大学学报(医学版). 2015 (03)
[4]莲房原花青素对极低频电磁场致海马神经元损伤的预防作用[J]. 张海晖,武妍,张瑞,张爽,段玉清,孙桂波,孙晓波.  食品科学. 2013(13)
[5]极低频磁场诱发氧化应激的研究进展[J]. 徐春晓,吕琰,张玉霞,宋涛.  中国医学物理学杂志. 2012(05)
[6]细胞凋亡与活性氧[J]. 刘卉,刘延香.  现代肿瘤医学. 2008(10)
[7]静态和极低频电磁场非热生物效应的研究动态[J]. 张萍萍,尹若春,吴丽芳,吴跃进,余增亮.  生物医学工程学杂志. 2007(06)
[8]极低频电磁场对大鼠脑组织抗氧化系统的影响[J]. 金焕荣,谢怀江,赵肃,段晓军,王任群.  工业卫生与职业病. 2005(04)
[9]电磁辐射诱导的生物氧化应激效应[J]. 张清俊,吴可.  航天医学与医学工程. 2004(02)
[10]极低频电磁场生物学效应的细胞和分子生物学研究进展[J]. 刘贇.  国外医学(医学地理分册). 2003(04)

博士论文
[1]50Hz极低频电磁场和1800MHz射频电磁场表观遗传学效应及其机制的研究[D]. 刘永.重庆大学 2016
[2]辐射诱导旁观者效应相关microRNA的研究[D]. 徐帅.中国科学院研究生院（近代物理研究所） 2015

硕士论文
[1]莲房原花青素诱导ROS积蓄介导HepG2细胞自噬和凋亡的研究[D]. 许慧.江苏大学 2016
[2]吗啡预处理保护心力衰竭大鼠心肌细胞缺氧再给氧损伤的相关特异性microRNA的筛选验证及生物信息学分析[D]. 朱海娟.安徽医科大学 2014



本文编号：3231404