尼古丁对多种干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

发布时间：2021-06-17 12:40

　　目的:明确干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体（nAChRs）亚基的表达以及尼古丁处理后受体改变的情况。方法:选择胚胎、胚胎样干细胞和成体干细胞作为探究对象。采用无饲养层细胞的方法培养人胚胎干细胞系H9和人诱导多能干细胞（IPSC）;成体干细胞选择人脐带间充质干细胞（UCMSC）和人骨髓间充质干细胞（BMMSC）。4种细胞传代培养后分成对照组和处理组,处理组培养基中加入尼古丁,分别提取总RNA和蛋白。采用RT-PCR、RT-qPCR和Western blot检测nAChRs亚基的mRNA和蛋白表达水平,采用细胞免疫荧光染色检测受体亚基的表达位置。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,H9细胞、IPSC和UCMSC中均检测到nAChRs的α2、α3、α4、α7、α9和β1亚基,而BMMSC仅α4、α7、α9和β1表达明显。尼古丁处理后,RT-qPCR结果显示α2在H9细胞和UCMSC中显著下调,而在IPSC中发生上调;β2在BMMSC和IPSC中显著上调,而在UCMSC中显著下调。结论:胚胎干细胞和成体干细胞中表达的nAChRs亚基不同,且分化潜能越高,表达种类越多。尼古丁对nAC... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

各种干细胞的形态观察

RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测各种干细胞内nAChRs亚基的mRNA表达

Western blot检测各种干细胞内nAChRs亚基的蛋白表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]尼古丁对人脐带间充质干细胞增殖和迁移的影响[J]. 曾慧兰,卜欠欠,陈慧中,覃永亮,李阳,柏小芬,钟启,余泮熹,刘宏伟,刘革修,苏泽轩.  中国病理生理杂志. 2013(05)



本文编号：3235210