光谱技术应用于研究化合物与血清白蛋白相互作用

发布时间：2021-06-22 08:53

　　血清白蛋白（Serum albumin）是血浆中含量最丰富的蛋白质,具有极为重要的运载作用,药物进入血液后与之结合,影响其代谢和药理、毒理作用等,因此,血清白蛋白（人血清白蛋白和牛血清白蛋白）成为研究药物与蛋白质相互作用最为常用的模式蛋白之一。在结合过程中,会涉及药物与白蛋白的结合作用力类型、强弱等作用机制问题,以及与白蛋白的结合率高低问题,这些都会影响药物在体内生物活性的发挥。药物与血清白蛋白之间的作用机制通常采用多重光谱法,该方法具有灵敏度高、选择性好、操作简便、试样用量少等优点。而药物与白蛋白结合率的现有研究方法存在实验耗时较长、检测量较少等问题,进而使其研究受到制约。此外,很少有文献同时从上述两个方面进行药物与蛋白作用的研究,并探讨蛋白作用机制与蛋白结合率之间的关系。本课题从以下几个方面进行了化合物与血清白蛋白的作用研究:（1）由于光谱法在研究弱结合能力化合物与血清白蛋白相互作用时存在问题,因此本论文选取了中等结合能力的黄酮类化合物和高结合能力的利奥西呱和哌喹及其代谢物,利用光谱法研究其与血清白蛋白的结合作用;（2）建立测定上述化合物的定量分析方法,采用超滤法和HPLC法测定上... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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符号说明
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 血清白蛋白的结构与功能
        1.2.1 血清白蛋白的结构
        1.2.2 血清白蛋白的功能
    1.3 光谱学研究化合物与血清白蛋白相互作用进展
        1.3.1 荧光光谱法
        1.3.2 紫外-可见吸收光谱法
        1.3.3 圆二色性光谱法
        1.3.4 红外光谱法
        1.3.5 核磁共振法
        1.3.6 分子模拟方法
    1.4 研究化合物蛋白结合率的方法
        1.4.1 平衡透析法
        1.4.2 超速离心法
        1.4.3 超滤法
    1.5 本文主要研究内容及意义
        1.5.1 研究内容
        1.5.2 研究意义
第二章 单芽狗脊黄酮类化合物与血清白蛋白作用研究
    2.1 实验部分
        2.1.1 药材和试剂
        2.1.2 仪器和软件
        2.1.3 化合物成分提取和分离
        2.1.4 黄酮类化合物与血清白蛋白相互作用
    2.2 实验结果与讨论
        2.2.1 化合物结构鉴定
        2.2.2 荧光猝灭机理
        2.2.3 黄酮化合物在血清白蛋白上的结合位点数与作用力类型
        2.2.4 黄酮化合物对血清白蛋白二级结构影响
        2.2.5 黄酮化合物血清白蛋白之间的能量转移和距离
        2.2.6 活性化合物在血清白蛋白上的结合位点
    2.3 小结
第三章 哌喹及其代谢产物与血清白蛋白作用研究
    3.1 实验部分
        3.1.1 药品与试剂
        3.1.2 仪器与软件
        3.1.3 实验方法
    3.2 实验结果与讨论
        3.2.1 荧光猝灭原理
        3.2.2 哌喹及其代谢产物在血清白蛋白上的结合位点数与作用力类型
        3.2.3 哌喹及其代谢产物对血清白蛋白二级结构影响
        3.2.4 哌喹及其代谢产物与血清白蛋白之间的能量转移和距离
        3.2.5 哌喹及其代谢产物在血清白蛋白上的结合位点
        3.2.6 哌喹及其代谢产物与血红素相互作用研究
    3.3 小结
第四章 利奥西呱与血清白蛋白作用研究
    4.1 实验部分
        4.1.1 药品与试剂
        4.1.2 仪器与软件
        4.1.3 实验方法
    4.2 实验结果与讨论
        4.2.1 荧光猝灭方式
        4.2.2 结合位点数与作用力类型
        4.2.3 利奥西呱对血清白蛋白二级结构影响
        4.2.4 利奥西呱在血清白蛋白上的结合位点
        4.2.5 利奥西呱血清白蛋白之间的能量转移和距离
        4.2.6 ~(19)F NMR研究利奥西呱与血清白蛋白相互作用
    4.3 小结
第五章 利用超滤法和高效液相色谱法测定化合物蛋白结合率及推导荧光淬灭参数与结合率换算函数关系
    5.1 实验部分
        5.1.1 仪器与试剂
        5.1.2 供试品溶液制备
        5.1.3 色谱条件
        5.1.4 方法学考察
    5.2 血清白蛋白结合率
    5.3 荧光猝灭参数结合率换算公式推导
    5.4 小结
第六章 总结与展望
参考文献
致谢
硕士期间撰写的文章
附录
学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]药物-血浆蛋白结合率测定方法的研究进展[J]. 关瑾,丁爽,刘芷含,董西鑫,阎峰,石爽.  中国新药杂志. 2014(10)
[2]黄酮类化合物体内过程的研究进展[J]. 曾晓丽,谢燕,袁秀荣.  中国新药杂志. 2010(09)
[3]白蛋白的历史回顾及在肝硬化治疗中的应用进展[J]. 段树全,何涛.  包头医学院学报. 2008(04)
[4]小分子配体与蛋白质作用的荧光法研究进展[J]. 张华新,颜承农,黄星,刘义,梅平.  化学与生物工程. 2005(09)
[5]探针体在蛋白质大分子上Langmuir吸附聚集及应用──蛋白质/荧光桃红B（PB）结合反应研究[J]. 郜洪文,陈运生.  高等学校化学学报. 2002(05)
[6]蛋白质与有机小分子反应机理的研究[J]. 朱铿,李娜,李克安,童沈阳.  化学试剂. 1999(01)
[7]利用标记药物布洛芬及保泰松研究萘啶酸与血清白蛋白的结合作用[J]. 徐岩,沈含熙,黄汉国.  高等学校化学学报. 1996(12)
[8]应用盐析及膜分离技术大批量制备血浆蛋白制品的新工艺[J]. 虞有文,刘毅.  中国生化药物杂志. 1993(01)

硕士论文
[1]多酚与人血清白蛋白相互作用研究[D]. 刘晓娟.上海师范大学 2017
[2]荧光猝灭法快速测定血浆蛋白结合率的理论和实验方法学研究[D]. 陈瑛.成都中医药大学 2012
[3]狗脊贯众的化学成分及质量研究[D]. 马秉智.北京中医药大学 2005



本文编号：3242544