pym-5靶向GSK-3β诱导小鼠黑色素瘤细胞分化的实验研究
发布时间：2021-07-02 20:57
[研究背景与目的]糖原合成激酶-3（GSK-3）是一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可参与肿瘤形成中Wnt/β-catenin、NF-κB等多个信号传导通路,GSK-3的表达、细胞内定位及活性与肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡及分化过程密切相关,是目前肿瘤研究中重要靶标之一[1-2]。pym-5是一种新型1H-吡唑-3-甲酰胺衍生物,体外激酶谱筛选表现出对GSK-3β的强烈选择性[3]。本研究选择化合物pym-5作为GSK-3[β的抑制剂对多种肿瘤细胞类型展开研究,确证其作用方式并阐明其确切的作用机制。[研究内容与结果]1.本实验研究首先运用小鼠黑色素瘤细胞B16、B16BL6对pym-5对肿瘤细胞分化水平的影响展开研究,通过增殖实验确认了 pym-5及前体AT7519对小鼠黑色素瘤细胞体外水平的抑制作用,通过流式细胞术检测pym-5对小鼠黑色素瘤细胞细胞周期的影响。2.在确定给药剂量及时间的基础上,通过WesternBlot手段观察pym-5对小鼠黑色素瘤细胞中GSK-3β的抑制作用,通过免疫荧光观察到,pym-5可以影响GSK-3β下游β-catenin的入核。3.通过对黑色素瘤中GSK...
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?ｐｙｍ－５的前体化合物ＡＴ７５１９??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?ＡＴ７５１９?ｉｓ?ｔｈｅ?ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ?ｃｏｍｐｏｕｎｄ?ｏｆ?ｐｙｍ－５??
?：：Ｃ：ＡＤ？，＾￡ｌ?：?：？??图１－５化合物ｐｙｍ－５的抗瘤谱筛选实验结果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－５?Ｔｈｅ?ＵＳ?Ｎａｔｉｏｎａｌ?Ｃａｎｃｅｒ?Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ?（ＮＣＩ）?Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ?Ｄｒｕｇ?Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ?Ｓｃｒｅｅｎ?ｏｆ??ｐｙｍ－５??以上初步探索结果表明，化合物ｐｙｍ－５是一种有巨大开发潜力的化合物，其具体作??用方式及作用机制尚未有明确研究。结合抗瘤谱筛选实验及ＧＥＰＩＡ?（Ｇｅｎｅ?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ??Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ?Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ?Ａｎａｌｙｓｉｓ，基因表达谱分析交互分析工具）及?ＨＰＡ?（Ｔｈｅ?Ｈｕｍａｎ?Ｐｒｏｔｅｉｎ??Ａｔｌａｓ，人类蛋白质图谱数据库）分析结果
?第二部分ｐｙｍ－５及ＡＴ７５１９在体外对小鼠黑色素瘤细胞增殖及周期的影响???种化合物对细胞增殖的作用差异性。统计结果如图所示，结果显示，不同剂量的ｐｙｍ－??５、ＡＴ７５１９作用于Ｂ１６细胞、Ｂ１６ＢＬ６细胞１２ｈ后，都具有降低细胞增殖的趋势，此外??两种化合物对细胞增殖的抑制均呈现一定程度上的剂量依赖性。结果表明：１）化合物??ｐｙｍ－５和ＡＴ７５１９对小鼠黑色素瘤细胞增殖有抑制作用，随着浓度的增加，抑制效果增??强，一定程度上呈现剂量依赖性；２）相较于前体化合物ＡＴ９７１９，?ｐｙｍ－５对Ｂ１６细胞、??Ｂ１６ＢＬ６细胞的生长抑制作用更为明显，在１２ｈ即有显著的抑制作用，ＡＴ７５１９在２４ｈ??才开始有显著的抑制作用；３）?Ｂ１６细胞株及Ｂ１６ＢＬ６细胞株中，ｐｙｍ－５在给药后低剂??量时增殖情况出现一个小幅度的上升，即低剂量的ｐｙｍ－５呈现一定的促增殖效果，亟??待进一步研宄。??ＰＹＭ－５?６ｈ?ＰＹＭ－５?１２ｈ??１．５－．－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Downregulation of LncRNAH19 and MiR-675 Promotes Migration and Invasion of Human Hepatocellular Carcinoma Cells through AKT/GSK-3β/Cdc25A Signaling Pathway[J]. 吕军,马宁,陈锡林,黄晓卉,汪谦. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2014(03)
[2]Glycogen synthase kinase-3β positively regulates the proliferation of human ovarian cancer cells[J]. Qi Cao~1 Xin Lu~1 You-Ji Feng ~1Department of Gynecology,Obstetrics and Gynecology Hospital,Fudan University,Shanghai 200011,China. Cell Research. 2006(07)
本文编号：3261216
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?ｐｙｍ－５的前体化合物ＡＴ７５１９??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?ＡＴ７５１９?ｉｓ?ｔｈｅ?ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ?ｃｏｍｐｏｕｎｄ?ｏｆ?ｐｙｍ－５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Downregulation of LncRNAH19 and MiR-675 Promotes Migration and Invasion of Human Hepatocellular Carcinoma Cells through AKT/GSK-3β/Cdc25A Signaling Pathway[J]. 吕军,马宁,陈锡林,黄晓卉,汪谦. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2014(03)
[2]Glycogen synthase kinase-3β positively regulates the proliferation of human ovarian cancer cells[J]. Qi Cao~1 Xin Lu~1 You-Ji Feng ~1Department of Gynecology,Obstetrics and Gynecology Hospital,Fudan University,Shanghai 200011,China. Cell Research. 2006(07)
本文编号：3261216
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