炭角菌属真菌Xylaria sp.DO1801主要次级代谢产物的抗肿瘤活性研究

发布时间：2021-07-30 20:58

　　目的:肿瘤的存在已经严重威胁到人类的健康以及生活质量。我们通过研究炭角菌属真菌Xylaria sp.DO1801的主要次生代谢产物（Secondary metabolites,SM）体内外抗肿瘤作用,希望能够将SM用于改善目前的肿瘤治疗方法;并且对药物处理后黑色素瘤细胞B16的代谢变化进行探究,以求从中寻找出与抗肿瘤活性相关的代谢机制。方法:（1）首先,我们用核磁共振对从Xylaria sp.DO1801中提取分离得到的主要次级代谢产物,进行化学结构检测;（2）MTT法检测SM对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用,并且通过在C57小鼠的右侧腋窝处皮下接种B16和LLC细胞构建小鼠皮下移植瘤模型,评价四种SM对肿瘤生长的影响;（3）细胞松弛素处理后,检测正常胰腺细胞HPDE6-C7和人胚肾上皮细胞HKC的细胞增殖以及正常小鼠脾细胞中CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺的细胞比例变化,以此评价药物的细胞毒性和细胞选择性;（4）计算细胞松弛素联合紫杉醇给药后对药物敏感的乳腺癌细胞MCF-7的IC50（半数抑制浓度）... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

从炭角菌属Xylariasp.DO1801真菌中提取的主要次级代谢产物，经核磁共振鉴定这四种次级代谢产物分别为19，20-环氧细胞松弛素Q（ECQ）（A）；细胞松弛素Q（CQ）

23图 2：四种主要次级代谢产物对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用。不同剂量的细胞松弛素（0~50μm）处理肿瘤细胞后用 MTT 法检测结肠癌细胞 CT-26（A）、黑色素瘤细胞 B16（B）肺癌细胞 LLC（C）、肝癌细胞 HepG2（D）、各种胰腺癌细胞 SW1990（E）、ASPC-1（F）Bxpc-3（G）、Panc02（H）的增殖情况。数据表示为平均值±标准差(mean±SD)。

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文3.3 主要次级代谢产物的细胞选择性作用为了考察细胞松弛素处理后肿瘤细胞的增殖抑制并非仅是由于细胞毒作用引起的，因此我们进一步的检测了四种细胞松弛素对正常胰腺细胞 HEDP-C6 和人源胚肾上皮细胞 HKC 的增殖影响（图 3A，B），结果发现四种细胞松弛素处理正常细胞后细胞增殖有轻微的抑制，但并不显著。进一步地，我们将正常小鼠的脾脏制成单细胞悬液，用细胞松弛素处理 48 小时后，通过流式细胞术检测脾细胞中 CD3+CD4+或 CD3+CD4+阳性细胞的比例初步评价药物对免疫细胞的影响。结果发现（图 3C），四种细胞松弛素并未明显改变脾细胞中 CD4+或 CD8+细胞的比例。以上的结果说明四种细胞松弛素主要针对恶性增殖的肿瘤细胞发挥增殖抑制作用，对正常细胞的影响较小，具有一定程度的细胞选择性。


本文编号：3312116