穿膜肽GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体的处方优化及细胞毒性研究

发布时间：2021-08-14 07:05

　　目的:制备穿膜肽GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体,对其处方进行优化,并初步评价其对乳腺癌细胞的体外毒性。方法:采用薄膜分散法和硫酸铵水化法,将柔红霉素和薯蓣皂苷包载其中,在表面以聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺2000(DSPE-PEG₂₀₀₀)-GGPFV修饰,制备GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体。以包封率为指标,采用Box-Behnken响应面法优化处方中水化体积、胆固醇用量和柔红霉素用量;测定按最优处方制备的3批脂质体的包封率。比较柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体、GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体和空白脂质体作用后对人乳腺癌MDA-MB-435S细胞存活率的影响。结果:最优处方为水化体积5 mL、胆固醇4 mg、蛋黄卵磷脂22 mg、柔红霉素0.55 mg、薯蓣皂苷0.85 mg、DSPE-PEG₂₀₀₀3.5 mg、DSPE-PEG₂₀₀₀-GGPFV 2 mg。所制3批脂质体中,柔红霉素的包封率为（96.21±1.54）%,薯蓣皂苷的包封率为（95.39±2.48）%。体外细胞毒性试验显示,GG... 

【文章来源】：中国药房. 2020,31(21)北大核心

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【部分图文】：

高效液相色谱图

根据表2结果，通过Design Expert 8.0.6软件得到了Y的拟合方程：Y=46.480 1-8.522 5A-1.011 7B+159.423 3C+1.087 9AB+3.326 7AC+4.730 0BC+0.349 6A2-0.104 7B2-173.460 0C2(R2=0.918 2,P<0.05）。由此表明，该拟合模型可较好地反映响应值Y的变化，可用于筛选GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体的最佳处方。对上述拟合模型进行方差分析，结果见表3。由表3可知，B、C、AB、BC、B2、C2项对响应值Y具有显著影响（P<0.05），而A、AC、A2项对其无显著影响（P>0.05）。固定其中任一因素水平为0，即可生成其余2个因素对包封率影响的等高线图（图2）和响应面图（图3）。由图2、图3可见，在固定磷脂用量、柔红霉素与薯蓣皂苷摩尔比的情况下，B和C对响应值Y的影响较大，而A对其无显著影响。根据本课题组前期研究结果以及上述处方优化结果，将GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体最优处方确定为水化体积5 m L、胆固醇4 mg、EPC 22 mg、柔红霉素0.55 mg、薯蓣皂苷0.85 mg,DSPE-PEG20003.5 mg、DSPE-PEG2000-GGPFV 2 mg。依照该处方平行制备3批GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体，并测定其包封率。结果显示，柔红霉素的包封率为（96.21±1.54）%，预测值为98.05%，相对误差为1.91%；薯蓣皂苷的包封率为（95.39±2.48）%，预测值为82.71%，相对误差为13.29%。另对按上述方法（不加DSPE-PEG2000-GGPFV）制备的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体的包封率进行了测定，结果显示柔红霉素的包封率为（91.38±2.53）%，薯蓣皂苷的包封率为（92.01±1.86）%，表明GGPFV修饰对两药的包封率无明显影响。

根据本课题组前期研究结果以及上述处方优化结果，将GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体最优处方确定为水化体积5 m L、胆固醇4 mg、EPC 22 mg、柔红霉素0.55 mg、薯蓣皂苷0.85 mg,DSPE-PEG20003.5 mg、DSPE-PEG2000-GGPFV 2 mg。依照该处方平行制备3批GGPFV修饰的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体，并测定其包封率。结果显示，柔红霉素的包封率为（96.21±1.54）%，预测值为98.05%，相对误差为1.91%；薯蓣皂苷的包封率为（95.39±2.48）%，预测值为82.71%，相对误差为13.29%。另对按上述方法（不加DSPE-PEG2000-GGPFV）制备的柔红霉素/薯蓣皂苷脂质体的包封率进行了测定，结果显示柔红霉素的包封率为（91.38±2.53）%，薯蓣皂苷的包封率为（92.01±1.86）%，表明GGPFV修饰对两药的包封率无明显影响。2.5 不同脂质体制剂对人乳腺癌MDA-MB-435S细胞的抑制作用


本文编号：3342016