氯胺酮通过增强星形胶质细胞KAT6B基因表达提高抗氧化应激水平

发布时间：2021-08-17 06:10

　　目的探讨氯胺酮提高星形胶质细胞抗氧化应激水平的作用及分子机制。方法氯胺酮（50μmol/L）处理人星形胶质细胞（HA1800）后,分别使用比色法、WST-1法及钼酸胺法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力等氧化应激指标的改变。Western blot检测转录因子E2相关因子2（Nrf2）、蛋白组乙酰化和KAT6B蛋白水平。免疫荧光染色检测乙酰化水平和Nrf2在星形胶质细胞中的表达及定位。RT-PCR检测氯胺酮对KAT6B基因的mRNA和circRNA表达的影响。KAT6B基因siRNA转染沉默基因表达,复合氯胺酮处理,检测Nrf2、蛋白质乙酰化、GSHPx、T-SOD和CAT水平。结果 50μmol/L氯胺酮处理12 h可显著提高HA1800细胞GSH-Px、T-SOD和CAT活力（P <0.05）。50μmol/L氯胺酮处理3,6,12,24 h,HA800细胞内Nrf2、乙酰化和KAT6B的表达均明显增加（P <0.05）,且以12 h最明显。免疫荧光结果显示,与0μmol/L比较,50μmol/L氯胺酮处理1... 

【文章来源】：山西医科大学学报. 2020,51(08)

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【部分图文】：

氯胺酮对HA800细胞抗氧化应激酶活力的影响

50μmol/L氯胺酮处理HA1800细胞后，结果显示Nrf2、KAT6B和乙酰化水平均显著提高(Nrf2:F(4,10)=93.53,P<0.000 1;KAT6B:F(4,10)=43.79,P<0.000 1;乙酰化:F(4,10)=40.51,P<0.000 1，见图2)。免疫荧光结果分析也发现与0μmol/L比较，50μmol/L氯胺酮处理星形胶质细胞12 h，乙酰化表达明显增加(P=0.032 0，见图3);使用50μmol/L氯胺酮处理HA1800细胞12 h,Nrf2蛋白聚集于细胞核周围(见图4)，提示该蛋白出现核转移现象。图3 免疫荧光染色显示氯胺酮对HA1800细胞乙酰化表达的影响

图2 50μmol/L氯胺酮作用不同时间对HA1800细胞Nrf2、KAT6B及乙酰化蛋白表达的影响图4 氯胺酮调节Nrf2蛋白在HA1800细胞中的亚细胞定位


本文编号：3347223