Riccardin D纳米晶被动靶向与多功能纳米胶束主动靶向释药系统的研究

发布时间：2021-11-01 08:54

　　羽苔素（Riccardin D, RD）,是由苔藓植物地钱中提取分离得到的一种新型的双联苄类化合物,具有抗真菌、逆转真菌多药耐药性、以及诱导细胞凋亡等多种药理作用。然而RD溶解性差导致的低生物利用度等系列问题阻碍了其转向临床应用的可能。为此,本文拟通过制备RD纳米混悬剂,增加其溶解度,提高生物利用度,以达到临床前药学评价的目的。在完成临床前药学评价的基础上,以RD为模型药物,以生物相容性好的羧甲基壳聚糖-脱氧胆酸为骨架材料,接枝具有pH敏感性的聚（β-氨基酯）和能够识别多种肿瘤细胞受体靶点的叶酸,并在胶束外层连接PEG亲水端,制备成在体内具有pH敏感性、主动靶向性且延长循环时间的多功能胶束,以延长RD制剂的半衰期并增强其主动靶向性。因此,全文分为两个部分：第一部分为RD临床前药学评价的一部分,即RD纳米混悬液的研究；第二部分在第一部分基础上进行深入研究,以开发新剂型和新技术为目的,制备成RD多功能胶束。在本课题第一部分研究中,采用沉淀法和微射流法两种方法制备了纳米混悬液。通过透射电镜观察其形态,并对其粒径分布、表面电荷进行了研究。在沉淀法中,以溶解RD的乙醇溶液等有机相作为溶剂,将稳定... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：197 页

【学位级别】：博士

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符号说明
中文摘要
ABSTRACT
第一部分 Riccardin D纳米混悬液的制备、理化性质以及体内药动学研究
    前言
    第一章 RD纳米混悬液制备工艺的研究
        一、材料与仪器
            1. 实验材料
            2. 实验仪器
        二、实验方法与结果
            1. RD含量测定方法的建立
                1.1 检测波长的确定
                1.2 标准曲线的建立
                1.3 精密度试验
                1.4 回收率试验
            2. 沉淀法制备RD纳米混悬液的工艺考察
                2.1 有机溶剂的筛选
                2.2 沉淀温度对粒径的影响
                2.3 搅拌速度对粒径的影响
                2.4 不同的稳定剂对纳米混悬液粒径的影响
            3. 微射流法制备RD纳米混悬液的工艺考察
                3.1 均质压力和次数对粒径的影响
                3.2 均质压力对Zeta电位的影响
            4. RD纳米混悬液理化性质的考察
                4.1 RD纳米混悬液的制备
                4.2 RD纳米混悬液的表面形态观察
        三、讨论
    第二章 RD纳米冻干针剂的研究
        一、材料与仪器
            1. 实验材料
            2. 实验仪器
        二、实验方法与结果
            1. 冻干工艺的确定
                1.1 冻干保护剂的评价方法
                1.2 冻干保护剂种类的选择
                1.3 冻干保护剂用量的选择
                1.4 冻干工艺
            2. RD纳米晶冻干粉的质量评价
                2.1 外观及再分散性
                2.2 表面形态
                2.3 DSC分析
                2.4 X-射线衍射分析
            3. RD纳米结晶溶解度研究
                3.1 试剂与仪器
                3.2 标准曲线的配制
                3.3 测试条件
                3.4 样品处理
                3.5 实验结果
            4. 体外溶出度研究
            5. 冻干针剂的初步稳定性考察
        三、讨论
    第三章 RD纳米混悬液在小鼠体内组织分布的研究
        一、材料与仪器
            1. 实验材料
            2. 实验动物
            3. 实验仪器
        二、实验方法与结果
            1. 生物样本中RD含量测定方法的建立
                1.1 样品的处理方法
                1.2 色谱条件
                1.3 方法专属性考察
                1.4 RD标准储备液的配制
                1.5 标准曲线的建立
                1.6 精密度实验
                1.7 回收率试验
            2. 实验方法
                2.1 分组及给药方法
                2.2 取样方法及取样点的设计
                2.3 体内分布研究
                    2.3.1 织分布测定结果
                    2.3.2 体内分布特点
                    2.3.3 靶向性评价
        三、讨论
    第四章 RD纳米混悬液大鼠体内药物动力学的研究
        一、材料与仪器
            1. 实验材料
            2. 实验动物
            3. 实验仪器
        二、动物实验方法与结果
            1. 大鼠血浆中RD含量测定方法的建立
                1.1 样品的处理方法
                1.2 色谱条件
                1.3 方法专属性考察
                1.4 标准曲线的建立
                1.5 精密度实验
                1.6 回收率实验
            2. 实验方法
                2.1 分组及给药方法
                2.2 取样方法及取样点的设计
                2.3 体内药物动力学研究
                    2.3.1 血药浓度-时间曲线的建立
                    2.3.2 体内药动过程分析
        三、讨论
第二部分 Riccardin D纳米胶束的制备、理化性质以及体内药动学和药效学研究
    前言
    第五章 叶酸靶向修饰的pH敏感的壳聚糖胶束的制备和理化性质考察
        一、材料与仪器
            1. 材料
            2. 仪器
        二、实验方法
            1. 叶酸-脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的制备
            2. pH敏感材料的合成
            3. pH敏感材料对脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的修饰
            4. 多功能胶束的表征
            5. 多功能胶束的制备
            6. 胶束的粒径分布和Zeta电位的测定
            7. 透射电镜(TEM)表面形态的观察
            8. 临界胶束浓度的测定
            9. 溶血性实验评价
        三、结果与讨论
            1. 多功能胶束的理化性质表征
            2. 空白多功能胶束的自组装行为
            3. 多功能胶束的临界胶束浓度
            4. 溶血实验
        四、结论
    第六章 载RD的多功能胶束的制备和理化性质研究
        一、材料与仪器
            1. 材料
            2. 仪器
        二、实验方法与结果
            1. RD含量测定方法的建立
                1.1 RD标准储备液的制备
                1.2 RD检测波长的确定
                1.3 RD色谱条件
                1.4 RD专属性实验
                1.5 RD标准曲线的建立
                1.6 RD精密度实验
                1.7 RD回收率实验
            2. 聚合物纳米胶束中RD的含量测定
            3. 载药量和包封率的测定
            4. 载RD的多功能胶束的制备
                4.1 载RD胶束的制备方法
                4.2 载药方法的筛选
                4.3 RD多功能胶束制备工艺的考察
                    4.3.1 超声功率考察
                    4.3.2 超声时间考察
                    4.3.3 药质比考察
                4.4 RD纳米胶束的载药工艺优化
            5. 载RD多功能胶束的理化性质考察
                5.1 RD包封率和载药量考察
                5.2 透射电镜(TEM)对表面形态的观察
                5.3 载药多功能胶束的粒径分布
                5.4 载药多功能胶束的电位
                5.5 载药多功能胶束的稳定性考察
            6. 载RD多功能的体外释放行为研究
                6.1 实验方法
                6.2 载RD多功能胶束在不同pH环境下的体外释放实验
        三、讨论
    第七章 载RD多功能胶束体外抗肿瘤活性研究
        一、材料与仪器
            1. 材料
            2. 仪器
        二、实验方法与结果
            1. 细胞的复苏与培养
            2. 空白多功能胶束的细胞毒性实验
                2.1 空白胶束的制备
                2.2 空白胶束的细胞毒性实验
            3. 胶束的细胞摄取机制研究
                3.1 载香豆素-6纳米胶束的制备
                3.2 细胞对载香豆素-6胶束的摄取
            4. 载RD胶束对MCF-7毒性实验
                4.1 MTT细胞实验
                4.2 MCF-7细胞荧光实验
                4.3 MCF-7细胞凋亡实验
                4.4 MCF-7细胞周期实验
        三、讨论
    第八章 载RD多功能胶束给药系统的小鼠体内组织分布研究
        一、材料与仪器
            1. 材料
            2. 仪器
            3. 实验动物
        二、实验方法与结果
            1. 小鼠生物样品中RD含量测定方法的建立
                1.1 样品的处理方法
                1.2 色谱条件考察
                1.3 方法专属性考察
                1.4 标准曲线的建立
                1.5 精密度考察
                1.6 回收率考察
            2. 小鼠体内实验
                2.1 分组及给药方法
                2.2 取样方法及取样点的设计
            3. 体内组织分布研究
                3.1 小鼠组织分布结果
                3.2 体内分布特点
                3.3 小鼠体内靶向性评价
            4. 药代动力学分析
        三、讨论
    第九章 载RD多功能胶束在荷瘤小鼠中的药效学研究
        一、材料与仪器
            1. 材料
            2. 仪器
            3. 实验动物
        二、实验方法与结果
            1. 荷乳腺癌MCF-7裸鼠的制备
            2. 对荷乳腺癌MCF-7裸鼠的抑瘤实验
        三、讨论
全文结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文目录
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]冷冻干燥技术在制药工业中研究应用[J]. 宋迎,高晶.  科技促进发展. 2011(S1)
[2]高压射流均质机的超微粉碎机理研究[J]. 刘斌,吴雪,刘美莲,冯涛.  食品工业科技. 2009(10)
[3]水飞蓟宾磷脂复合物的制备与大鼠生物利用度的研究[J]. 肖衍宇,宋赟梅,陈志鹏,平其能.  药学学报. 2005(07)

硕士论文
[1]两亲性壳聚糖衍生物的制备及基础性质研究[D]. 范雅珣.扬州大学 2009



本文编号：3469883