美罗培南治疗药物监测的HPLC方法探索及其临床采样流程建立

发布时间：2021-11-11 15:40

　　目的:建立HPLC法测定人血浆中美罗培南的血药浓度,结合其稳定性研究制定临床采样流程,并应用到治疗药物监测个体化给药方案设计。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白,取上清加水稀释后进样分析;色谱柱为Venusil HILIC（4.6 mm×250 mm,5.0μm）;流动相为50 mmol·L^-1磷酸二氢钾含0.05%甲酸-乙腈（30∶70,V/V）;流速0.8 mL·min^-1;检测波长为299 nm;柱温40℃;分别考察美罗培南全血、溶血样本在不同温度、不同采血管等条件下的稳定性。结果:美罗培南在0.38～71.30μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999 9）,定量下限为0.38μg·mL^-1,低、中、高浓度的萃取回收率在101.87%～107.89%,日内、日间RSD均小于2.81%;以EDTA-K2为最佳的临床采血管,EDTA-K2管和肝素钠管中的美罗培南能在室温（19～22℃）下稳定4 h;溶血样本在2～6℃冰箱存放7 h稳定,但相对于EDTA-K2管和血浆质控,肝素钠管会使美罗培南检出... 

【文章来源】：中国医院药学杂志. 2020,40(12)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

美罗培南典型色谱图

取空白血浆及美罗培南对照品溶液,按“2.4.2”项下制备美罗培南低、中、高3个质量浓度(0.76,9.45,59.07 μg·mL-1)的质量控制(QC)样品,经2～6 ℃冰箱、室温(19～22 ℃)放置6 h、反复冻融3次、-40 ℃冰箱冻存20 d及质控处理液于4 ℃进样器放置22 h,结果表明美罗培南在这些条件下均稳定;此外考虑到临床实际采血情况,还考察了不同采血管如EDTA-K2管、肝素钠管在2～6 ℃冰箱、室温(19～22 ℃)及37 ℃稳定性试验箱存放0,1,2,4,6,24,48 h对美罗培南的影响,结果见图2,美罗培南全血样本在肝素钠、EDTA-K2管2～6 ℃存放下6～24 h开始降解,放置48 h降解约10%;室温(19～22 ℃)存放下6 h开始降解,48 h降解约35%;37 ℃稳定性试验箱存放1～2 h开始降解,48 h后肝素钠管降解约90%;EDTA-K2降解约70%。相比于EDTA-K2管,肝素钠管受温度及存放时间影响较大;此外还考察EDTA-K2管和肝素钠管溶血样本是否对检测结果产生干扰及其2～6 ℃冰箱存放0,1,3,5,7 h稳定性。结果表明,美罗培南在2种采血管所致溶血后2～6 ℃冰箱放置7 h稳定,相比于EDTA-K2管,肝素钠管会使美罗培南检出偏高,EDTA-K2管不影响,因此推荐临床采血时尽量以EDTA-K2管为主。3 美罗培南TDM临床采样流程的建立

我院美罗培南监测主要应用于呼吸科、老年科、ICU等科室,前期工作中临床护士经常针对患者采血部位、采血时间、采血管和样本存储条件电话咨询我科室,引起了我们对TDM规范化的思考。通过上述方法学考察并建立了美罗培南标准化的临床采样流程后,采取药师下临床发放《临床采样流程》小册子以及对医护人员进行宣讲措施,使临床护士对我院常规TDM采样流程掌握率得到有效提高,从而保证检测结果的准确性。可见标准化、规范化的临床采样流程对TDM采样、储存、转运、检测等具有重要的意义。采用本研究所建立的流程,对我院42例感染患者进行了美罗培南血样的采集、送检并进行血药浓度的测定。42例患者中男30例,女12例;呼吸科22例,老年科7例,其余病例来自肾内、重症ICU、泌尿外科、血液肿瘤科等,年龄为(77.76±10.91)(49～97)岁;谷浓度为(4.62±4.48) μg·mL-1(0.21～13.56 μg·mL-1),峰浓度为(31.28±14.48) μg·mL-1(8.98～69.34 μg·mL-1),不同剂量下患者谷浓度情况见图4。


本文编号：3489118