蚕蛹蛋白肠内营养制剂干预Ⅱ型糖尿病小鼠代谢特性的研究

发布时间：2017-05-11 00:02

  本文关键词：蚕蛹蛋白肠内营养制剂干预Ⅱ型糖尿病小鼠代谢特性的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一组由遗传因素与环境因素长期相互作用及靶组织细胞对胰岛素生物学作用障碍而引起的一种临床综合症,DM患者多伴有胰岛素分泌相对或绝对不足。根据病因可将糖尿病分为4大类:I型糖尿病、II型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)、特殊类型糖尿病及妊娠期糖尿病。迄今为止对于糖尿病发病原因尚未完全阐明,根据已有研究可将糖尿病的病因大致归为:种族与遗传因素、长期过度摄食、肥胖因素、精神因素及自身免疫因素等五类。目前糖尿病仍是一种无法根治的临床疾病,营养治疗是治疗糖尿病、减少并发症的基础。现今普遍认为,肠内营养支持是患者胃肠道功能条件允许的前提下进行营养支持的首选途径。临床通常按照不同分类方法将肠内营养制剂分为不同类别,其中,按氮源可分为氨基酸型肠内营养制剂、短肽型和整蛋白型肠内营养制剂三大类。由于传统的植物食物原料的氨基酸效价不高、而动物原料又存在诸如禽流感、口蹄疫等安全隐患,为此在研制与开发新型、有效、安全的肠内营养制剂中,氮源的选择开始转向一些新型蛋白质资源,例如蚕蛹蛋白这种药食同源性的优质昆虫蛋白资源。蚕蛹蛋白是一种较为优质的全价蛋白质资源,经酸水解后可得18种氨基酸,必需氨基酸与非必需氨基酸质量之比(约0.77)高于WHO/FAO(1973)提出的必需氨基酸与非必需氨基酸之比为0.6左右的参考蛋白模式。本研究选用通过不同提取方法得到的三种蚕蛹蛋白样品作为自制糖尿病用肠内营养制剂的蛋白质来源,包括两种蚕蛹短肽,蚕蛹短肽1(SPP1)和蚕蛹短肽2(SPP2)以及一种蚕蛹蛋白(SPP3),其中蚕蛹短肽的分子量为701.50D,SPP3样品的分子量为19586.03D,按照添加缓释碳水化合物、高单不饱和脂肪酸的配方原则,再加入其他营养成分包括脂肪(橄榄油粉剂)及碳水化合物(木薯淀粉、玉米淀粉、果糖),对应供能比分别为37.59%和42.22%,并添加膳食纤维9g及维生素和微量元素组分制得含有32种原辅材料的三种肠内营养制剂。将分别以蚕蛹短肽SPP1、蚕蛹短肽SPP2和蚕蛹蛋白SPP3为蛋白质来源的三种肠内营养混悬剂投与高脂饲料和链脲佐菌素诱导的II型糖尿病(T2DM)模型雄性昆明小鼠,3组小鼠用剂量125.4k J/kg/d肠内营养混悬剂支持四周,空白组和对照组小鼠采用普通饲料喂养。每周尾静脉取血测定小鼠空腹血糖值(FBG),第三周测定小鼠口服葡萄糖耐量(OGTT)、计算糖耐量曲线下面积(AUC),第四周取小鼠腹腔血测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)含量,并计算HDL/TC值,通过观察小鼠生活状态及检测小鼠血清生化指标评价肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠代谢的影响。结果发现,以蚕蛹短肽为蛋白源的EN制剂或以蚕蛹蛋白为蛋白质来源的EN制剂均可显著降低T2DM小鼠血糖值,SPP1、SPP2、SPP3组FBG值分别降低了47.47%、38.14%和41.52%,益力佳组仅下降了22.38%。蚕蛹短肽为蛋白源的EN制剂有调节血脂代谢、改善高血糖和高血脂等症状的作用,其中以SPP1蛋白源EN制剂降血糖功效最显著,以SPP2蛋白源EN制剂改善DM小鼠血脂代谢效果最佳。进一步选用作用效果较好的蚕蛹短肽SPP2为蛋白质来源的肠内营养制剂作为实验材料,研究其对T2DM小鼠代谢影响的作用机理。以C57BL/6为实验小鼠建立T2DM小鼠模型,DM小鼠分为5组(n=6只,雌雄各半),分别是空白组(A组)、二甲双胍+纯化日粮(PD)组(B组)、苦瓜甙+PD组(C组)、SPP源EN支持组(D组)及SPP源PD组(E组),并随机选取12只(雌雄各半)正常小鼠作为对照组(F)。各组小鼠采用对应制剂支持四周,空白组及对照组采用PD喂养。实验期间观察小鼠生活状态,每周末测定小鼠体质量(BW)及空腹血糖FBG值、第三周末进行小鼠OGTT实验及淀粉耐量实验(OSTT),第4周末小鼠腹腔主动脉取血,检测血清生化指标,冰台解剖小鼠取肝脏、小肠,试剂盒测定肝脏中己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)及小肠黏膜中α-葡萄糖苷酶(α-glu)的活性。结果发现:SPP-EN制剂可以为糖尿病小鼠提供基本营养需求的同时,还可有效改善DM小鼠生活状态及生活质量;可显著降低糖尿病小鼠血糖值(P0.01);有效缓解糖尿病小鼠餐后血糖的大幅波动,增加DM小鼠淀粉耐量,A(空白组)、B(二甲双胍组)及D(SPP-EN)组的血糖值在整个糖耐量实验中分别下降了21.92%,21.28%及16.69%;蚕蛹短肽源肠内营养制剂还可有效缓解糖尿病小鼠血脂紊乱的状况,具有调节小鼠血脂的功效;降低小鼠α-glu活性的作用(P0.01)和提高HK和PK活性。而该种制剂可以降低DM小鼠血糖的作用机理之一即源于其可降低小鼠小肠黏膜中α-glu活性、提高己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)活性。
【关键词】：蚕蛹蛋白 糖尿病 肠内营养制剂 特殊医学用途配方食品 血清生化指标
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 文章中常用词缩写4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-13
• 第一章 绪论13-20
• 1.1 糖尿病概述13-14
• 1.1.1 糖尿病的概念13
• 1.1.2 糖尿病临床分期及分型13-14
• 1.1.3 糖尿病病因及发病机理14
• 1.2 糖尿病人肠内营养配方与剂型的选择14-17
• 1.2.1 糖尿病肠内营养支持制剂现状14-15
• 1.2.2 糖尿病患者肠内营养支持选择15-16
• 1.2.3 针对糖尿病设计的特殊营养配方16-17
• 1.2.3.1 高单不饱和脂肪酸配方16-17
• 1.2.3.2 缓释碳水化合物配方17
• 1.2.3.3 膳食纤维配方17
• 1.3 蚕蛹蛋白降血糖的研究进展17-18
• 1.3.1 蚕蛹蛋白降血糖在医药方面的应用17-18
• 1.3.2 蚕蛹蛋白降血糖作用机理的研究18
• 1.4 本章小结18-20
• 第二章 蚕蛹蛋白型和蚕蛹短肽型肠内营养制剂的配制20-28
• 2.1 材料与方法20-22
• 2.1.1 材料与仪器20-21
• 2.1.1.1 材料20-21
• 2.1.1.2 仪器21
• 2.1.2 实验方法21-22
• 2.1.2.1 样品前处理21
• 2.1.2.2 分子量测定21
• 2.1.2.3 氨基酸组成分析21-22
• 2.1.2.4 主要供能物质添加量确定22
• 2.1.2.5 其他组分添加量确定22
• 2.1.2.6 肠内营养片剂的制备22
• 2.2 结果与分析22-26
• 2.2.1 蚕蛹短肽和蚕蛹蛋白的物理性质22
• 2.2.2 蚕蛹短肽和蚕蛹蛋白的氨基酸组成22-24
• 2.2.3 供能物质添加量与含量24-25
• 2.2.4 其他组分添加量与含量25
• 2.2.5 配方优化25-26
• 2.3 本章小结26-28
• 第三章 蚕蛹蛋白肠内营养混悬剂干预Ⅱ型糖尿病小鼠代谢特性研究28-34
• 3.1 材料与方法28-30
• 3.1.1 动物模型与实验设计28-29
• 3.1.2 实验小鼠分组及肠内营养支持29
• 3.1.3 检测指标与方法29
• 3.1.3.1 小鼠体质量及空腹血糖值测定29
• 3.1.3.2 口服葡萄糖耐量实验29
• 3.1.3.3 血清生化指标的测定29
• 3.1.4 统计学处理29-30
• 3.2 实验结果30-32
• 3.2.1. 蚕蛹蛋白肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠生活状态的影响30
• 3.2.2. 蚕蛹蛋白肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠空腹血糖的影响30-31
• 3.2.3. 蚕蛹蛋白肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影响31
• 3.2.4. 蚕蛹蛋白肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠脂代谢的影响31-32
• 3.3 本章小结32-34
• 第四章 蚕蛹短肽肠内营养制剂干预II型糖尿病小鼠的代谢机理研究34-49
• 4.1 材料与方法34-37
• 4.1.1 材料与仪器34-35
• 4.1.2 实验方法35-37
• 4.1.2.1 蚕蛹短肽源肠内营养制剂及普通日粮饲料的制备35
• 4.1.2.2 糖尿病小鼠模型建立35-36
• 4.1.2.3 实验小鼠分组及肠内营养支持36
• 4.1.2.4 小鼠体质量测定及脏器指数计算36
• 4.1.2.5 小鼠空腹血糖值测定36
• 4.1.2.6 口服葡萄糖耐量和口服淀粉耐量实验36
• 4.1.2.7 血清生化指标的测定36-37
• 4.1.2.8 α-葡萄糖苷酶活性的测定37
• 4.1.2.9 已糖激酶（HK）和丙酮酸激酶（PK）活性的测定37
• 4.1.2.10 统计学处理37
• 4.2 实验结果37-46
• 4.2.0 蚕蛹短肽肠内营养制剂对糖尿病小鼠生活状态及体重的影响37-39
• 4.2.1 蚕蛹短肽肠内营养制剂对糖尿病小鼠脏器指数的影响39
• 4.2.2 蚕蛹短肽肠内营养制剂对糖尿病小鼠空腹血糖的影响39-40
• 4.2.3 蚕蛹短肽肠内营养制剂对糖尿病小鼠口服葡萄糖及淀粉耐量的影响40-42
• 4.2.4 蚕蛹短肽肠内营养混悬剂对糖尿病小鼠脂代谢的影响42-44
• 4.2.5 蚕蛹短肽肠内营养制剂对 α-葡萄糖苷酶活性的影响44-45
• 4.2.6 蚕蛹短肽肠内营养制剂对已糖激酶和丙酮酸激酶活性的影响45-46
• 4.3 本章小结46-49
• 第五章 总结49-51
• 参考文献51-56
• 致谢56-57
• 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 施自伦;李朝品;刘群红;;蚕蛹蛋白的现代研究概况[J];安徽农业科学;2009年07期

2 李彦芹;;肠内营养制剂的特点和应用选择[J];临床药物治疗杂志;2009年06期

3 粟晖;李军生;刘柳;石荣贵;;蚕蛹蛋白的水解工艺研究[J];粮油加工;2008年11期

4 王彤,周国用,汤秀群,赵泳谊,冯自由,马静,凌文华;链脲佐菌素和高脂肪饲料诱导的实验性2型糖尿病小鼠模型[J];中国糖尿病杂志;2000年02期

5 陈伟;江华;陶晔璇;舒晓亮;;《中国糖尿病医学营养治疗指南》的建立与解读[J];中国医学科学院学报;2011年03期

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本文编号：355756