N-乙酰基色胺的异源生物合成和抑藻活性研究

发布时间：2022-07-03 19:46

　　目的 用Streptomyces lividans GX28异源合成N-乙酰基色胺,并研究N-乙酰基色胺的抗赤潮藻活性。方法 前期研究发现Bacillus atrophaeus C89芳香族氨基酸脱羧酶（aromatic l-amino acid decarboxylase,AADC）能将L-色氨酸脱羧成L-色胺。氨基酸多序列比对发现S.lividans GX28基因组中存在使色胺乙酰化的酶。通过克隆、重组将aadc基因转入S.lividans GX28中构建重组菌株,HPLC检测目标产物,NMR鉴定化合物的结构。检测化合物对3种赤潮微藻的毒性。结果 S.lividans GX28中的蛋白WP₀15609847.1含有芳烷基胺N-乙酰转移酶（alkyl amine N-acetyltransferase,AANAT）的底物结合位点(P₆₄和F₁₈₈)和催化位点(Y₁₆₈),推测其为AANAT。宿主的发酵产物中分离得到N-乙酰基色胺。N-乙酰基色胺对墨西哥原甲藻的生长具有较强的抑制作... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要试剂与仪器
        1.1.2 菌株、质粒、引物和藻株
        1.1.3 主要培养基
    1.2 方法
        1.2.1 氨基酸多序列比对推测S. lividans GX28中AANAT类乙酰转移酶
        1.2.2 aadc基因的克隆和重组表达载体pJNA2554的构建
        1.2.3 重组质粒pJNA2554电转化E. coli ET12567
        1.2.4 重组质粒pJNA2554转移至S. lividans GX28
        1.2.5 重组菌S. lividans SJNA18发酵产物分析与结构鉴定
        1.2.6 赤潮微藻的生物测定方法
2 结果与分析
    2.1 氨基酸多序列比对推测结果
    2.2 重组菌S. lividans SJNA18发酵产物的分析、提取与结构鉴定
    2.3 N-乙酰基色胺对3种赤潮微藻生长的影响
3 讨论与结论



本文编号：3655532