新狼毒素A抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞糖酵解和迁移

发布时间：2022-11-01 17:50

　　目的研究新狼毒素A（Neochamae jasmin A,NCA）在体外对小鼠黑色素瘤B16F10细胞糖代谢及迁移的影响。方法采用黄酰罗丹明B（SRB）法检测NCA对细胞增殖的影响;采用划痕实验检测NCA对细胞迁移的影响;利用试剂盒检测NCA对B16F10细胞中乳酸（LD）水平、葡萄糖摄取量和ATP含量的改变及对己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）和乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响;利用RT-PCR法检测糖酵解及迁移相关基因的表达。结果 NCA显著抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖和细胞划痕愈合,下调MMP-2和MMP-9 mRNA的表达,上调TIMP-1、TIMP-2mRNA的表达;下调GLUT1、PKM2、LDHA mRNA的表达,浓度依赖性的抑制ATP的产生和乳酸的释放,减少葡萄糖的摄取,降低糖酵解关键酶HK、PK、LDH的活性。结论推测NCA抑制B16F10细胞增殖和迁移可能与调节肿瘤细胞糖酵解有一定相关性。 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞系
        1.1.2 药品与试剂
        1.1.3 仪器
    1.2 细胞培养及储备液配置
    1.3 细胞活力测定
    1.4 细胞划痕实验
    1.5 B16F10细胞中ATP含量测定
    1.6 细胞乳酸(LD)含量测定
    1.7 细胞培养液中葡萄糖(GOD)含量测定
    1.8 丙酮酸激酶(PK)的活性测定
    1.9 己糖激酶(HK)的活性测定
    1.1 0 乳酸脱氢酶(LDH)的活性测定
    1.11 GLUT1、LDHA、PKM2、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达的测定
    1.1 2 统计学分析
2 结果
    2.1 NCA抑制B16F10细胞增殖
    2.2 NCA抑制B16F10细胞迁移
    2.3 NCA抑制B16F10细胞ATP的生成
    2.4 NCA减少B16F10细胞乳酸生成
    2.5 NCA减少B16F10细胞葡萄糖的摄取
    2.6 NCA抑制己糖激酶(HK)，丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力
    2.7 NCA下调GLUT1、LDHA、PKM和MMP-2、MMP-9的表达，上调TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[3]片仔癀对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制研究[J]. 胡彦辉,崔庆丽,马东阳,耿良.  中草药. 2019(22)
[4]新狼毒素A诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的机制研究[J]. 丁杨芳,李德芳,陈小宇,任博雪,赵微,郑秋生.  天然产物研究与开发. 2019(07)
[5]恶性肿瘤有氧糖酵解关键酶研究进展[J]. 李影,刘红宁,邓晓霞,吴晓慧,林色奇.  江西中医药. 2019(01)
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[7]甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响[J]. 马晓懿,杨新惠,郑秋生.  中国实验方剂学杂志. 2015(18)
[8]狼毒乙素和新狼毒素A的抗肿瘤作用[J]. 汪群红,陈雪芬,胡敏,项雪燕.  中华中医药学刊. 2013(11)
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硕士论文
[1]瑞香狼毒石油醚提取物化学成分及抗癌活性研究[D]. 张世锋.西北大学 2017
[2]岩大戟内酯B对小鼠黑色素瘤B16F10细胞糖酵解及凋亡的影响[D]. 高彩霞.滨州医学院 2017



本文编号：3699829