依托咪酯对脂多糖诱导Kupffer炎症反应及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/白细胞介素-1β通路的影响

发布时间：2023-03-01 20:47

　　目的探索依托咪酯对脂多糖(LPS)诱导Kupffer细胞(KCs)炎症反应及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)通路的影响。方法用SD大鼠分离和培养KCs,并将细胞随机分为空白组、模型组、对照组和低、高浓度实验组。空白组在正常条件下培养;模型组给予1μg·mL^-1 LPS刺激3 h;对照组在模型组的基础上,给予0.1μmol·mL^-1右美托咪定培养24 h;低、高浓度实验组在模型组的基础上,分别给予0.1和0.2μg·mL^-1依托咪酯培养24 h。用实时荧光定量聚合酶链反应检测KCs中极化基因的表达水平,用Western blotting法检测KCs细胞NLRP3小体相关蛋白表达,用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果分离KCs的ED1阳性率为(96.32±4.82)%。干预后,低、高浓度实验组和空白组、模型组、对照组的TNF-αmRNA分别为3.72±0.63,2.46±0.59,0.92±0.11,4.73±0.54和3.6...

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        动物
        药品与试剂
        仪器
    2 实验方法
        2.1 SD大鼠KCs细胞分离和培养
        2.2 用免疫荧光化学检测KCs纯度
        2.3 分组与给药方法
        2.4 用RT-PCR检测KCs极化基因水平
        2.5 用Western blotting法检测KCs细胞NLRP3小体相关蛋白表达
        2.6 用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中IL-1β和TNF-α水平
    3 统计学处理
结 果
    1 SD大鼠分离出的KCs细胞观察
    2 KCs中极化基因mRNA表达水平的差异
    3 KCs中NLRP3相关蛋白表达水平的差异
    4 KCs细胞培养液中炎症因子水平的差异
讨 论



本文编号：3752214