高糖环境下西格列汀对大鼠心肌细胞纤维化过程中转录激活蛋白-1及骨膜蛋白表达的影响

发布时间：2023-04-12 04:35

　　目的探讨在高糖环境下西格列汀对大鼠心肌细胞纤维化过程中骨膜蛋白(POSTN)及转录激活蛋白-1表达(AP-1)的影响。方法将大鼠心肌细胞H9c2复苏后接种于含体积分数10%胎牛血清的改良型洛斯维1640培养基持续培养,并用无血清培养基继续培养使其同步化;将同步化的H9c2细胞分为对照组、高糖损伤组及西格列汀处理组,对照组H9c2细胞予以普通培养液,高糖损伤组H9c2细胞予以葡萄糖浓度为33.0 mmol·L^-1的培养基,西格列汀处理组H9c2细胞予以终浓度为33.0 mmol·L^-1葡萄糖+0.1μmol·L^-1西格列汀的培养基。采用细胞计数试剂盒-8检测细胞活力。酶联免疫吸附试验检测H9c2细胞上清液中Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)表达水平;免疫组织化学法检测H9c2细胞中AP-1蛋白表达水平;反转录-聚合酶链反应检测H9c2细胞中POSTN和AP-1 mRNA表达水平。结果高糖损伤组和西格列汀处理组H9c2细胞增殖活力均显著高于对照组(P <0.05);西格列汀处理组H9c2细胞增殖活力显著低于高糖损伤组(P <...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞、主要试剂与仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养及分组
        1.2.2 CCK-8检测H9c2细胞增殖活力
        1.2.3 ELISA检测H9c2细胞上清液中COLⅢ表达水平
        1.2.4 免疫组织化学法检测H9c2细胞中AP-1表达水平
        1.2.5 RT-PCR检测H9c2细胞中POSTN、AP-1mRNA表达水平
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 3组H9c2细胞增殖活力比较
    2.2 3组H9c2细胞上清液中COLⅢ表达水平比较
    2.3 3组H9c2细胞中AP-1表达水平比较
    2.4 3组H9c2细胞中POSTN和AP-1 mRNA表达水平比较
3 讨论



本文编号：3790441