新型表皮生长因子受体（EGFR）小分子荧光探针的单分子成像研究

发布时间：2023-05-22 02:19

　　表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR),是以表皮生长因子和转化生长因子等生长因子为配体的受体酪氨酸激酶。与配体结合后EGFR会发生自发聚合,激活其激酶活性而自磷酸化,并传导到细胞内的多条信号通路,如MAPK、PI3K-Akt信号通路等。自从EGFR被发现以来,大量的临床数据证明其对多种疾病,尤其是癌症有重要的影响。EGFR会在癌症组织中发生大量的扩增和多位点的突变。近年来,随着精准医疗的迅猛发展,针对EGFR的分子靶向药物开始进入市场。例如特异性共价结合EGFR T790M等突变的第三代EGFR小分子抑制剂奥希替尼(又名AZD9291)。虽然其可有效地延长病人约8-10个月的生存,但在临床使用中仍旧会由于EGFR的C797S等突变或旁路信号通路的持续激活等多种因素而产生耐药。进一步对EGFR进行各个方面的研究仍旧有很大的需求。新近发展的以单分子荧光成像为基础的超高分辨率显微成像技术,突破了光学衍射极限的限制,能够获得高于光学分辨率水平的荧光图像。一些特定的荧光分子,包括一些荧光蛋白和荧光小分子,在强的激光的照射下能够在特定的还原性...

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 表皮生长因子受体(EGFR)简介
        1.1.1 EGFR家族和其基因编码
        1.1.2 EGFR的结构
        1.1.3 EGFR的信号转导过程和其生物功能
        1.1.4 EGFR在癌症中的变异和靶向其的药物
    1.2 超高分辨显微镜与单分子成像简介
        1.2.1 超高分辨显微镜和单分子成像发展简史
        1.2.2 单分子成像的一般步骤
        1.2.3 单分子成像的一些具体应用
    1.3 EGFR单分子成像的研究进展
    1.4 常用单分子成像的探针与EGFR单分子成像标记方法现状
    1.5 EGFR小分子荧光探针P48 基本情况和科学问题的提出
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 质粒
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验仪器
        2.1.5 实验耗材
        2.1.6 实验药物
        2.1.7 实验所用试剂溶液配制方法
    2.2 实验方法
        2.2.1 激发发射光谱和荧光强度测量方法
        2.2.2 细胞培养、冻存与复苏和转化
        2.2.3 蛋白样品聚丙烯酰胺凝胶电泳、荧光扫描和免疫印迹方法
        2.2.4 dSTORM显微镜下单分子成像方法
    2.3 计算方法与统计学分析
        2.3.1 计算聚合程度变化的方法
        2.3.2 统计学分析
第3章 实验结果
    3.1 P48 探针的光物理性质
    3.2 P48 探针的结合特性
    3.3 不同细胞EGFR的活性及P48 对其的影响
    3.4 P48 探针单分子成像及单分子性质
    3.5 P48 探针单分子成像观测细胞EGFR聚集
第4章 结论与讨论
    4.1 结论
    4.2 讨论
第5章 单颗粒追踪技术记录分析DNA/PEI纳米颗粒进入细胞的过程
    5.1 研究背景
    5.2 研究结果
第6章 抑制G9a促进膀胱癌细胞凋亡作用的免疫印迹研究
    6.1 研究背景
    6.2 研究结果
参考文献
附录
致谢
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果



本文编号：3821805