生物制品中氨基酸成分的研究
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【摘要】:蛋白质相应结构序列的信息一直被认为是生命科学领域中重要的信息,所有的生命的物质基石就是我们俗称的蛋白质。生命的延续和蛋白质也是有关系的,假如我们有蛋白质缺乏,有可能会出现身体素质变差,抵抗能力减退,贫血乏力,发育迟缓,更重者则会出现全身性水肿,甚至可能危及人们的生命安全。因此我们要提高对蛋白质的认识。而蛋白质的基本单位是氨基酸。因此对氨基酸的研究以及成分分析就显得至关重要了。可参与蛋白质合成和能够提供细胞营养成分的基本氨基酸有20多种,主要以下面两种形式存在于自然界中,一种是以自由氨基酸的形式存在于我们的身体的体液里或者是相关的培养基中和食物中。另一种是以结合氨基酸的形式存在于蛋白质或者药物肽之中。本实验是结合氨基酸柱前衍生的方法先对色谱条件进行优化,为了实现对动物细胞培养基中氨基酸的准确测定,对流动性缓冲液、流动性p H值、色谱柱、柱温、梯度进行分析优化,建立新的色谱分析方法,使得20种氨基酸在36分钟内完全分离,检测的分离程度、准确程度、线性都取的了良好的结果。
【关键词】:生物制品 氨基酸 分析方法
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R917
【目录】:
- 提要5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-12
- 第一章 前言12-19
- 1.1 氨基酸的概述12
- 1.2 蛋白质的概述12-13
- 1.3 蛋白质的结构和检测方法13-15
- 1.3.1 蛋白质的初级结构和检测方法13-14
- 1.3.2 蛋白质的次级结构和检测方法14
- 1.3.3 蛋白质的三级结构和检测方法14
- 1.3.4 蛋白质的四级结构和检测方法14-15
- 1.4 对蛋白质中氨基酸分析的意义15
- 1.5 本文设想及实验方案15-19
- 1.4.1 培养基中游离氨基酸的检测15-16
- 1.4.2 蛋白质或多肽中氨基酸的检测16-17
- 1.4.3 建立快速氨基酸测序17-19
- 第二章 实验材料和方法19-51
- 2.1 实验材料19-22
- 2.1.1 仪器19
- 2.1.2 主要试剂及配制19-22
- 2.2 实验方法22-51
- 2.2.1 培养基中游离氨基酸的检测22-45
- 2.2.1.1 分析方法22-30
- 2.2.1.2 分析方法的验证30-43
- 2.2.1.3 培养基中游离氨基酸的检测43-45
- 2.2.2 多肽和蛋白质中氨基酸的检测45-47
- 2.2.2.1 仪器及色谱参数45
- 2.2.2.2 样品溶液配制45-46
- 2.2.2.3 氨基酸测定46-47
- 2.2.3 建立快速氨基酸测序47-51
- 2.2.3.1 样品准备47
- 2.2.3.2 Edman降解第1轮反应47-48
- 2.2.3.3 Edman降解第2轮反应48
- 2.2.3.4 Edman降解第 3、448-49
- 2.2.3.5 Edman降解第N轮反应49
- 2.2.3.6 分析49-50
- 2.2.3.7 试验过程中的注意事项50-51
- 第三章 实验结果与讨论51-63
- 3.1 培养基中游离氨基酸的结果与讨论51-56
- 3.1.1 培养基中游离氨基酸的结果51-56
- 3.1.2 培养基中游离氨基酸的讨论56
- 3.2 蛋白质或多肽中氨基酸的结果与讨论56-59
- 3.2.1 蛋白质或多肽中氨基酸的结果56-59
- 3.2.2 蛋白质或多肽中氨基酸的讨论59
- 3.3 建立快速氨基酸测序的结果与讨论59-63
- 3.3.1 快速建立氨基酸测序的结果59-62
- 3.3.2 快速建立氨基酸测序的讨论62-63
- 第四章 结论63-64
- 讨论64-65
- 参考文献65-67
- 致谢67
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