1.p53-MDM2/MDMX相互作用抑制剂的设计、合成与表征2.新型糖基化多肽的合成、表征及抗体制备

发布时间：2023-11-27 20:21

　　恶性肿瘤已日益常见,成为严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。抑瘤蛋白p53及其负性调节蛋白MDM2与MDMX之间的相互作用与众多肿瘤的发生、发展密切相关。因此,p53-MDM2/MDMX蛋白蛋白相互作用已经成为设计抗肿瘤药物的重要靶标。目前MDM2和MDMX的拮抗剂主要分为肽类和小分子两大类,这两种类型的拮抗剂均有自身的优势和明显的不足之处。小分子拮抗剂主要存在与靶蛋白的亲和力不强,以及难以同时抑制MDM2和MDMX两大缺陷。而肽类拮抗剂主要存在体内不稳定以及透膜能力不强两大缺陷。第一节中,首先本文利用文献调研总结得到已知抑制剂的Alog P和MW指标将NCI数据库中23万化合物缩减至13万左右,随后利用两个五点药效团模型再次将数据库范围压缩至6万左右,最后利用分子对接技术筛选购买得到38个虚拟活性化合物,其中有10个化合物经过基于荧光偏振的结合实验证明具有一定的结合活性,在随后的子结构搜索中,我们又成功筛得一系列新型骨架的MDM2和MDMX的双重拮抗剂,其中NSC148171对MDM2和MDMX的结合常数Ki值分别达到了0.62和4.6μM。本文开发了药效团模型结合分子对接手段...

【文章页数】：191 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
第一部分 p53-MDM2/MDMX相互作用抑制剂的设计、合成与表征
    摘要
    英文摘要
    缩略词表
    第一章 研究背景
        一、p53-MDM2/MDMX与肿瘤的关系
        二、p53-MDM2/MDMX复合物的结构研究
        三、p53-MDM2/MDMX抑制剂的发展
        四、前期工作基础和技术平台
    第二章 课题设计与研究内容
        一、p53-MDM2/MDMX小分子抑制剂的筛选.
        二、p53-MDM2/MDMX肽类抑制剂PMI系统性突变分析
        三、基于DTC的新型硫脂订书肽的设计
        四、引入D氨基酸的PMI的设计
    第三章 实验结果与讨论
        一、新骨架p53-MDM2/MDMX小分子抑制剂的发现
        二、超强p53-MDM2/MDMX肽类抑制剂的设计
        三、新型硫脂订书肽的合成、活性与结构分析
        四、D氨基酸引入PMI提高抗肿瘤活性
    第四章 实验材料与方法
        一、仪器设备
        二、材料与试剂
        三、多肽的固相合成
        四、硫脂订书肽的合成
        五、荧光偏振结合实验
        六、等离子共振结合实验
        七、脂质体的制备与多肽的包裹
        八、MTT细胞抗增殖实验
        九、免疫印迹实验
        十、分子对接和药效团模型
        十一、等温滴度量热法
        十二、多肽与MDM2或MDMX的复合物结晶
        十三、数据收集和结构解析
    第五章 总结与展望
    第六章 文献综述
    参考文献
第二部分 新型糖基化多肽的合成、表征及抗体制备
    摘要
    英文摘要
    缩略词表
    第一章 研究背景
        一、蛋白翻译后糖基化修饰的重要性
        二、精氨酸鼠李糖基化修饰的意义
        三、蛋白庚糖基化修饰的意义
        四、特异性抗体制备的意义
        五、前期工作基础和技术平台
    第二章 课题设计与研究内容
        一、特异性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗体的设计
        二、特异性靶向丝氨酸庚糖基化的多克隆抗体的设计
    第三章 实验结果与讨论
        一、精氨酸鼠李糖肽的设计与合成
        二、特异性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗体的制备
        三、多克隆抗体的蛋白水平的表征
        四、丝氨酸庚糖肽的设计与合成
        五、特异性靶向丝氨酸庚糖基化的多克隆抗体的制备
    第四章 实验材料与方法
        一、仪器设备
        二、材料与试剂
        三、精氨酸鼠李糖肽的合成
        四、丝氨酸庚糖肽的合成
        五、动物免疫和特异性纯化
        六、酶联免疫吸附实验
        七、免疫印迹实验
    第五章 总结与展望
    参考文献
在读期间发表论文与科研工作情况说明
致谢
附录



本文编号：3868509