基于P70S6K1靶点研究索拉非尼耐药性肝癌细胞的分子机制

发布时间：2024-03-05 06:05

　　目的:为了探索p70S6K1是否参与肝细胞癌对索拉菲尼的耐药,以及探讨索拉菲尼诱导耐药后p70S6K1对肝癌细胞的分子作用机制,从而明确p70S6K1作为耐药性肝癌的潜在治疗靶标,丰富肝癌治疗手段。方法:1、收集了肝癌患者手术标本及病例资料92例,分析其临床生化检验指标以及选取其中20例经10%福尔马林固定、取材、包埋、制片后,经常规HE染色后选取典型蜡块,应用免疫组织化学染色检测耐药性肝细胞内源性p70S6K1,TOPO II,TP53,Ki-67蛋白表达的变化,另外进一步利用RT-PCR检测耐药性肝细胞内源性p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁组织种的表达。2、构建索拉菲尼耐药HepG2细胞株,采用荧光定量PCR检测索拉菲尼耐药HepG2细胞内p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁组织种的表达。进而进一步运用CCK8细胞增殖法和免疫荧光染色法探讨细胞生长与增殖状况,进而评价耐药性对细胞存活的影响。3、应用shRNA技术构建索拉菲尼耐药HepG2细胞株p70S6K1敲低模型,通过转染后克隆实验进一步验证p70S6K1对耐药性肝癌细胞增殖作用。然后通过免疫荧光检测p70S6K1敲...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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个人简历
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前言
第一部分 p70S6K1与临床索拉菲尼耐药性肝细胞癌发病的相关性研究
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 实验讨论
    5 小结
第二部分 p70S6K1对索拉菲尼耐药性肝癌细胞的作用及分子机制的研究
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 实验讨论
    5 小结
参考文献
综述
    参考文献
致谢
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