基于胆汁酸代谢的丙戊酸肝毒性相关机制研究

发布时间：2025-01-17 13:50

　　目的:丙戊酸（Valproic acid,VPA）为一线广谱抗癫痫药物（AED）,可单独使用或联合其他AEDs治疗各种类型的癫痫。近年来因其抑制组蛋白去乙酰化酶（HDACs）活性而成为肿瘤治疗的辅助药物。鉴于VPA临床应用的广泛性,其严重不良反应肝毒性引起了临床医生的普遍关注。目前普遍认为VPA及其活性代谢产物通过抑制线粒体β氧化功能酶、消耗肉碱和辅酶A、引起氧化应激反应和高氨血症等途径导致肝脏毒性,然而VPA肝毒性机制仍然存在争议。代谢组学致力于研究生物体对药物干预、疾病、环境以及遗传修饰等因素影响的最终应答,为药物性肝损伤机制的探究以及生物标志物的筛选提供了新思路。本课题拟利用非靶向代谢组学技术检测VPA致肝功能异常癫痫患儿血清中代谢图谱的变化,筛选差异性代谢物,探寻差异性代谢通路,并在动物和细胞中进行相关机制研究。研究方法:1、VPA致肝功能异常癫痫患儿血清样本的收集:收集于中国医科大学附属盛京医院就诊的癫痫儿童（年龄≤16周岁）血清样本及病历信息,并根据肝功能指标将患儿分为肝功能正常（NLF）组和肝功能异常（ABLF）组;2、VPA致肝功能异常癫痫患儿血清中差异性代谢物和代谢通路...

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.1不同模式下代表性总离子流色谱图

本研究采用HPLC-QTOF/MS技术平台对23例癫痫患儿血清样品在不同模式下进行代谢组学分析,图1.1是选取代表性样本的总离子流色谱(TIC)图。为了保证数据采集的稳定性与可靠性,在血清样本前处理后得到的所有样品中取出等体积少部分样品制备质控样品。在实际检测过程中,每4个检测样....

图1.2基于高分辨MS/MS代谢组学数据库对VPA致肝功能异常癫痫患儿血清中代谢组学数据进行PCA-DA分析

为了保证数据采集的稳定性与可靠性,在血清样本前处理后得到的所有样品中取出等体积少部分样品制备质控样品。在实际检测过程中,每4个检测样品中穿插1个质控样品。在TIC图的前中后分别选取3个离子进行提取,分析质控样品中这3个离子的保留时间和峰面积变异。通过主成分判别(PCA-DA)分析....

图1.3基于XCMS软件对VPA致肝功能异常癫痫患儿血清代谢组学数据进行PCA分析

在基于高分辨MS/MS代谢组学数据库的数据分析中,PCA-DA模型(图1.2)显示,在不同的色谱系统和离子化模式下,ABLF和NLF两组患儿血清样品均明显区分。通过单变量和多元变量统计分析,最终得到25种差异性代谢物,包括氨基酸、糖类、胆汁酸和脂肪酸等,其相应P值、变化倍数和VI....

图1.4 VPA致肝功能异常癫痫患儿血清中差异性代谢通路

为了进一步探索VPA致肝功能异常代谢模式的改变,本研究分别对基于高分辨MS/MS代谢组学数据库分析得到的25种差异性代谢物和基于XCMS数据库分析得到的差异性代谢物进行代谢通路富集与分析,两种方法相互验证、相互补充。其中,基于XCMS软件分析所得到的差异性代谢通路如图1.4。结合....

本文编号：4028147