Nrf2转录因子介导双酚类化合物致SK-N-SH细胞损伤及机制研究

发布时间：2025-02-10 20:11

　　目的:观察双酚类化合物双酚A(Bisphenol A,BPA)及双酚S(Bisphenol S,BPS)对神经细胞系SK-N-SH细胞生长的影响,探讨Nrf2转录因子在BPA及BPS致细胞氧化应激及凋亡的作用,进一步阐明其细胞毒性的机制。方法:1、用不同浓度的BPS(0、50、100、150、200、250、300、350、400μmol/L)或BPA(0、50、100、150、200μmol/L)处理SK-N-SH细胞48 h后,采用MTT法检测细胞活力;用分光光度法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、总活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量;免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Nrf2的蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。2、用20μmol/L的Nrf2激活剂t-BHQ(特丁基对苯二酚)预处理SK-N-SH细胞30 min后再与BPS(100μmol/L)或BPA(100μmol/L)共孵育处理48 h,分光光度法测定ROS、SOD、MDA、GSH的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
主要英文缩略词
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验细胞株及培养、传代、冻存和复苏
        2.1.2 试验药物溶液配制和实验分组
        2.1.3 主要实验试剂和材料
        2.1.4 主要仪器
        2.1.5 主要实验相关溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 MTT法检测细胞活力
        2.2.2 DCFH-DA法测定细胞ROS的含量
        2.2.3 TBA法测定细胞MDA的含量
        2.2.4 .微量酶标法测定细胞GSH的含量
        2.2.5 WST-1 法测定细胞SOD的含量
        2.2.6 罗丹明123染色测定细胞线粒体膜电位
        2.2.7 PI染色法检测细胞周期
        2.2.8 Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡
        2.2.9 Western Blot法检测相关目的蛋白
    2.3 统计分析
第3章 结果
第4章 讨论
    4.1 双酚A及双酚S对 SK-N-SH细胞造成损伤并能诱导氧化应激
    4.2 NRF2 转录因子在双酚A及双酚S对 SK-N-SH细胞的作用
    4.3 BPA及 BPS介导SK-N-SH细胞氧化应激诱导的凋亡
第5章 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：4033012