新型铂类化合物Pt（0506）101的抗胃癌作用及其机制研究

发布时间：2017-06-06 12:10

  本文关键词：新型铂类化合物Pt（0506）101的抗胃癌作用及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景：胃癌(gastric cancer)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,近年来世界各国的胃癌发病率和病死率均显著上升。顺铂、卡铂等传统铂类药物一直作为治疗癌症的经典化疗药,但是其副作用和耐药性问题却不容忽视,因此十分有必要研发新型铂类替代药物。Pt(0506)101是一种新合成的铂类化合物,本文通过离体细胞实验和整体动物实验,初步研究和探讨了Pt(0506)101的抗胃癌作用及机制。方法：1.整体(动物)试验：建立裸鼠MGC-803人胃癌移植瘤模型,尾静脉注射给药,每4天给药1次,共5次。氟尿嘧啶作为阳性对照药。每3天测量小鼠体重及肿瘤大小1次。给药结束后拍照并取肿瘤称重。2.离体(细胞)试验：采用MTT法检测Pt(0506)101对两种胃癌细胞的体外细胞毒作用,流式细胞仪检测Pt(0506)101作用后的人胃癌细胞MGC-803的细胞周期、凋亡率的变化情况。3.作用机制研究：1)在人胃癌MGC-803细胞中加入不同浓度的Pt(0506)101,并以氟尿嘧啶和卡铂作为阳性对照药,48 h后检测凋亡蛋白以及信号通路相关蛋白表达情况。2)用不同浓度Pt(0506)101处理MGC-803细胞24h,并以氟尿嘧啶和卡铂作为阳性对照药,实时RT-PCR法检测p53基因、TNF-α细胞因子的mRNA表达情况。3)用501μM浓度Pt(0506)101处理MGC-803细胞15min、 30min、60min,用western blot测定JNK磷酸化水平,探究药物激活/JNK通路时间情况。结果：1.整体试验结果：Pt(0506)101-120mg/kg能抑制裸鼠人胃癌MGC-803移植瘤的生长,且与0.5%GS对照组比较有显著性差异,MGC-803的肿瘤抑制率为56.14%,效果好于阳性对照药5-FU(抑制率为25.56%)。2.离体试验结果：1)Pt(0506)101对SGC-7901、MGC-803等胃癌细胞株的细胞毒作用较强,作用不及顺铂,却明显强于对卡铂,和氟尿嘧啶接近,且呈时间和剂量双重依赖性。对人胃癌耐药株SGC-7901/DDP较顺铂敏感,提示Pt(0506)101可能对某些已经耐药的肿瘤细胞株能起到显著的杀伤效果。2)Pt(0506)101预处理MGC-803胃癌细胞48 h,能显著地呈剂量依赖促进细胞发生凋亡(P0.01),其效果远好于5μM顺铂和50μM卡铂。3)Pt(0506)101能诱导人胃癌细胞周期的改变,减少G1期细胞的比例,同时增加S期细胞比例。提示Pt(0506)101可能是通过对MGC-803阻滞在细胞S期来抑制细胞增殖,进而诱导细胞凋亡。3.作用机制研究：1)Pt(0506)101呈浓度依赖上调抑癌蛋白Bax的表达,下调促癌蛋白Bcl-2的表达,显著性地提高Bax/Bcl-2的比例。2)Pt(0506)101能显著上调p53抑癌基因]mRNA转录水平。3)Pt(0506)101能激活MAPK通路.JNK磷酸化蛋白表达,且给药刺激15min后磷酸化水平上升,30min后达到高峰,60 min后减少,而总JNK蛋白的含量无明显改变,提示／JNK的激活可能早于细胞凋亡(24h)。结论：综上所述,Pt(0506)101尾静脉注射给药能抑制裸鼠MGC-803胃癌移植瘤的生长；Pt(0506)101对各胃癌细胞株均有较强的细胞毒活性；体外能诱导胃癌细胞发生凋亡,并阻滞细胞于S期。其作用机制可能通过激活/JNK信号通路,上调凋亡相关抑癌蛋白Bax,下调促癌蛋白Bcl-2表达,从而减少肿瘤血管生成,阻止细胞转移,遏制肿瘤细胞生长并促进肿瘤细胞凋亡。
【关键词】：新型铂类药物 胃癌 凋亡 信号通路 MAPK p53
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R96
【目录】：

• 致谢5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 缩略语11-13
• 1. 引言13-15
• 2. 材料与方法15-26
• 3. 整体实验结果26-36
• 4. 讨论36-39
• 5. 进一步工作展望39-40
• 参考文献40-44
• 综述44-57
• 参考文献52-57

【参考文献】

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1 唐成德,徐弘;顺铂、氟尿嘧啶在胃癌化疗中的应用[J];国外医学(肿瘤学分册);1999年04期

2 檀碧波;李勇;范立侨;赵群;王冬;刘羽;;抑制Vav3基因表达对胃癌细胞凋亡抑制蛋白及肿瘤多药耐药性的影响[J];第二军医大学学报;2015年02期

3 吴蕾蕾,华东,朱寿兴,朱为民;DLF交替HLF方案治疗中晚期胃癌与MF、HLF方案对比疗效观察[J];淮海医药;2002年03期

4 郑彩娟,张爱霞;以羟基喜树碱为主联合化疗治疗晚期胃肠道恶性肿瘤的疗效观察[J];潍坊医学院学报;2002年01期

5 娄丙祥;计骏;蔡劬;周尘飞;石海龙;陈雪华;于颖彦;刘炳亚;张俊;朱正纲;;达沙替尼联合奥沙利铂协同抑制胃癌细胞增殖和迁移[J];内科理论与实践;2013年04期

6 刘学军;檀碧波;吴胜春;韩杰;;胃癌组织Survivin和Ki-67表达与体外化疗药物敏感性的关系[J];中国全科医学;2010年05期

7 梁发;谢忠;;ERCC1、BRCA1在胃癌中的研究进展[J];齐齐哈尔医学院学报;2011年02期

8 孙利兵;杨光;;顺铂结合CIK细胞对裸鼠人胃癌模型体内的抗肿瘤作用[J];世界华人消化杂志;2010年12期

9 檀碧波;李勇;赵群;范立侨;王力利;许夕霞;田夏青;李瑞利;郝英杰;贾楠;;老年患者胃癌组织的体外化疗药敏性与凋亡抑制蛋白p53、生存素、Bcl-2表达的关系[J];江苏医药;2012年07期

10 李晓花;薛天阳;许伟;高吉照;;Caspase3在MG-132诱导白血病L1210细胞凋亡过程中的作用[J];中国小儿血液与肿瘤杂志;2010年03期

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本文编号：426318