雌激素对髓鞘再生的影响及机制研究

发布时间：2017-08-21 08:30

  本文关键词：雌激素对髓鞘再生的影响及机制研究

  更多相关文章： Cuprizone 雌激素 脱髓鞘模型 卵巢去势 MBP GFAP NG2 Olig2

【摘要】：目的:评价雌激素对髓鞘再生的影响并探讨其可能的机制,为脱髓鞘疾病损伤的治疗提供新的思路。方法:66只雌性6周龄C57 BL/6小鼠适应性喂养一周后,随机分为6组(n=11):正常组、脱髓鞘模型组、自然恢复组(脱髓鞘后自然恢复2周)、雌激素治疗组(脱髓鞘后雌二醇E2(5mg/kg体重,治疗2周)、卵巢去势组(脱髓鞘后卵巢去势,2周后观察)和假手术组(脱髓鞘后假手术,2周后观察)。小鼠脱髓鞘模型以0.2%Cuprizone(CPZ)混合饲料连续饲喂6周方式诱导。通过免疫组织化学染色方法检测小鼠脑组织内髓鞘碱性蛋白MBP(Myelin basic protein)的表达,评价髓鞘脱失及再生的程度;以行为学实验方法检测激素治疗对小鼠运动能力的影响;以western blot技术及免疫组化实验方法检测小鼠脑组织内MBP、少突胶质细胞前期细胞标记物NG2(nerve glial antigen 2)、少突胶质细胞转录因子2 Olig2(oligodendrocyte transcription factor 2)、星形胶质细胞标记物GFAP(glial fibrillary acidic protein)的表达情况,旨在探讨雌激素对髓鞘再生的影响及其可能的机制。结果:1动物模型制作免疫组织化学检测显示,正常组小鼠胼胝体区MBP染色深,结构均匀致密(平均光密度值为0.18±0.05),而脱髓鞘模型组(平均光密度值为0.08±0.04)MBP染色较浅,结构松散、稀疏,块状不均匀,表达较正常组显著降低(P0.05),证实脱髓鞘模型建立成功。脱髓鞘小鼠卵巢去势后经连续阴道涂片(连续5天)HE染色,镜下可见大量白细胞,无角化的上皮细胞,即小鼠处于发情间期,证实卵巢去势模型建立成功。2体重变化正常组小鼠体重逐渐缓慢增长,CPZ诱导小鼠脱髓鞘过程中前2周小鼠体重急剧下降,之后缓慢增长,但体重始终低于同龄正常组;停止CPZ饲喂后给予E2治疗组小鼠体重比自然恢复组小鼠及卵巢去势组小鼠体重明显增加(P0.05)。3运动能力检测在旋转棒实验中,脱髓鞘模型组小鼠在旋转棒上的维持时间明显短于正常组小鼠(P0.05);自然恢复组较脱髓鞘模型组在棒上的时间延长(P0.05);给予雌激素治疗后小鼠在棒上的维持时间较自然恢复组小鼠延长(P0.05);卵巢去势组小鼠在棒上的维持时间与自然恢复组相比未见显著差异(P0.05),假手术组小鼠在棒上的维持时间与自然恢复组相比未见显著差异(P0.05)。4免疫组化结果正常组、脱髓鞘模型组、自然恢复组及卵巢去势组在小鼠胼胝体区均仅可见NG2阳性细胞(在胞浆表达),即少突胶质细胞前体细胞。脱髓鞘模型组NG2阳性细胞数较正常组增多(P0.05);自然恢复组与脱髓鞘模型组NG2阳性细胞数组间未见明显差异(P0.05);雌激素治疗组NG2阳性细胞数量较自然恢复组明显增多(P0.05),提示给予雌激素治疗后少突胶质细胞前体细胞增殖;卵巢去势组与自然恢复组之间未见明显差异(P0.05),假手术组与自然恢复组之间未见明显差异(P0.05)。正常组小鼠脑胼胝体区可见少量Olig2、GFAP阳性细胞(在胞浆表达),脱髓鞘模型组Olig2、GFAP阳性细胞数较正常组显著增多(P0.05),自然恢复组及卵巢去势组Olig2、GFAP阳性细胞较脱髓鞘组减少(P0.05),但仍比正常组多,给予雌激素治疗2周后Olig2、GFAP阳性细胞数较脱髓鞘显著减少(P0.05),已接近正常组阳性细胞数量;假手术组与自然恢复组之间未见明显差异(P0.05)。5 western blot检测结果正常组、脱髓鞘模型组、自然恢复组及卵巢去势组均有NG2少量表达;脱髓鞘模型组较正常组NG2表达增多(P0.05);自然恢复组NG2与脱髓鞘模型组比较未见明显差异(P0.05);雌激素治疗组NG2表达较自然恢复组明显增多(P0.05);卵巢去势组NG2表达低于自然恢复组(P0.05)。正常组小鼠脑组织Olig2、GFAP有少量表达,脱髓鞘模型组Olig2、GFAP表达较正常组显著增多(P0.05),给予雌激素治疗后,Olig2、GFAP表达明显下降(P0.05)。自然恢复组及卵巢去势组Olig2、GFAP表达也较脱髓鞘组减少(P0.05);卵巢去势组与自然恢复组比较无统计学意义(P0.05)。结论:雌激素对髓鞘再生具有促进作用。其可能的机制是通过促进少突胶质细胞前体细胞的增殖,诱发少突胶质细胞成熟分化以增强髓鞘再生,并且通过抑制星形胶质细胞增殖来减少胶质瘢痕形成,减少瘢痕屏障,使髓鞘再生能够顺利进行。
【关键词】：Cuprizone 雌激素 脱髓鞘模型 卵巢去势 MBP GFAP NG2 Olig2
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 英文缩写10-11
• 前言11-12
• 材料与方法12-20
• 结果20-24
• 附图24-37
• 附表37-40
• 讨论40-43
• 结论43
• 参考文献43-47
• 综述 雌激素对中枢神经系统损伤保护的研究现状47-61
• 参考文献53-61
• 致谢61-62
• 个人简历62-63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王啸;徐又佳;;铁、雌激素与骨代谢“铁三角”关系[J];中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志;2013年04期

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本文编号：711860