槐耳清膏对人早幼粒白血病HL-60细胞株增殖与凋亡的影响研究

发布时间：2020-04-13 03:05

【摘要】：目的探讨不同浓度的槐耳清膏对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞株的增殖、凋亡的影响。方法将人早幼粒白血病细胞株HL-60培养至对数生长期,以不同浓度槐耳清膏(0mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml)分别培养HL-60细胞24h,48h和72h,0mg/ml为对照组,2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml为实验组,收集各分组的细胞,台盼蓝染色后进行细胞计数初步判读槐耳清膏对HL-60细胞增殖的影响;采用CCK-8细胞增殖活性检测法检测上述浓度槐耳清膏培养细胞24h,48h和72h后的吸光度,分析槐耳清膏对HL-60细胞的增殖抑制作用;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测分析槐耳清膏对HL-60细胞凋亡的影响。结果1.在倒置显微镜下观察加入槐耳清膏培养48h后,发现随着药物浓度的升高,作用时间的延长,HL-60细胞形态发生变化,细胞密度下降,折光性减低,胞体变小,细胞皱缩、破裂。2.通过细胞计数方法,不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)分别作用于HL-60细胞24h、48h和72h后,实验组除2mg/ml组在48小时外,其余各槐耳清膏浓度组HL-60细胞数在各个时间均较对照组相应时间的细胞数减少,变化具有统计学差异(P0.05)。3.CCK-8增殖活性检测实验结果显示,不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16mg/ml),对HL-60细胞的抑制率与阴性对照组相比,均有显著性差异(P0.001)。在一定浓度范围内(2-8mg/ml),随着药物浓度的增加,作用时间的延长,抑制率明显升高。16mg/ml槐耳清膏组48小时与72小时的抑制率相比,结果没有统计学意义(P0.05)。4.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析研究槐耳清膏对HL-60细胞诱导凋亡的结果显示,不同浓度(2、4、8和16 mg/ml)的槐耳清膏分别作用于HL-60细胞24h,48h和72h,细胞凋亡率高于对照组,有统计学意义(P0.01)。培养时间在24h和48h时间点,细胞凋亡率随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐升高。当培养时间达到72小时,各不同浓度实验组凋亡率与对照组相比,细胞凋亡率均增加,统计学有差异;但各不同浓度组实验组之间两两比较,结果均无统计学差异(P=0.0784)结论1.不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml),可抑制HL-60细胞增殖,在一定浓度范围内(2-8mg/ml),随着药物浓度的增加,作用时间的延长,抑制率逐渐升高。2.不同浓度槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)对HL-60细胞有诱导凋亡作用,低浓度组(2mg/ml和4mg/ml)随着时间的延长,凋亡率呈线性升高。高浓度组(8mg/ml和16mg/ml),其48小时的细胞凋亡率较24小时的凋亡率明显升高,72小时的凋亡率较48小时组下降。3.槐耳清膏可在体外抑制HL-60细胞的增殖,并促进其凋亡。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

【参考文献】