七叶树内生菌多样性、生物活性及七叶皂苷生物转化研究
发布时间：2020-12-25 10:54
七叶皂苷为我国著名药用植物娑罗子的主要活性成分,具有抗肿瘤、消炎、抗渗出等功效,应用广泛、需求量大。七叶皂苷主要来源于七叶树的干燥种子。随着野生七叶树资源过度开发利用,加之生境破坏严重,使得七叶树的野生资源越来越匮乏。本研究以秦巴山区七叶树为试材,分析其内生菌多样性,初步建立秦巴山区七叶树内生菌种质资源库;筛选代谢产七叶皂苷的内生菌,并分析其生物活性,为下一步利用微生物发酵法制备七叶皂苷奠定基础;筛选具有转化七叶皂苷为次生活性皂苷的微生物菌株,为七叶皂苷利用率提高提供新的思路。1、七叶树内生细菌的分离及生物活性研究利用组织匀浆法对七叶树进行内生细菌的分离,共获得124株纯培养菌株,初步鉴定出48株,分属4个属,优势类群为芽孢杆菌属（Bacillus）。发酵后对提取物进行抑菌试验,结果显示48株内生细菌具有不同程度的抑菌活性,其中WJ-51对四种靶标菌均具有抑制作用;对A549细胞的增值也具有抑制作用。2、七叶树内生真菌的分离及生物活性研究利用组织培养法进行七叶树内生真菌的分离,共获得168株纯培养菌株,初步鉴定出44株,分属5个门,20个属,优势门为半知菌亚门（D...
【文章来源】：陕西理工大学陕西省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1株内生细菌及其同源菌株基于16SrRNA基因序列构建的系统发育树
+ + ++ +++ + + ++++ - + +++ +++ + + 8.00-13.00 mm；++：抑菌直径为 13.00-18.00 mm；－：ameter 8.00-13.00 mm;++:Antibacterial diameter 13.00-18示，48 株细菌具有不同程度的抑菌活性，WJ61作用较好；WJ51、WJ24 对大肠杆菌的抑制作用球菌的抑制作用较好；WJ61、WJ47`、WJ87、W9、WJ64、WJ33、WJ24、WJ9 对四种靶标菌均的抑制作用强于其他菌株。类及生物活性研究定
图 2-4 七叶皂苷标品和菌株 WJ51 提取物对 A549细胞增殖的抑制作用Fig.2-4 Inhibitory effect of extract of strain and standard of aescine on proliferation of2.4 小结与讨论本研究主要对陕西省汉中市留坝县紫柏山自然保护区七叶树内生细菌进行对单菌落进行统计，结合形态学特征与分子生物学鉴定方法，来确定七叶树内多样性本研究共分离的到七叶树内生细菌 124 株，排重后筛选出内生细菌 48 株个属，分布最广的类群是芽孢杆菌属（Bacillus），通过对内生细菌的生物活性析七叶树内生细菌的抑菌活性。以常见的四种病原菌作为靶标菌，采用滤纸片分离得到的 48 株内生细菌进行抑菌活性检测，抑菌结果显示 48 株细菌具有不抑菌活性，WJ61、WJ51、WJ20 对枯草芽孢杆菌的抑制作用较好；WJ51、W杆菌的抑制作用较好；WJ57、WJ83、WJ89 对金黄色葡萄球菌的抑制作用较好
【参考文献】：
期刊论文
[1]耙齿菌EA-LJS-73产七叶皂苷培养基配方的响应面法优化[J]. 刘军生,罗阳兰,解修超,邓百万,王娇,杨玉梅. 食品工业科技. 2018(10)
[2]Aspergillus sp. EA-LJS80的分离及其发酵液提取物七叶皂苷C的生物活性[J]. 刘军生,解修超,罗阳兰,王娇,杨玉梅. 菌物学报. 2018(01)
[3]七叶树内生细菌的分离鉴定及生物活性研究[J]. 王娇,解修超,邓百万,罗阳兰,刘军生. 黑龙江农业科学. 2017(11)
[4]蓝莓中花青苷的定性分析[J]. 韩豪,秦公伟,王艳龙,刘彩芬,孙国娟,孙茜. 食品工业. 2017(08)
[5]宁夏枸杞内生菌的抗菌和抗肿瘤活性研究[J]. 代金霞,杜晓宁. 中国中药杂志. 2017(11)
[6]中华七叶树种子化学成分及生物活性研究进展[J]. 路强强,石新卫,胡浩,周军辉,崔新爱. 西北药学杂志. 2016(06)
[7]藜麦种子皂苷不同提取方法的比较研究[J]. 冯焕琴,徐雪风,杨宏伟,沈宝云,胡静,李朝周. 食品工业科技. 2016(21)
[8]娑罗子中七叶皂苷类成分的最新研究进展[J]. 熊艳,李海池,彭银,葛发欢,沈雪梅. 中药材. 2016(05)
[9]灰绿曲霉对绞股蓝皂苷的微生物转化及其生物活性[J]. 陈良华,翁梦婷,秦江,沈瑞池,陈清西,明艳林. 厦门大学学报(自然科学版). 2016(05)
[10]β-七叶皂苷钠导致静脉炎的预防及护理[J]. 于彬,陈霞. 继续医学教育. 2016(04)
博士论文
[1]七叶树属植物资源及品质研究[D]. 石召华.湖北中医药大学 2013
[2]七叶皂苷主要活性成分的药代动力学研究[D]. 刘立东.吉林大学 2012
[3]土壤微生物转化三七茎叶资源化利用的研究[D]. 韩颖.东北大学 2008
硕士论文
[1]人参中高极性人参皂苷类成分的研究[D]. 张佳音.吉林大学 2017
[2]陕西汉中古旱莲内生菌多样性的研究[D]. 王菲.陕西理工学院 2016
[3]野生与养殖大鲵肠道微生物多样性分析及产酶活性研究[D]. 刘栋.陕西理工学院 2016
[4]人参有效成分超临界萃取法提取与纯化的研究[D]. 刘鸿铖.吉林农业大学 2014
[5]芽孢杆菌A8对三七茎叶提取物的生物转化作用研究[D]. 刘丽.东北大学 2013
[6]大豆耐盐基因GmZnF1和GmPK6的耐逆功能研究[D]. 陈新.山东大学 2013
[7]商陆内生菌促进甜高粱生长和重金属土壤修复的研究[D]. 徐涛英.湖南大学 2011
[8]菌株TR-20对三七中人参皂苷转化的研究及转化产物的分离纯化[D]. 王青.上海师范大学 2009
[9]三七总皂苷对急性心肌梗死后左室重构作用的研究[D]. 郭洁文.广州中医药大学 2008
[10]三七皂苷转化菌株的筛选及其转化产物的分离纯化与鉴定[D]. 田翠.上海师范大学 2008
本文编号：2937513
【文章来源】：陕西理工大学陕西省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1株内生细菌及其同源菌株基于16SrRNA基因序列构建的系统发育树
+ + ++ +++ + + ++++ - + +++ +++ + + 8.00-13.00 mm；++：抑菌直径为 13.00-18.00 mm；－：ameter 8.00-13.00 mm;++:Antibacterial diameter 13.00-18示，48 株细菌具有不同程度的抑菌活性，WJ61作用较好；WJ51、WJ24 对大肠杆菌的抑制作用球菌的抑制作用较好；WJ61、WJ47`、WJ87、W9、WJ64、WJ33、WJ24、WJ9 对四种靶标菌均的抑制作用强于其他菌株。类及生物活性研究定
图 2-4 七叶皂苷标品和菌株 WJ51 提取物对 A549细胞增殖的抑制作用Fig.2-4 Inhibitory effect of extract of strain and standard of aescine on proliferation of2.4 小结与讨论本研究主要对陕西省汉中市留坝县紫柏山自然保护区七叶树内生细菌进行对单菌落进行统计，结合形态学特征与分子生物学鉴定方法，来确定七叶树内多样性本研究共分离的到七叶树内生细菌 124 株，排重后筛选出内生细菌 48 株个属，分布最广的类群是芽孢杆菌属（Bacillus），通过对内生细菌的生物活性析七叶树内生细菌的抑菌活性。以常见的四种病原菌作为靶标菌，采用滤纸片分离得到的 48 株内生细菌进行抑菌活性检测，抑菌结果显示 48 株细菌具有不抑菌活性，WJ61、WJ51、WJ20 对枯草芽孢杆菌的抑制作用较好；WJ51、W杆菌的抑制作用较好；WJ57、WJ83、WJ89 对金黄色葡萄球菌的抑制作用较好
【参考文献】：
期刊论文
[1]耙齿菌EA-LJS-73产七叶皂苷培养基配方的响应面法优化[J]. 刘军生,罗阳兰,解修超,邓百万,王娇,杨玉梅. 食品工业科技. 2018(10)
[2]Aspergillus sp. EA-LJS80的分离及其发酵液提取物七叶皂苷C的生物活性[J]. 刘军生,解修超,罗阳兰,王娇,杨玉梅. 菌物学报. 2018(01)
[3]七叶树内生细菌的分离鉴定及生物活性研究[J]. 王娇,解修超,邓百万,罗阳兰,刘军生. 黑龙江农业科学. 2017(11)
[4]蓝莓中花青苷的定性分析[J]. 韩豪,秦公伟,王艳龙,刘彩芬,孙国娟,孙茜. 食品工业. 2017(08)
[5]宁夏枸杞内生菌的抗菌和抗肿瘤活性研究[J]. 代金霞,杜晓宁. 中国中药杂志. 2017(11)
[6]中华七叶树种子化学成分及生物活性研究进展[J]. 路强强,石新卫,胡浩,周军辉,崔新爱. 西北药学杂志. 2016(06)
[7]藜麦种子皂苷不同提取方法的比较研究[J]. 冯焕琴,徐雪风,杨宏伟,沈宝云,胡静,李朝周. 食品工业科技. 2016(21)
[8]娑罗子中七叶皂苷类成分的最新研究进展[J]. 熊艳,李海池,彭银,葛发欢,沈雪梅. 中药材. 2016(05)
[9]灰绿曲霉对绞股蓝皂苷的微生物转化及其生物活性[J]. 陈良华,翁梦婷,秦江,沈瑞池,陈清西,明艳林. 厦门大学学报(自然科学版). 2016(05)
[10]β-七叶皂苷钠导致静脉炎的预防及护理[J]. 于彬,陈霞. 继续医学教育. 2016(04)
博士论文
[1]七叶树属植物资源及品质研究[D]. 石召华.湖北中医药大学 2013
[2]七叶皂苷主要活性成分的药代动力学研究[D]. 刘立东.吉林大学 2012
[3]土壤微生物转化三七茎叶资源化利用的研究[D]. 韩颖.东北大学 2008
硕士论文
[1]人参中高极性人参皂苷类成分的研究[D]. 张佳音.吉林大学 2017
[2]陕西汉中古旱莲内生菌多样性的研究[D]. 王菲.陕西理工学院 2016
[3]野生与养殖大鲵肠道微生物多样性分析及产酶活性研究[D]. 刘栋.陕西理工学院 2016
[4]人参有效成分超临界萃取法提取与纯化的研究[D]. 刘鸿铖.吉林农业大学 2014
[5]芽孢杆菌A8对三七茎叶提取物的生物转化作用研究[D]. 刘丽.东北大学 2013
[6]大豆耐盐基因GmZnF1和GmPK6的耐逆功能研究[D]. 陈新.山东大学 2013
[7]商陆内生菌促进甜高粱生长和重金属土壤修复的研究[D]. 徐涛英.湖南大学 2011
[8]菌株TR-20对三七中人参皂苷转化的研究及转化产物的分离纯化[D]. 王青.上海师范大学 2009
[9]三七总皂苷对急性心肌梗死后左室重构作用的研究[D]. 郭洁文.广州中医药大学 2008
[10]三七皂苷转化菌株的筛选及其转化产物的分离纯化与鉴定[D]. 田翠.上海师范大学 2008
本文编号：2937513
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