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基于生物信息学研究茶多酚EGCG对小鼠肠道菌群及代谢的影响

发布时间:2023-02-18 20:49
  近年来,随着生物组学及高通量测序技术的蓬勃发展,利用生物信息学的分析软件和分析方法,对生物大数据进行解析,可高效全面地揭示庞大、复杂的生物数据中包含的生物学奥秘。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是茶叶茶多酚中含量最高的一种具有强抗氧化活性的多酚类物质,能有效清除机体自由基,延缓衰老。然而,EGCG抗衰老作用机制较为复杂,尚未完全清楚。本研究通过连续腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,利用UPLC-QTOF/MS代谢组学分析技术和Illumina MiSeq高通量测序技术,结合生物信息学方法,研究EGCG对衰老小鼠肠道菌群及体内代谢的影响,从而揭示衰老的生物学奥秘,探讨EGCG抗衰老作用机理。主要研究内容总结如下:(1)D-半乳糖致衰老小鼠模型的建立与EGCG的干预作用。本实验在10周内连续给小鼠腹腔注射D-半乳糖,建立衰老模型,数据显示衰老小鼠胸腺、脾脏和脑指数下降,学习记忆能力下降,肝、脑组织抗氧化能力减弱,血糖血脂升高,肾功能下降,表明模型复制成功;进一步实验结果发现EGCG能够增加衰老小鼠胸腺、脾脏和脑指数,提高肝、脑抗氧化能力、改善学习记忆能力、血糖血脂、肾功能等,提示EGCG...

【文章页数】:88 页

【学位级别】:硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 引言
    1.1 概述
    1.2 代谢组学研究进展
        1.2.1 代谢组学概念
        1.2.2 代谢组学研究过程
        1.2.3 代谢组学在衰老研究中的应用
    1.3 肠道菌群与衰老
    1.4 茶叶、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)
        1.4.1 茶叶
        1.4.2 茶多酚、EGCG
        1.4.3 EGCG生物活性
    1.5 研究内容、目的和意义
        1.5.1 研究内容
        1.5.2 研究目的和意义
第2章 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠的功效学研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 实验分组与D-半乳糖致衰老模型的建立
        2.3.2 Morris水迷宫实验
        2.3.3 样本收集
        2.3.4 小鼠脏器指数测定
        2.3.5 氧化应激测定
        2.3.6 血糖、血脂测定
        2.3.7 肾功能测定
        2.3.8 统计学分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 EGCG对衰老小鼠的一般状态观察
        2.4.2 EGCG对衰老小鼠体重的影响
        2.4.3 EGCG对衰老小鼠脏器指数的影响
        2.4.4 EGCG对衰老小鼠Morris水迷宫实验的影响
        2.4.5 EGCG对衰老小鼠抗氧化能力的影响
        2.4.6 EGCG对衰老小鼠血糖、血脂的影响
        2.4.7 EGCG对衰老小鼠肾功能的影响
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第3章 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠肠道菌群的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 样本收集
        3.3.2 氧化应激测定
        3.3.3 小鼠体外粪便含水量测定
        3.3.4 小鼠盲肠、结肠内容物和体外粪便pH测定
        3.3.5 小鼠盲肠、结肠内容物和体外粪便中SCFAs测定
        3.3.6 粪便DNA提取和PCR扩增
        3.3.7 Illumina Miseq测序及分析
        3.3.8 统计学分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 EGCG对小鼠小肠抗氧化能力的影响
        3.4.2 EGCG对衰老小鼠体外粪便含水量的测定
        3.4.3 EGCG对衰老小鼠盲肠、结肠内容物和体外粪便中pH影响
        3.4.4 EGCG对衰老小鼠盲肠、结肠内容物和体外粪便中SCFAs的测定
        3.4.7 肠道菌群的OTU及多样性分析
        3.4.8 EGCG对衰老小鼠肠道菌群的门水平组成分析
        3.4.9 EGCG对衰老小鼠肠道菌群的属水平组成分析
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第4章 EGCG对衰老小鼠血液、尿液的代谢组学研究
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 样品收集
        4.3.2 样品前处理
        4.3.3 UPLC-QTOF/MS条件
        4.3.4 数据处理
    4.4 实验结果
        4.4.1 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠血清代谢组学分析
        4.4.2 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠尿液代谢组学分析
        4.4.3 代谢通路分析
    4.5 本章小结
第5章 EGCG对衰老小鼠肠道、脑组织的代谢组学研究
    5.1 引言
    5.2 实验材料
    5.3 实验方法
        5.3.1 样品收集
        5.3.2 样品前处理
        5.3.3 UPLC-Q-TOF/MS条件
        5.3.4 数据处理
    5.4 实验结果
        5.4.1 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠肠道代谢组学分析
        5.4.2 EGCG对D-半乳糖致衰老小鼠脑代谢组学分析
        5.4.3 代谢通路分析
    5.5 本章小结
第6章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 进一步工作的方向
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果



本文编号:3745505

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