产虾青素集胞藻PCC6803(Synechocystis sp.PCC6803)细胞工厂设计与构建
【图文】:
第 1 章 引言 集胞藻 PCC6803 的类胡萝卜素合成途径在集胞藻 PCC6803 中,合成类胡萝卜素的途径(图 1.3)和雨生红球藻中萝卜素的途径相同,都是先通过非甲羟戊酸途径中合成异戊烯焦磷酸(异戊二烯途径合成类胡萝卜素的关键物质[48]。在集胞藻 PCC6803 中,胡萝卜素均通过类异戊二烯化合物合成途径合成,异戊烯焦磷酸( IPP)的前体物质,异戊烯焦磷酸(IPP)经一步步催化生成 β-胡萝卜素,β-环rtR) 催化 β-胡萝卜素,使其经过羟基作用化生成 β-隐黄素,最终生成。β-胡萝卜素在 β-胡萝卜素转酮酶(crtO/crtW)催化下向海胆酮转化。
第 2 章 产虾青素集胞藻 PCC6803 的构建接下来,根据集胞藻 PCC6803 的密码子偏好性,由 GenScript 公司(中国)优化了 882bp crtR-B (GenBank:AF162276.1) 基因的密码子。以集胞藻 PCC6803基因组为模板扩增 PpsbA2启动子片段。然后使用融合 PCR 将 PpsbA2片段和 crtR-B 片段融合在一起,并插入到 p5ST1T2 质粒的 EcoRI 和 SalI 位点之间,经抗性筛选后提取质粒,将含 crtR-B 目的片段的质粒转入至集胞藻 PCC6803 野生株中,经连续抗性筛选直至 crtR-B 基因完全转入的突突株。crtR-B-p5ST1T2 载体构建示意图如图 2.1b 所示。上面使用的引物列于表 2.3 中。
【学位授予单位】:中国科学院大学(中国科学院烟台海岸带研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:Q813
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,本文编号:2604807
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