TRAF6在家蝇免疫及生殖中的作用

发布时间：2020-10-10 17:16

　　 家蝇(Musca domestica)是一种全球广布性常见双翅目昆虫,其生存环境常常滋生大量的病原微生物,长期的进化使家蝇拥有了强大的先天性免疫系统。因此家蝇也逐渐成为人们研究先天性免疫的良好模型。在本研究中我们以家蝇为研究对象,通过家蝇转录组数据筛选出了TRAF6的同源基因MdTRAF6,其表达受细菌刺激后上调,我们推测它可能参与了家蝇的抗菌免疫反应。为了进一步验证MdTRAF6在家蝇先天性免疫中的作用,我们检测了免疫刺激后MdTRAF6的表达量变化,并且检测了干扰MdTRAF6后抗菌肽以及相应转录因子的表达量变化。同时我们意外发现利用RNAi方法敲低成蝇体内MdTRAF6基因表达后,家蝇的产卵量及幼虫存活率均受到明显影响。另外本研究构建了MdTRAF6基因亚细胞定位表达载体并转染到SF9细胞中,分析MdTRAF6在细胞中的分布情况。实验研究结果如下:1.qPCR及Western blot显示MdTRAF6在幼虫不同组织中均有分布,在肠道中表达量最高,脂肪体次之,血细胞中表达量最低。2.细菌攻毒实验表明MdTRAF6在细菌刺后表达量显著上调。3.RNAi干扰家蝇幼虫中MdTRAF6的表达后,抗菌肽Cecropin的表达量显著上调,Muscin、Attacin的表达量与对照组相比显著下调,而Diptericin的表达量虽然呈现下调趋势但是没有显著性。相关通路上转录因子的检测结果发现Relish的表达量上调,Dorsal表达量下调,JNK表达量没有显著性。4.MdTRAF6在家蝇不同发育阶段的表达量不同,在整个幼虫阶段表达量相对较稳定,呈低水平表达,在蛹和成虫期表达量最高。5.在成蝇阶段干扰MdTRAF6基因表达会使得雌蝇累计产卵量与对照组相比明显降低,同时子一代幼虫的存活率也明显降低。6.在SF9细胞中对MdTRAF6进行亚细胞定位,结果显示家蝇中TRAF6基因主要分布在细胞质中。
【学位单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：Q965
【部分图文】：

图 1-1 脊椎动物中 TRAF6 的信号转导机制（Walsh,et al，2015）Figure 1-1 Signal transduction mechanism of TRAF6 in vertebrates.已经有研究报道 TRAF6 在哺乳动物的各个组织中都有表达，为了更进一步了RAF6 的具体功能和作用，研究人员利用基因敲除技术建立了 TRAF6 敲除鼠模型。掉 TRAF6 基因的小鼠会表现出严重的石骨症，胸腺萎缩，淋巴器官缺陷，脾肿大产期死亡等现象，这说明 TRAF6 基因可能在免疫机制中起着重要的作用(Naito et a999)。研究人员为了进一步确定 TRAF6 在哺乳动物免疫系统调节中的具体作用，利RAF6 缺陷供体骨髓制备了骨髓嵌合体小鼠，并展示了多种缺陷，包括淋巴组织紊炎症性自身免疫病等，这些嵌合小鼠免疫系统破坏的严重程度揭示 TRAF6 在许多细胞类型中的重要作用(Chiffoleau et al., 2003)。此外，胸腺上皮细胞（TRAF6ΔTEC TRAF6 的特异性缺失导致胸腺髓质区域减少以及自身免疫性肝炎和自身抗体产Bonito et al., 2013)，表明 TRAF6 通过调节胸腺淋巴细胞的发育，在中枢耐受中起到作用。

河北大学硕士学位论文染时起做用(Costa et al., 2009)。这是因为革兰糖可以通过 PGRP-LC 诱导 Imd 途经的激活(G不仅可以通过革兰氏阳性菌依赖的方式激活 T聚糖，诱导激活 Imd 途经。图 1-2 显示了 Toll控。已经有研究报道 Imd 途径可能是 TAK1 下游的微生物肽的合成，还可以通过 JNK 级联放大作达。通过相同的信号转导途径，JNK 信号通路可体的免疫应答，从而使生物体在免疫防御与组003)。

图 3.1 MdTRAF6 的氨基酸组成及结构预测氨基酸组成，图 B 和 C 分别表示 MdTRAF6 的结rediction of amino acid composition and structure o composition of MdTRAF6, panels B and C repr of MdTRAF6, respectively保守性分析MdTRAF6 蛋白序列的保守性，我们首先使进行保守性预测（图 3.2A），之后使用 B物种的 TRAF6 蛋白序列进行了多重序列AF6 同源物种有很多共有的氨基酸，并且 RAF6 蛋白的 3 个特征性结构域（RING，。这说明 MdTRAF6 蛋白与其他同源物种
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘明龙;刘天喜;安海倩;崔雪;李燕;周森;王凤丽;;复肾颗粒对脂多糖诱导下人肾小管上皮细胞TRAF6表达的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2017年07期

2 李霞,肖明振,余擎,赵守亮,朱明慧,汪卫国,李锋;TRAF6在大鼠牙胚发育过程中的表达[J];实用口腔医学杂志;2005年01期

3 章国良;孙元水;唐智亮;鲁航;胡抢;倪海滨;;TRAF6表达与胃癌患者营养状况及预后的关系[J];中华肿瘤防治杂志;2017年14期

4 张娜,杨富生,刘艳丽,徐建立;体外培养破骨细胞TRAF6的表达[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2005年04期

5 张亚楼;邓强;周杨俊杰;赵阳;郭琼;蒋稥菊;岳明明;陈龙;马文静;;构建TRAF6基因3’非编码区荧光素酶报告质粒验证及与潜在靶基因TRAF6的靶向关系[J];中国组织工程研究;2019年27期

6 王玉萍;王玲玲;胡玉娜;郭军辉;郭志忠;;TRAF6在食管癌中的表达及临床意义[J];中国免疫学杂志;2015年12期

7 张芷毓;欧德琼;邬明丽;樊英智;高源;李世鹏;赖振雨;雷初朝;党瑞华;;秦川牛TRAF6基因多态及其与体尺性状的关联分析[J];中国牛业科学;2018年04期

8 任婷婷;张广宇;王泰贺;武鑫铭;吴琦;郭素芬;;TRAF6、HIF-1α在胶质瘤中的表达及与微血管密度的相关性研究[J];牡丹江医学院学报;2017年03期

9 王健;米小轶;代文博;;TRAF6表达与乳腺癌侵袭能力的关系[J];辽宁大学学报(自然科学版);2010年01期

10 陈开健;王静安;刘巧林;王荣华;徐莹;赵鑫;肖调义;;赤眼鳟TRAF6基因的cDNA克隆及其应对GCRV的免疫表达特性[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2016年06期

相关博士学位论文 前10条

1 孟召友;A20调控TRAF6聚泛素化在脑出血继发性损伤中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2017年

2 施云峰;TRAF6调控基质细胞增殖在前列腺增生带性差异中的作用及机制研究[D];南京医科大学;2018年

3 陈锋;TRAF6基因沉默对内毒素炎症反应的抑制效应研究[D];华中科技大学;2010年

4 孙华林;失神经肌萎缩的蛋白质组学研究及TRAF6在肌萎缩中的调控作用研究[D];苏州大学;2014年

5 魏劲松;miRNA-146a通过抑制IRAK1和TRAF6基因调控脊髓损伤炎症反应[D];暨南大学;2017年

6 张道良;心房纤维化机制研究—房颤患者MAPKs/TGF-β1/TRAF6信号通路的变化[D];上海交通大学;2015年

7 贺晓;USP2a通过去泛素化TRAF6负调控NF-κB的激活[D];武汉大学;2012年

8 王戬萌;miR-146a通过TRAF6调控中枢内源性IFN-β参与实验性自身免疫性脑脊髓炎病程发生发展的机制研究[D];吉林大学;2016年

9 朱稀雯;NASH中自噬通过TRAF6介导的泛素化抑制Kupffer细胞NLRP3炎症小体激活机制的研究[D];重庆医科大学;2017年

10 崔迎彬;神经生长因子高亲和力受体TrkA/真核翻译起始因子4A1（eIF4A1），干扰素-λ受体1（IFN-λR1）/肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）相互作用的分子机制及功能研究[D];北京协和医学院;2009年

相关硕士学位论文 前10条

1 王晓芬;TRAF6在家蝇免疫及生殖中的作用[D];河北大学;2019年

2 李富祥;花鲈Toll通路关键因子TRAF6和IRAK4基因在细菌刺激下的表达分析与功能研究[D];上海海洋大学;2018年

3 程永峰;TRAF6在成釉细胞瘤中表达的研究[D];山西医科大学;2010年

4 程珏;TRAF6在大鼠实验性牙周炎动物模型表达的研究[D];山西医科大学;2008年

5 乔永强;儿童乳牙根生理性吸收不同时期破牙细胞表达RANKL和TRAF6的研究[D];山西医科大学;2012年

6 洪学志;不同成熟状态下树突状细胞与TRAF6间的关系[D];桂林医学院;2016年

7 徐灿;TRAF6在人肝癌细胞中的表达及作用机制研究[D];重庆医科大学;2011年

8 陈子文;缺血性中风TRAF6基因多态性与mRNA、炎性细胞因子表达水平及MRI表现的相关性研究[D];广西中医药大学;2017年

9 任娟;IL-1β干预下TRAF6在牙周膜成纤维细胞中表达的研究[D];山西医科大学;2008年

10 刘宗杰;TRAF6、ERK、p-ERK在脑梗死大鼠脑组织的表达及槐定碱对实验性脑缺血大鼠神经保护作用[D];河北医科大学;2012年

本文编号：2835355