拟南芥根部细胞分裂素积累突变体zsr9的筛选鉴定以及功能研究
发布时间：2020-12-12 23:49
细胞分裂素作为一种重要的植物激素,在植物的生长、发育、衰老、抗病以及非生物胁迫等方面发挥着巨大的作用。在已有的文献报道中,细胞分裂素的合成代谢、信号转导方面的研究已较为详细,但转运的分子机制等方面研究尚少。AtABCG14作为植物体内细胞分裂素的转运蛋白而被发现,它能够将根部合成的trans-Zeatin（tZ）类细胞分裂素向地上组织运输。因此,为进一步研究细胞分裂素的转运机制,我们采用正向遗传学方法,借助EMS诱变建立突变体库,本研究主要进行根部细胞分裂素积累突变体的筛选、基因定位以及功能研究。具体研究结果如下:（1）以根短且根部荧光积累为标准,我们筛选到zsr9突变体。通过突变体表型分析,发现zsr9突变体表现为莲座叶小且花序小、茎细、叶绿素含量低等表型,结合qRT-PCR分析,zsr9突变体与atabcg14突变体有类似的表达模式,初步确定其与细胞分裂素之间存在联系。（2）zsr9突变基因的克隆。将突变体zsr9与两种生态型Col-4（Columbia-4）和Ler（Landsberg）进行杂交,利用杂交的F2代进行基因定位,利用回交的F2代进行表型观察,借助于图位克隆和重测序两...
【文章来源】：浙江师范大学浙江省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
拟南芥磷酸蛋白磷酸酶（PPP）催化亚基系谱图
图 3.1 zsr9 突变体的表型观察（A，B）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突变体 10 d 幼苗的根长、根部荧光，bar = 1 cm（A），Col-4 与 zsr9 突变体 10 d 根部伸长区表型（B）；（C，D）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突变体25 d 莲座叶表型，bar = 1 cm（C），25 d 莲座叶大小统计（D）；（E，F）Col-4 与 zsr9 突变体 25 d 叶绿素含量的测定（E），Col-4 与 zsr9 突变体 35 d 株高、花序表型，bar = 5 cm，（F），数据表示为平均值±SD（n = 12），显著性差异（t 检验）用*表示：*，P < 0.05；**，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.1 Phenotypes of zsr9 mutant.(A,B) The Root length, root fluorescence of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14 and zsr9mutant, scale bar = 1 cm (A), the elongation phenotype of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14and zsr9 mutant (B); (C,D) The rosette phenotype of 25-DAG Col-4, atabcg14 and zsr9 mutant,scale bar = 1 cm (C), the rosette diameter of 25-DAG wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant (D);
图 3.2 zsr9 突变体中 ARR5 基因表达量分析）Col-4、atabcg14突变体以及zsr9突变体10 d小苗的荧光表型，bar = 50 μm（；B定量检测 Col-4、atabcg14 突变体以及 zsr9 突变体的地下组织以及地上组织表达量。数据表示为平均值±SD（n = 3），显著性差异（t 检验）用*表示：*，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.2Analysis of ARR5 gene expression in zsr9 mutant) Expression of GFP fluorescence in wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant, bar = T-PCR analysis of ARR5 expression in 10-DAG plants. R, root; s, shoot. The ACTId as the control. Data are means ± SD (n = 3), significant differences (Student’icated with asterisks: *, P < 0.05 and **, P < 0.01, ***, P < 0.001.zsr9 突变体的图位克隆利用实验室已有的两种拟南芥生态型 ARR5::eGFP Col-4 和 AR
本文编号：2913478
【文章来源】：浙江师范大学浙江省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
拟南芥磷酸蛋白磷酸酶（PPP）催化亚基系谱图
图 3.1 zsr9 突变体的表型观察（A，B）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突变体 10 d 幼苗的根长、根部荧光，bar = 1 cm（A），Col-4 与 zsr9 突变体 10 d 根部伸长区表型（B）；（C，D）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突变体25 d 莲座叶表型，bar = 1 cm（C），25 d 莲座叶大小统计（D）；（E，F）Col-4 与 zsr9 突变体 25 d 叶绿素含量的测定（E），Col-4 与 zsr9 突变体 35 d 株高、花序表型，bar = 5 cm，（F），数据表示为平均值±SD（n = 12），显著性差异（t 检验）用*表示：*，P < 0.05；**，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.1 Phenotypes of zsr9 mutant.(A,B) The Root length, root fluorescence of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14 and zsr9mutant, scale bar = 1 cm (A), the elongation phenotype of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14and zsr9 mutant (B); (C,D) The rosette phenotype of 25-DAG Col-4, atabcg14 and zsr9 mutant,scale bar = 1 cm (C), the rosette diameter of 25-DAG wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant (D);
图 3.2 zsr9 突变体中 ARR5 基因表达量分析）Col-4、atabcg14突变体以及zsr9突变体10 d小苗的荧光表型，bar = 50 μm（；B定量检测 Col-4、atabcg14 突变体以及 zsr9 突变体的地下组织以及地上组织表达量。数据表示为平均值±SD（n = 3），显著性差异（t 检验）用*表示：*，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.2Analysis of ARR5 gene expression in zsr9 mutant) Expression of GFP fluorescence in wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant, bar = T-PCR analysis of ARR5 expression in 10-DAG plants. R, root; s, shoot. The ACTId as the control. Data are means ± SD (n = 3), significant differences (Student’icated with asterisks: *, P < 0.05 and **, P < 0.01, ***, P < 0.001.zsr9 突变体的图位克隆利用实验室已有的两种拟南芥生态型 ARR5::eGFP Col-4 和 AR
本文编号：2913478
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