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利用STTM技术分析拟南芥miR160和miR165/166的互作网络及玉米miR166的初步功能

发布时间:2021-01-12 05:03
  MicroRNA(微miRNA,miRNA)是一类非编码小RNA,在植物生长发育和逆境胁迫响应中起到重要作用。Short Tandem Target Mimic(短串联靶标模拟,STTM)技术能够高效、特异沉默目标miRNA家族,而其他miRNAs的表达和功能则不受影响,在miRNA的作用机制和miRNA间的互作网络研究中发挥着巨大的功效。本研究利用STTM技术分析拟南芥miR160和miR165/166的互作网络,以及玉米miR166的作用机制。为了鉴定拟南芥中miR160和miR165/166的互作网络,通过两个单突变体STTM160和STTM165/166的杂交,获得了双突变体STTM160×165/166,鉴定了双突变体的叶片发育和干旱胁迫的表型转变,分析了miR160和miR165/166及其靶基因的表达水平。利用转录组和小RNA测序技术,比较了单、双突变体中miRNA和基因的表达差异。利用高性能液相色谱(HPLC)技术,比较了单、双突变体中IAA和ABA的相对含量,阐明了miR160和miR165/166互作对叶片发育和干旱耐性的影响。此外,为了验证玉米中miR166的作用... 

【文章来源】:河南农业大学河南省

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

利用STTM技术分析拟南芥miR160和miR165/166的互作网络及玉米miR166的初步功能


植物miRNA的生物合成(RogersandChen,2013)

植物,机制,靶基因,顶端分生组织


图 2:植物 miRNA 的作用机制(Huntzinger and Izaurralde, 2011)。Figure 2. Mechanisms of microRNA-mediated gene silencing in plants (Huntzinger and Izaurralde, 2011).1.1.4 miRNA 与生长发育miRNA 及其靶基因处于基因表达调控的核心位置,在植物生长发育过程中起到重要作用,参与植物根、叶、花等器官的发育(表 1)。其中,miR165/166 和 miR394 调控顶端分生组织的发育,miR165/166 和 miR390 调控营养分生组织发育,miR156 和 miR172 调控生殖分生组织发育,miR164、miR319、miR396 调控叶的发育,miR169 和 miR172 调控花的发育(图 3)。例如,miR160-ARF、miR164-NAC、miR167-ARF、miR393-AFB3 调节根的生长发育,参与根冠形成,主根和侧根生长,以及不定根的生成[18,19]。miR164 高表达,靶基因 NAC 的 mRNA 水平降低,侧根数量增多。miR164 低表达,靶基因 NAC 的 mRNA 水平升高,侧根数量减少[20]。miR165/166-HD-ZIPIII、miR164-CUC 调节茎的生长发育,参与顶端分生组织的建立与维持,腋生分生组织的发育与分化[18,19]。PHB/PHV/REV 功能缺失突变 体 出 现 器 官 极 性 改 变 , 分 生 组 织 丧 失 , 维 管 束 发 育 缺 陷[21]。 miR164-CUC 、

生长发育,小RNA


Table1. The miRNA and target in plant development.NA Target Function156 SPL flower development159 MYB seed development160 ARF root development164 CUC root/shoot/leaf development165/166 HD-ZIPIII root/meristem/leaf development167 ARF flower/root development169 NY-FA root development171 SCL flower development172 AP2 flower development319 TCP leaf development390 TAS3 leaf development393 TIR1/AFB root development394 LCR meristem development396 GRF leaf development399 PHO2 root development


本文编号:2972205

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