比率荧光探针定量检测生物样品中的甲基乙二醛
发布时间：2021-01-12 09:04
生物体内存在过量的甲基乙二醛（MG）会引发一系列的疾病,其中糖尿病与MG的过量水平有着重要的关系,因此定量检测生物体内的MG浓度对糖尿病的研究具有重要意义。色谱分析方法包括HPLC,以及色谱-质谱方法的联用如LC-MS和GC-MS,均被用于检测MG的水平,然而它们需要昂贵的仪器和运行成本,并且样品制备往往需要长时间的衍生化处理。因此,开发一种简单、高效的检测方法具有重要意义。荧光探针具有优异的选择性、灵敏度和良好的生物成像功能被广泛用于生物样品的检测,其中比率荧光法以两个不同波长处荧光强度的比值作为响应信号以确定目标物浓度。由于不受环境影响因素的影响,其检测的准确性得到提高。本文使用比率荧光探针WHL45对生物样本中的MG进行特异性检测,主要展开了以下三方面的研究工作:（1）比率荧光探针定量方法的构建和动物血清中的MG浓度的检测。本文利用比率荧光探针WHL45对MG特异性识别的特点,综合考虑缓冲溶液中WHL45与MG反应的动力学参数,采用标准加入法确定MG的线性浓度范围,从而构建MG的定量检测方法。以胎牛血清（FBS）样品为实例,检验了该方法的可行性。（2）将WHL45应用于生物样品人...
【文章来源】：华中师范大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MG在生理系统中的形成门
颂士学位论文??ＭＡＳＴＥＲ＇Ｓ?ＴＨＥＳＩＳ??衰竭和帕金森病的体内模型中增加［９，１３，１４二２＿２４］。较高浓度的？＾〇与糖尿病和??的线粒体功能障碍有关［１６，２５］，也会导致心血管疾病［２６］，氧化应激［５］，血脂异??细胞脱落和失巢凋亡［１３］，细胞凋亡［２８】和ＤＮＡ链断裂频率增加［１８］。９９％的ＭＧ??１代谢消耗，从而保护蛋白质组和基因组。ＧＬＯｌ沉默会导致ＭＧ，?ＭＧ－Ｈ１??ｄＧ浓度的增加，导致早产和衰老［２９］，动脉粥样硬化邮，３Ｕ，高血压［２９］，慢性??病，胰岛素抵抗［３Ｇ］和炎症［３２］。２０１２年国际牙科联合会表示：“糖尿病和心血??现在是全球疾病负担和死亡的主要原因［３３］”。因此ＭＧ的研宄对于人类健康，??疾病治疗具有重要意义。对细胞，组织和体液中ＭＧ浓度测量的需求也日益??
荧光检测法以简单，快速的响应，和对活细胞中动态生物过程的实时和原位监??测的能力，被广泛用于复杂的生物样品分析中［６＆７２］。荧光检测法的核心即荧光探针。??荧光探针一般由三部分构成如图１．４所示：（１）荧光基团：即发射荧光的源头也称??突光供体、荧光团，决定探针识别的灵敏度；（２）识别基团：即识别目标分析物的??基团，也称荧光受体，决定探针的选择性和特异性，识别基团与目标敏感物发生相??互作用，致使受体分子化学性质发生变化，从而引起荧光团的荧光信号的増强，猝??灭或位移的改变；（３）连接基团：连接荧光基团和识别基团的部分，起到分子识别??枢纽的作用［７３】。??麵ＰＥ？??图１．４荧光探针的结构。??荧光探针主要发光机理有三种：第一种分子内电荷转移（ＩＴＣ），通过改变荧光??团上的电子云密度导致探针最大发射波长发生改变；第二种荧光共振能量转移??（ＦＲＥＴ），这类型的探针一般是两个荧光团，产生共振能量迁移而自猝灭［＇第三??种光诱导电子转移过程（ＰＥＴ），是指在光照射激发下，识别基团和荧光团之间发??７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]比率荧光探针的构建及应用[J]. 张励国,王志利,姚凯,安彦召,徐守芳. 广东化工. 2016(18)
[2]标准曲线法进行定量检测的不确定度来源分析[J]. 伊魁宇,王猛. 广州化工. 2012(09)
[3]电感耦合等离子体质谱法测定钕铁硼中铝、钴、铜、镓、锆、铽、钛、铌[J]. 张立锋,张翼明,周凯红. 冶金分析. 2011(03)
[4]加标回收实验方案探讨[J]. 伍云卿,涂杰峰,范超,陈卫伟. 福建分析测试. 2010(03)
[5]乙腈沉淀法去除人血清中高丰度蛋白的探索性研究[J]. 覃健,胡天桥,张志勇,何敏,韦霄,蒋智华. 中国卫生检验杂志. 2010(05)
[6]两种去除血清高丰度蛋白方法的比较[J]. 覃健,张志勇,何敏,胡天桥. 预防医学情报杂志. 2010(04)
[7]加标回收实验的实施及回收率计算的研究[J]. 任成忠,毛丽芬. 工业安全与环保. 2006(02)
[8]基于激发态分子内质子转移的新一代荧光探针[J]. 吕凤婷,高莉宁,房喻. 化学进展. 2005(05)
[9]测量误差及其处理方法[J]. 刘素花. 上海计量测试. 2004(02)
博士论文
[1]比率荧光传感器的设计及其对环境污染物小分子的可视化检测[D]. 闫叶寒.中国科学技术大学 2017
硕士论文
[1]比率型甲基乙二醛荧光探针的设计合成与细胞成像[D]. 汪会玲.华中师范大学 2018
[2]低成本、自动化血检系统的搭建与研究[D]. 谢登玲.中国科学技术大学 2017
[3]甲基乙二醛在围产期奶牛酮病群体监测中的作用[D]. 李超.西北农林科技大学 2017
[4]薄膜太阳能电池CuInxGa1-xSe2中铜、镓、铟、硒的电感耦合等离子体光谱测量[D]. 张菲菲.吉林大学 2017
[5]吖啶橙荧光染色法检测肾癌循环肿瘤细胞及其临床意义[D]. 刘敏.天津医科大学 2015
本文编号：2972561
【文章来源】：华中师范大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MG在生理系统中的形成门
颂士学位论文??ＭＡＳＴＥＲ＇Ｓ?ＴＨＥＳＩＳ??衰竭和帕金森病的体内模型中增加［９，１３，１４二２＿２４］。较高浓度的？＾〇与糖尿病和??的线粒体功能障碍有关［１６，２５］，也会导致心血管疾病［２６］，氧化应激［５］，血脂异??细胞脱落和失巢凋亡［１３］，细胞凋亡［２８】和ＤＮＡ链断裂频率增加［１８］。９９％的ＭＧ??１代谢消耗，从而保护蛋白质组和基因组。ＧＬＯｌ沉默会导致ＭＧ，?ＭＧ－Ｈ１??ｄＧ浓度的增加，导致早产和衰老［２９］，动脉粥样硬化邮，３Ｕ，高血压［２９］，慢性??病，胰岛素抵抗［３Ｇ］和炎症［３２］。２０１２年国际牙科联合会表示：“糖尿病和心血??现在是全球疾病负担和死亡的主要原因［３３］”。因此ＭＧ的研宄对于人类健康，??疾病治疗具有重要意义。对细胞，组织和体液中ＭＧ浓度测量的需求也日益??
荧光检测法以简单，快速的响应，和对活细胞中动态生物过程的实时和原位监??测的能力，被广泛用于复杂的生物样品分析中［６＆７２］。荧光检测法的核心即荧光探针。??荧光探针一般由三部分构成如图１．４所示：（１）荧光基团：即发射荧光的源头也称??突光供体、荧光团，决定探针识别的灵敏度；（２）识别基团：即识别目标分析物的??基团，也称荧光受体，决定探针的选择性和特异性，识别基团与目标敏感物发生相??互作用，致使受体分子化学性质发生变化，从而引起荧光团的荧光信号的増强，猝??灭或位移的改变；（３）连接基团：连接荧光基团和识别基团的部分，起到分子识别??枢纽的作用［７３】。??麵ＰＥ？??图１．４荧光探针的结构。??荧光探针主要发光机理有三种：第一种分子内电荷转移（ＩＴＣ），通过改变荧光??团上的电子云密度导致探针最大发射波长发生改变；第二种荧光共振能量转移??（ＦＲＥＴ），这类型的探针一般是两个荧光团，产生共振能量迁移而自猝灭［＇第三??种光诱导电子转移过程（ＰＥＴ），是指在光照射激发下，识别基团和荧光团之间发??７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]比率荧光探针的构建及应用[J]. 张励国,王志利,姚凯,安彦召,徐守芳. 广东化工. 2016(18)
[2]标准曲线法进行定量检测的不确定度来源分析[J]. 伊魁宇,王猛. 广州化工. 2012(09)
[3]电感耦合等离子体质谱法测定钕铁硼中铝、钴、铜、镓、锆、铽、钛、铌[J]. 张立锋,张翼明,周凯红. 冶金分析. 2011(03)
[4]加标回收实验方案探讨[J]. 伍云卿,涂杰峰,范超,陈卫伟. 福建分析测试. 2010(03)
[5]乙腈沉淀法去除人血清中高丰度蛋白的探索性研究[J]. 覃健,胡天桥,张志勇,何敏,韦霄,蒋智华. 中国卫生检验杂志. 2010(05)
[6]两种去除血清高丰度蛋白方法的比较[J]. 覃健,张志勇,何敏,胡天桥. 预防医学情报杂志. 2010(04)
[7]加标回收实验的实施及回收率计算的研究[J]. 任成忠,毛丽芬. 工业安全与环保. 2006(02)
[8]基于激发态分子内质子转移的新一代荧光探针[J]. 吕凤婷,高莉宁,房喻. 化学进展. 2005(05)
[9]测量误差及其处理方法[J]. 刘素花. 上海计量测试. 2004(02)
博士论文
[1]比率荧光传感器的设计及其对环境污染物小分子的可视化检测[D]. 闫叶寒.中国科学技术大学 2017
硕士论文
[1]比率型甲基乙二醛荧光探针的设计合成与细胞成像[D]. 汪会玲.华中师范大学 2018
[2]低成本、自动化血检系统的搭建与研究[D]. 谢登玲.中国科学技术大学 2017
[3]甲基乙二醛在围产期奶牛酮病群体监测中的作用[D]. 李超.西北农林科技大学 2017
[4]薄膜太阳能电池CuInxGa1-xSe2中铜、镓、铟、硒的电感耦合等离子体光谱测量[D]. 张菲菲.吉林大学 2017
[5]吖啶橙荧光染色法检测肾癌循环肿瘤细胞及其临床意义[D]. 刘敏.天津医科大学 2015
本文编号：2972561
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