戊糖片球菌产细菌素的提
发布时间：2021-01-14 05:44
乳酸菌细菌素是乳酸菌生长代谢产生有抑菌活性的蛋白或多肽类物质,具有抑菌谱广、在人体内无残留、能作为天然防腐剂等优点而倍受国内外研究者的广泛关注。其中乳酸链球菌素（Nisin）已广泛应用于食品工业中,但随着研究的深入,发现Nisin存在抑菌能力不稳定、抑菌谱窄、抑菌时效短等诸多不足,限制了其在食品防腐领域的应用。为了防止食品腐败变质、提高食品安全质量,亟需开发抑菌范围广、抑菌效果稳定的新型生物防腐剂。本论文以金华火腿中分离筛选出的乳酸菌为研究对象,首先以排除有机酸、过氧化氢,蛋白酶验证为指标,筛选产细菌素乳酸菌;其次对细菌素进行分离、纯化,然后对细菌素纯品进行鉴定;最后研究细菌素纯品的理化特性,为新型乳酸菌细菌素的开发应用奠定基础。本试验具体研究内容与结果如下:1.产广谱细菌素乳酸菌的筛选及鉴定。从金华火腿中筛选并保藏的162株乳酸菌中,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,通过双层琼脂平板法和浊度法初筛出159株对两种指示菌均有抑菌作用的乳酸菌;经有机酸、过氧化氢排除试验复筛出4株具有抑菌作用的乳酸菌;最后经蛋白酶消化验证试验获得1株产细菌素的乳酸菌,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]产细菌素乳酸菌菌株的来源及所产细菌素的分类研究进展[J]. 刘静,杨富民,白斌芳,郭锌. 中国酿造. 2018(06)
[2]细菌素的研究与应用进展[J]. 张隽娴,李静,樊铭勇. 绿色科技. 2017(18)
[3]凡纳对虾原肌球蛋白硫酸铵沉淀分离纯化方法的优化[J]. 傅玲琳,富舒洁,王彦波,王翀,张岩,吴琦,马爱进. 食品科学. 2017(18)
[4]金华火腿粗肽液的乳化特性[J]. 忽晓平,赵改名,柳艳霞,田玮,周光宏. 食品与发酵工业. 2017(06)
[5]植物乳杆菌JLA-9产细菌素的分离纯化[J]. 赵圣明,赵岩岩,马汉军. 食品与发酵工业. 2017(06)
[6]采用16S rDNA高通量测序技术分析油藏微生物多样性[J]. 许颖,马德胜,宋文枫,魏小芳. 应用与环境生物学报. 2016(03)
[7]如何看EI-MS质谱图[J]. 王敬尊. 大学化学. 2016(04)
[8]蒙古干酪中产细菌素戊糖片球菌的筛选及其细菌素理化特性研究[J]. 王艳婷,汪立平,唐潮,孙晓红. 食品与发酵工业. 2015(10)
[9]戊糖乳杆菌及其在食品工业中的应用[J]. 孙茂成,张岚,刘敏,王舒然. 中国酿造. 2015(06)
[10]乳酸菌抗菌物质分类及作用机理[J]. 赵娜,刘鑫,石和平,乌兰,贺荣,任丽民. 农产品加工. 2015(10)
博士论文
[1]合成Ⅱa类广谱细菌素乳酸菌的筛选及合成和分离的研究[D]. 刘文丽.哈尔滨工业大学 2014
[2]产类细菌素菌株的筛选鉴定及类细菌素的研究[D]. 贾丽艳.山西农业大学 2014
[3]基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱的新基质及其应用[D]. 徐松云.中国科学院研究生院（大连化学物理研究所） 2006
硕士论文
[1]Paenibacillus bovis sp.nov. BD3526抗菌物质的分离纯化、结构表征及其性质的研究[D]. 花榜清.江南大学 2017
[2]植物乳杆菌细菌素的基因组学及其结构与抑菌作用研究[D]. 刘文婷.哈尔滨工业大学 2017
[3]产细菌素乳酸菌的筛选、培养条件优化及生物学特性的研究[D]. 李伟栋.黑龙江八一农垦大学 2016
[4]广谱抗菌乳酸菌的分离鉴定及细菌素的提取、纯化及结构鉴定[D]. 高鹏.南京农业大学 2016
[5]戊糖片球菌C-2-1产细菌素的研究[D]. 王艳婷.上海海洋大学 2016
[6]乳铁蛋白水解物中抗菌肽的分离与纯化[D]. 李畅.东北农业大学 2015
[7]Nisin抑菌稳定性研究与应用[D]. 罗晶.天津科技大学 2015
[8]海洋天然产物的电喷雾电离质谱（ESI-MS）及其乙酰胆碱酯酶抑制活性构效关系分析[D]. 侯改芳.中国海洋大学 2013
[9]清酒乳杆菌素LSJ618的分离及制备[D]. 竺德强.安徽农业大学 2012
[10]金华火腿中小肽的分离纯化及表征[D]. 王娟.河南农业大学 2012
本文编号：2976331
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１目的菌株的形态特征??－
中进行同源性搜索，目的菌株与戊糖片球菌／＾／％此〇＾７＾；７／〇似（＾似１＾１５８８３４．１的相似度最??高为９８％，其结果与生理生化鉴定一致，确认目的菌株为戊糖片球菌??），系统发育树如图２－３所７Ｋ。??Ｍａｒｋｅｒ?目的菌株??２０００ｂｐ????ｌＯＯＯｂｐ????７５０ｂｐ????５００ｂｐ????２５０ｂｐ??ｌＯＯｂｐ????图２－２目的菌株产物扩增图??Ｆｉｇ．?２－２?Ｐｒｏｄｕｃｔ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ??Ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ??９８?，??Ｐｅａｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｐｅｎｒｏｓａｃｅｕｓ?Ｍ５８８３４．１??７３??ｒ＇－Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｂ．＼Ｆ７１５??＇￣Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ａｒｇｅｎｔｉｎｉｃｕｓ?ＣＲＬ７７６????Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｓｒｉｌｅｓｉｉ?ＤＳＭ?１８００１??—Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｍ?ｃｅｌｌｉｃｏｌａ?Ｚ－８???Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ?ｐａｒａｐｌｍｉｆｒｉｎｎ?ＬＭＧ１６６７３??Ｉ?１??０．０５０??图２－３目的菌株基于１６ＳｒＤＮＡ序列分析结果的系统发育树??Ｆｉｇ．２－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ??３本章小结??本章筛选产细菌素的乳酸菌并对其进行菌种鉴定。从金华火腿中保藏的１６２株乳酸菌
?５?１０?１５?２０?２５?３０?３５??則？间（ｈ）??图３－１戊糖片球菌Ｚ－１生长曲线、ｐＨ及抑菌活性的变化??Ｆｉｇ．?３－１?Ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ，?ｐＨ?ａｎｄ?ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｚ－１??２．１＿２抑菌效价曲线??由二倍系列稀释法和双层平板打孔法测定抑菌圈直径，确定戊糖片球菌Ｚ－１培养２０?ｈ??离心上清液的效价。选取效价的对数值为横坐标，抑菌圈直径为纵坐标，绘制戊糖片球菌??Ｚ－１的效价标准曲线。如图３－２所示，在效价对数值在０－３．５的范围内相关系数Ｒ２值为??０．９９３４，抑菌圈直径与效价对数值呈良好的线性关系，可作为后续蛋白样品效价测定的标??准曲线。??３５?－？??ｙ?＝?６．Ｓ２４２ｘ＾－９．８７８２??Ｒｒ?＝?０．９９３４?＃??ＢＯ?－?？？？＿．??奚?２５．??＇ｉ??沄２０．??－?．．．．??１５?－??１０?＾?１?１?１?１?１??????０?０．５?１?１．５?２?２．５?３?３．５??ｌｏｇＡＵ??图３－２戊糖片球菌Ｚ－１的效价标准曲线??Ｆｉｇ．?３－２?Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｚ－１?ｔｉｔｅｒ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]产细菌素乳酸菌菌株的来源及所产细菌素的分类研究进展[J]. 刘静,杨富民,白斌芳,郭锌. 中国酿造. 2018(06)
[2]细菌素的研究与应用进展[J]. 张隽娴,李静,樊铭勇. 绿色科技. 2017(18)
[3]凡纳对虾原肌球蛋白硫酸铵沉淀分离纯化方法的优化[J]. 傅玲琳,富舒洁,王彦波,王翀,张岩,吴琦,马爱进. 食品科学. 2017(18)
[4]金华火腿粗肽液的乳化特性[J]. 忽晓平,赵改名,柳艳霞,田玮,周光宏. 食品与发酵工业. 2017(06)
[5]植物乳杆菌JLA-9产细菌素的分离纯化[J]. 赵圣明,赵岩岩,马汉军. 食品与发酵工业. 2017(06)
[6]采用16S rDNA高通量测序技术分析油藏微生物多样性[J]. 许颖,马德胜,宋文枫,魏小芳. 应用与环境生物学报. 2016(03)
[7]如何看EI-MS质谱图[J]. 王敬尊. 大学化学. 2016(04)
[8]蒙古干酪中产细菌素戊糖片球菌的筛选及其细菌素理化特性研究[J]. 王艳婷,汪立平,唐潮,孙晓红. 食品与发酵工业. 2015(10)
[9]戊糖乳杆菌及其在食品工业中的应用[J]. 孙茂成,张岚,刘敏,王舒然. 中国酿造. 2015(06)
[10]乳酸菌抗菌物质分类及作用机理[J]. 赵娜,刘鑫,石和平,乌兰,贺荣,任丽民. 农产品加工. 2015(10)
博士论文
[1]合成Ⅱa类广谱细菌素乳酸菌的筛选及合成和分离的研究[D]. 刘文丽.哈尔滨工业大学 2014
[2]产类细菌素菌株的筛选鉴定及类细菌素的研究[D]. 贾丽艳.山西农业大学 2014
[3]基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱的新基质及其应用[D]. 徐松云.中国科学院研究生院（大连化学物理研究所） 2006
硕士论文
[1]Paenibacillus bovis sp.nov. BD3526抗菌物质的分离纯化、结构表征及其性质的研究[D]. 花榜清.江南大学 2017
[2]植物乳杆菌细菌素的基因组学及其结构与抑菌作用研究[D]. 刘文婷.哈尔滨工业大学 2017
[3]产细菌素乳酸菌的筛选、培养条件优化及生物学特性的研究[D]. 李伟栋.黑龙江八一农垦大学 2016
[4]广谱抗菌乳酸菌的分离鉴定及细菌素的提取、纯化及结构鉴定[D]. 高鹏.南京农业大学 2016
[5]戊糖片球菌C-2-1产细菌素的研究[D]. 王艳婷.上海海洋大学 2016
[6]乳铁蛋白水解物中抗菌肽的分离与纯化[D]. 李畅.东北农业大学 2015
[7]Nisin抑菌稳定性研究与应用[D]. 罗晶.天津科技大学 2015
[8]海洋天然产物的电喷雾电离质谱（ESI-MS）及其乙酰胆碱酯酶抑制活性构效关系分析[D]. 侯改芳.中国海洋大学 2013
[9]清酒乳杆菌素LSJ618的分离及制备[D]. 竺德强.安徽农业大学 2012
[10]金华火腿中小肽的分离纯化及表征[D]. 王娟.河南农业大学 2012
本文编号：2976331
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