GDSL家族酯酶的分子改造研究
发布时间：2021-01-20 05:14
头孢类抗生素是一类广谱抗生素,其来源主要依赖于合成或半合成,一般以7-氨基头孢烷酸（7-Aminocephalosporanic acid,7-ACA）为母体。随着细菌耐药性等问题的出现,新型抗生素的开发成为必然趋势。7-ACA3碳位为乙酰基团,脱乙酰化的7-ACA（Deacetyl-7-aminocephalosporanic acid,D-7-ACA）在3碳位形成羟基,反应活性高、易受到亲核试剂的进攻,从而转化各种官能团,合成新型头孢类产品。目前,D-7-ACA的获得主要通过化学脱乙酰化处理而成,反应条件苛刻、副产物多、对环境污染大。因此,利用安全性高、环境友好、选择性强及设备投入低等优势的新型酶水解法是未来获得D-7-ACA的必然趋势。GDSL酯酶家族由Upton和Buckley在1995年命名:因其N端含有GDSL的保守序列而得名。GDSL家族酯酶广泛分布于自然界的生物体内,在植物中与植物生长发育密切相关。然而,虽然GDSL家族的酯酶在细菌中分布非常广泛,但对微生物中GDSL家族酯酶功能的研究甚少。课题组在前期研究中鉴定了两种新型微生物GDSL酯酶:Est8和EstD1,二者均...
【文章来源】：云南师范大学云南省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
GDSL水解酶三个亚家族基因结构示意图（引自文献5）
第 1 章 绪论异导致活性位点的折叠方式和相对位置发生变化，以致于该家族的底物结合能力和生化功能表现出多样性。1.1.3 GDSL家族水解酶的催化机制GDSL 家族水解酶可将多种脂类水解为醇类和脂肪酸，GDSL 家族水解酶具有广泛的底物特异性，能够通过构象的改变与不同的底物结合，催化底物的水解，其催化机制如图 1.2 所示。
图 1.3 7-ACA 的脱乙酰化Figure 1.3 Deacetylation of 7-ACA酶水解法又可分为一步酶法和两步酶法等，用D-氨基酸氧化酶和戊二头孢烷酸乙酰化酶来生产7-ACA的两步酶法，由于副产物多，而且酶的产工艺相对复杂，近年来，一步酶法开始渐渐取代两步酶法，其更能工艺、降低成本[33-34]。酶水解法的大致过程都是以头孢菌素C为原料，
【参考文献】：
期刊论文
[1]定向进化技术的最新进展[J]. 曲戈,赵晶,郑平,孙际宾,孙周通. 生物工程学报. 2018(01)
[2]植物GDSL脂酶家族基因的研究进展[J]. 李志兰,华水金,蒋立希. 农业生物技术学报. 2014(07)
[3]7-ACA中微量组分对头孢噻肟钠相关物质的影响[J]. 王威. 黑龙江科技信息. 2014(04)
[4]基于理性设计的β-甘露聚糖酶底物亲和力的定向改造[J]. 魏喜换,王春娟,赵梅,李剑芳,邬敏辰. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(01)
[5]头孢类抗生素的新型中间体D-7-ACA[J]. 陈海龙,于沛. 中国当代医药. 2009(07)
[6]酶分子定向进化的最新研究进展及应用[J]. 王黎,袁红霞,曾家豫,廖世奇. 甘肃医药. 2009(01)
硕士论文
[1]碱性嗜热SGNH家族酯酶的异源表达、酶学性质及功能研究[D]. 于婷婷.云南师范大学 2015
[2]链霉菌Streptomyces sp. LZ35菌株的萜类合酶基因的克隆、异源表达和蛋白质结晶[D]. 张秀蕾.山东大学 2014
[3]参与脂肪酸和糖类合成的两个酶的克隆、表达纯化及晶体学研究[D]. 苏靖.内蒙古农业大学 2010
[4]酶法制备新型医药中间体D-7-ACA工艺研究[D]. 柳杏辉.西北大学 2009
本文编号：2988447
【文章来源】：云南师范大学云南省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
GDSL水解酶三个亚家族基因结构示意图（引自文献5）
第 1 章 绪论异导致活性位点的折叠方式和相对位置发生变化，以致于该家族的底物结合能力和生化功能表现出多样性。1.1.3 GDSL家族水解酶的催化机制GDSL 家族水解酶可将多种脂类水解为醇类和脂肪酸，GDSL 家族水解酶具有广泛的底物特异性，能够通过构象的改变与不同的底物结合，催化底物的水解，其催化机制如图 1.2 所示。
图 1.3 7-ACA 的脱乙酰化Figure 1.3 Deacetylation of 7-ACA酶水解法又可分为一步酶法和两步酶法等，用D-氨基酸氧化酶和戊二头孢烷酸乙酰化酶来生产7-ACA的两步酶法，由于副产物多，而且酶的产工艺相对复杂，近年来，一步酶法开始渐渐取代两步酶法，其更能工艺、降低成本[33-34]。酶水解法的大致过程都是以头孢菌素C为原料，
【参考文献】：
期刊论文
[1]定向进化技术的最新进展[J]. 曲戈,赵晶,郑平,孙际宾,孙周通. 生物工程学报. 2018(01)
[2]植物GDSL脂酶家族基因的研究进展[J]. 李志兰,华水金,蒋立希. 农业生物技术学报. 2014(07)
[3]7-ACA中微量组分对头孢噻肟钠相关物质的影响[J]. 王威. 黑龙江科技信息. 2014(04)
[4]基于理性设计的β-甘露聚糖酶底物亲和力的定向改造[J]. 魏喜换,王春娟,赵梅,李剑芳,邬敏辰. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(01)
[5]头孢类抗生素的新型中间体D-7-ACA[J]. 陈海龙,于沛. 中国当代医药. 2009(07)
[6]酶分子定向进化的最新研究进展及应用[J]. 王黎,袁红霞,曾家豫,廖世奇. 甘肃医药. 2009(01)
硕士论文
[1]碱性嗜热SGNH家族酯酶的异源表达、酶学性质及功能研究[D]. 于婷婷.云南师范大学 2015
[2]链霉菌Streptomyces sp. LZ35菌株的萜类合酶基因的克隆、异源表达和蛋白质结晶[D]. 张秀蕾.山东大学 2014
[3]参与脂肪酸和糖类合成的两个酶的克隆、表达纯化及晶体学研究[D]. 苏靖.内蒙古农业大学 2010
[4]酶法制备新型医药中间体D-7-ACA工艺研究[D]. 柳杏辉.西北大学 2009
本文编号：2988447
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