稀有细胞群单细胞分选方案的优化
发布时间:2021-03-23 14:14
目的:探讨稀有细胞群单细胞分选方案的优化。方法:分析仪器设备的设置、分选前细胞的准备和分选方案的选择。结果:通过提供的单细胞分选的方案,使单克隆形成率达86.5%。结论:建立了单细胞分选的优化方案,并重点分析了提高单克隆形成率的影响因素和解决方法。
【文章来源】:生物化工. 2020,6(04)
【文章页数】:3 页
【部分图文】:
图1 分选方案
通过流式分析的方法找到细胞群如图2a所示,分析出阳性细胞,并分选至96孔板的每个孔中。7 d以后显微镜下观察,找到如图2b中的细胞克隆计数并统计。3块孔板形成的单克隆数分别为88、82和79个,分选并能够形成单细胞克隆的平均得率为86.5%。较多文献中报道了[1-2]验证单细胞分选得率的方案,但均局限于分选前期,即仅判定是否分至细胞培养板的孔中,而此次实验延伸至分选末期,不仅将单个细胞分选至单个孔中,还可以形成单克隆,采用的单细胞分选优化方案利用单克隆的形成率更加准确地说明了单细胞分选的效率。单细胞分选实验中影响后期单细胞成活率或单克隆形成率的主要因素可归纳为以下4点。
本文编号:3095940
【文章来源】:生物化工. 2020,6(04)
【文章页数】:3 页
【部分图文】:
图1 分选方案
通过流式分析的方法找到细胞群如图2a所示,分析出阳性细胞,并分选至96孔板的每个孔中。7 d以后显微镜下观察,找到如图2b中的细胞克隆计数并统计。3块孔板形成的单克隆数分别为88、82和79个,分选并能够形成单细胞克隆的平均得率为86.5%。较多文献中报道了[1-2]验证单细胞分选得率的方案,但均局限于分选前期,即仅判定是否分至细胞培养板的孔中,而此次实验延伸至分选末期,不仅将单个细胞分选至单个孔中,还可以形成单克隆,采用的单细胞分选优化方案利用单克隆的形成率更加准确地说明了单细胞分选的效率。单细胞分选实验中影响后期单细胞成活率或单克隆形成率的主要因素可归纳为以下4点。
本文编号:3095940
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