环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响

发布时间：2021-04-08 01:11

　　目的研究环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响。方法建立铁过载小鼠模型,随机将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、低剂量组（0.25 g/kg）、中剂量组（0.5 g/kg）、高剂量组（1 g/kg）。模型组小鼠腹腔注射不同浓度及剂量的右旋糖酐铁,对照组小鼠注射磷酸缓冲盐溶液（PBS液）0.2 m L/次,观察体质量及肝脾、骨髓等脏器改变,检测血清铁蛋白水平;进一步选择中剂量组模型小鼠按不同时间点分组（D1,D2,D3,D4,D5,D6,D7,D14）,连续2 d腹腔注射环磷酰胺（Cy）50 mg/kg,对照组小鼠注射PBS液0.2 mL/次,建立铁过载小鼠Cy预处理模型,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞（BMMNCs）、造血干细胞（HSCs）细胞数目及其在细胞周期中的分布、骨髓微环境等变化情况。结果与对照组小鼠相比,铁过载组小鼠体质量明显降低、血清铁蛋白明显升高、肝脾明显增大、脏器铁沉积明显,差异具有统计学意义（P<0.05）;铁过载组小鼠外周血未见明显改变;Cy小鼠外周血白细胞（WBC）数目、淋巴细胞百分率（YM%）第1～4天明显降低,第4天降至最低,差异具有统计学意义... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2020,40(01)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 动物
    1.2 试剂和仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 建立铁过载三级危险模型
        1.2在前期成功实验基础上，取中度危险铁过载模型鼠建立Cy预处理模型
            1.2.1 外周血细胞计数
            1.2.2 BMMNCs分离及计数
            1.2.3 磁珠富集造血干 （lin-c-kit+scal+） /祖细胞 （lin-c-kit+Sca-l-） 分选
            1.2.4造血干细胞（Lin-c-kit+Sca-1+）流式分选
            1.2.5 流式细胞周期检测
    1.3 统计方法
2 结果
    2.1 地中海贫血三级危险铁过载模型建立
        2.1.1 小鼠的一般表现
        2.1.2 小鼠体质量变化
        2.1.3 肝脾系数及肝脏质量增加指数变化
        2.1.4 血清铁蛋白的检测
        2.1.5肝脏HE、普鲁士染色
        2.1.6 脾脏HE、普鲁士染色
        2.1.7 骨髓活检HE染色及普鲁士蓝染色
    2.2 Cy预处理铁过载模型小鼠
        2.2.1 Cy处理后小鼠的一般情况
        2.2.2 Cy对外周血象的影响
    2.3 Cy对铁过载小鼠骨髓细胞的影响
        2.3.1 骨髓单个核细胞数目变化
        2.3.2 Cy对骨髓细胞数目的影响
        2.3.3 Cy对骨髓HSCs周期的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]小鼠铁过载模型的建立及其对骨髓造血功能的影响[J]. 柴笑,赵明峰,李德冠,孟娟霞,卢文艺,穆娟,孟爱民.  中国医学科学院学报. 2013(05)



本文编号：3124558