一株菲降解菌CFP312筛选及其增溶生物降解研究

发布时间：2021-04-11 11:36

　　多环芳烃（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons,PAHs）是环境中一类最重要的疏水性有机污染物之一,具有“三致”性、持久存在性和超强的生物聚积毒性。人类与生态环境已深陷PAHs污染的包围圈,日常生活中到处充满着PAHs的排放源,如“三废”的排放、生活垃圾的燃烧、交通运输过程产生的废气以及化石燃料的燃烧等。PAHs已成为环境治理方面重点关注的有机污染物之一。目前,PAHs比较有前景的治理方法是生物修复法,而降解菌的筛选是生物修复法中的第一步。筛选高效率的降解菌,能够极大地提升污染物的降解效率。由于PAHs具有较强的疏水性,而增加了生物利用的难度,因此需要辅助外物提高其生物利用率。当前,研究较热门的增溶物质-表面活性剂可有效地改善PAHs的生物利用性。但表面活性剂增溶生物降解的机理一直是各研究人员探索的重点之一,本研究也通过一系列实验试图说明该问题。本文提出了浊点系统增溶生物降解的新组合方案,通过重复利用细胞和浊点系统,进而提高菌株的降解效率,期望在今后实际应用中节省时间和降低成本。本研究的实验结果试图为PAHs污染的生物修复研究提供基础数据与理论依据。论文的主... 

【文章来源】：江西理工大学江西省

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

环糊精分子的结构示意图

第一章绪论13图1.2浊点系统疏水性有机污染物生物降解原理示意图1.3主要研究内容本研究为了解决上述PAHs生物降解过程中所遇到问题，进行了一系列研究，主要有以下几点：1、进行了PAHs降解菌株的筛癣生理生化特性分析、鉴定与保藏。2、采用紫外分光光度法和高效液相色谱法（HPLC）等分析方法研究pH值、温度、转速和时间等环境因素对降解的影响以及菲浓度对菌株CFP312降解PAHs的影响和菌株CFP312底物谱利用情况。3、本文进行了降解系统的筛选，来探究菌株CFP312增溶生物降解的最佳增溶物质；为了确定降解系统的最适浓度，进行了浓度对降解系统的影响实验；进行了降解系统对细胞生长的影响实验以及为了了解降解系统促进生长的原因，进行了细胞在非水相粘附实验、细胞在水相-非水相分配实验和细胞在晶体菲上的洗脱实验。4、浊点系统与细胞重复利用生物降解菲的组合方案探究主要含以下内容：细胞生长时间对生物降解影响实验、细胞与浊点系统再利用实验、细胞与凝聚层相再利用实验、细胞单独再利用实验以及细胞重复利用方案组合实验。

第二章实验材料与仪器及分析方法21表2.4菲浓度梯度配置方法PHE浓度（mg/L）乙腈（ul）菲标准液200mg/L（ul）总体积（ul）0100001000597525100010950501000161150100125020900100100025105015012503210502001250408002001000标准浓度梯度通过上述HPLC方法检测得到相应的峰面积，从而得到标准曲线，公式为y=ax+b；通过标准曲线的线性回归方程即可计算出相应峰面积所对应的菲浓度，相应公式如下：菲残余量（mg/L）=（峰面积×5-b）/a菲降解率（%）=（1-菲残余量/400）×100%图2.1HPLC峰面积与菲浓度标准曲线2.3.2菌体生长量分析方法将培养后的30ml培养液倒入50ml离心管于8000rpm，20℃条件下离心10min后倒去上清液用5mlMSM培养基离心重悬清洗2次，最后用MSM培养基做空白对照，菌悬液10倍稀释液在波长为600nm的紫外分光光度计下测定其OD600值，再根据稀释、浓缩倍数计算出原培养液的OD600（菌体生长量）。


本文编号：3131183