雌性短尾猴粪便性激素测定方法评估及其在生理周期研究中的应用
发布时间：2021-04-11 15:02
动物的发情与交配是其扩大种群数量提高自身适合度的重要途径。在灵长类中,研究雌性的性激素分泌水平和生理周期信息不仅能揭示其繁殖规律,也是进一步了解雌性性行为、性策略、雄性交配投资及物种进化的重要途径。短尾猴（Macaca thibetana）是我国Ⅱ级保护动物,被自然保护联盟列为易危物种,由于其繁殖期无明显的性皮肿胀现象,且体型较大受孕后腹部变化不明显,加之栖息环境复杂,不同物种性激素测定方法具有较强的特异性等原因,导致研究人员长期以来对短尾猴雌性生理相关研究相对滞后。关于雌性短尾猴不同生理状态下性激素水平的分泌规律及月经周期、孕期等基础生理信息的研究也较为缺乏。本研究以黄山野生短尾猴和铜陵动物园笼养短尾猴中成年雌性个体为研究对象,在2018年10月10日至2019年10月3日期间采用非损伤性取样法连续跟踪采集目标雌性个体新鲜粪便633份,使用行为取样法记录交配行为,全事件记录法同时记录雌性的发情状态、产仔日期等信息。利用野生和笼养两种取食状态下的短尾猴粪便样本,从不同粪便处理方式（湿便、冷冻干燥粉碎、冷冻干燥研筛）、不同激素提取（乙醇加热法、甲醇乙醚法、乙醇丙酮法、甲醇乙醇法）与检测方...
【文章来源】：安徽大学安徽省 211工程院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
野外研究地点Figure2-1Fieldstudysite
短尾猴粪便性激素测定方法评估及其在生理周期研究中的应用16图2-4粪便处理与激素提取Figure2-4Treatmentandextractionofhormonesinfeces2.3粪便性激素提取方法综合国内外研究，参照其他非人灵长类物种中粪便激素提取与改良方法[16,35,38,113]，我们选取了4种常用抽提溶剂和抽提方法（乙醇加热法，甲醇乙醚法，乙醇丙酮法与甲醇乙醇法），分别对短尾猴粪便样品中雌二醇（E2）与孕酮（P4）进行抽提，详细操作步见表2-2。2.4粪便性激素检测方法采用放射免疫方法（RIA）与酶联免疫吸附分析法（ELISA）进行雌二醇（E2）与孕酮（P4）含量的测定，为减少实验误差，样品的测定与标准曲线的制备同时进行。雌二醇与孕酮测定的基本操作依照北京福瑞生物技术公司所生产的放免试剂盒和浙江惠嘉生物科技有限公司所生产的酶免试剂盒的研究说明和操作规程进行。每个样品重复测定2次，实验误差导致两次数值相差较大时，将对应样品进行第3次测定，保留相近的两组作为最终数据进行分析。2.5实验试剂盒及操作步骤实验试剂盒：碘[125I]猴类雌二醇放射免疫分析药盒（北京福瑞生物技术公司）碘[125I]猴类孕酮放射免疫分析药盒（北京福瑞生物技术公司）猴雌二醇（E2）酶联免疫试剂盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）猴孕酮（P4）酶联免疫试剂盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）
短尾猴粪便性激素测定方法评估及其在生理周期研究中的应用20图2-5不同粪便处理方式激素含量比较（图a：雌二醇，图b：孕酮；n=20，均值：Mean±SE*：P<0.05，**:P<0.01）Figure2-5Comparisonofhormonecontentindifferentfecaltreatmentmethods.(Figa:Estradiol,Figb:Progesterone;n=20,Mean±SE;*:P<0.05,**:P<0.01)4.2不同取食条件对处理方法的影响不同取食环境下粪便中高纤维杂质含量明显不同，可能会使粪便处理结果产生差异。我们另外对笼养与野生个体粪便数据分开进行分析。结果表明，笼养状态下，冻干研筛法保存雌二醇与孕酮激素含量仍最高（图2-6a，2-6b），但与冻干粉碎法无显著差异（P>0.05），两种粪便处理保存方式均可选择；但野生状态******
【参考文献】：
期刊论文
[1]雄性短尾猴维持临时配偶关系的行为适应性[J]. 方兴丽,张启信,夏东坡,李进华. 兽类学报. 2020(01)
[2]黄山雄性短尾猴的拥抱行为[J]. 刘一鸣,王希,张启信,方兴丽,李进华. 兽类学报. 2019(06)
[3]Interchange between grooming and infant handling in female Tibetan macaques（Macaca thibetana）[J]. Qi Jiang,Dong-Po Xia,Xi Wang,Dao Zhang,Bing-Hua Sun,Jin-Hua Li. Zoological Research. 2019(02)
[4]野生短尾猴集群运动的跟随者特征研究[J]. 李博文,王希,吴伟,李进华. 生物学杂志. 2019(01)
[5]圈养条件下黑猩猩月经、排卵和妊娠周期[J]. 朱迎娣. 动物学杂志. 2018(05)
[6]雄性短尾猴个体特征与临时配偶关系研究[J]. 吴义兵,张启信,王希,李博文,李进华. 兽类学报. 2018(05)
[7]雄性短尾猴的等级顺位、睾酮水平与肠道寄生虫感染强度的关系[J]. 吴伟,孙丙华,王希,李文博,李博文,李进华. 兽类学报. 2018(05)
[8]滇金丝猴粪便类固醇激素抽提及检测方法评估[J]. 黎嘉欣,杨秋立,普天春,卢雁平,王伟,刘学锋,刘定震. 野生动物学报. 2018(03)
[9]虎粪便类固醇激素检测及影响因素的评估[J]. 傅文源. 野生动物学报. 2018(02)
[10]近20年白马雪山国家级自然保护区研究综述[J]. 代万,李春叶,周顺福,王有兵. 林业调查规划. 2017(06)
硕士论文
[1]人工辅助投食雌性滇金丝猴（Rhinopithecus bieti）的性激素水平与繁殖行为关系研究[D]. 李小玉.西华师范大学 2019
[2]秦岭金丝猴（Rhinopithecus roxellana）繁殖群雌性个体性激素和交配对策研究[D]. 刘燚.西北大学 2017
[3]川金丝猴雌二醇和孕酮检测方法评估及其在繁殖周期水平研究[D]. 陈伟贞.华中农业大学 2016
本文编号：3131471
【文章来源】：安徽大学安徽省 211工程院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
野外研究地点Figure2-1Fieldstudysite
短尾猴粪便性激素测定方法评估及其在生理周期研究中的应用16图2-4粪便处理与激素提取Figure2-4Treatmentandextractionofhormonesinfeces2.3粪便性激素提取方法综合国内外研究，参照其他非人灵长类物种中粪便激素提取与改良方法[16,35,38,113]，我们选取了4种常用抽提溶剂和抽提方法（乙醇加热法，甲醇乙醚法，乙醇丙酮法与甲醇乙醇法），分别对短尾猴粪便样品中雌二醇（E2）与孕酮（P4）进行抽提，详细操作步见表2-2。2.4粪便性激素检测方法采用放射免疫方法（RIA）与酶联免疫吸附分析法（ELISA）进行雌二醇（E2）与孕酮（P4）含量的测定，为减少实验误差，样品的测定与标准曲线的制备同时进行。雌二醇与孕酮测定的基本操作依照北京福瑞生物技术公司所生产的放免试剂盒和浙江惠嘉生物科技有限公司所生产的酶免试剂盒的研究说明和操作规程进行。每个样品重复测定2次，实验误差导致两次数值相差较大时，将对应样品进行第3次测定，保留相近的两组作为最终数据进行分析。2.5实验试剂盒及操作步骤实验试剂盒：碘[125I]猴类雌二醇放射免疫分析药盒（北京福瑞生物技术公司）碘[125I]猴类孕酮放射免疫分析药盒（北京福瑞生物技术公司）猴雌二醇（E2）酶联免疫试剂盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）猴孕酮（P4）酶联免疫试剂盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）
短尾猴粪便性激素测定方法评估及其在生理周期研究中的应用20图2-5不同粪便处理方式激素含量比较（图a：雌二醇，图b：孕酮；n=20，均值：Mean±SE*：P<0.05，**:P<0.01）Figure2-5Comparisonofhormonecontentindifferentfecaltreatmentmethods.(Figa:Estradiol,Figb:Progesterone;n=20,Mean±SE;*:P<0.05,**:P<0.01)4.2不同取食条件对处理方法的影响不同取食环境下粪便中高纤维杂质含量明显不同，可能会使粪便处理结果产生差异。我们另外对笼养与野生个体粪便数据分开进行分析。结果表明，笼养状态下，冻干研筛法保存雌二醇与孕酮激素含量仍最高（图2-6a，2-6b），但与冻干粉碎法无显著差异（P>0.05），两种粪便处理保存方式均可选择；但野生状态******
【参考文献】：
期刊论文
[1]雄性短尾猴维持临时配偶关系的行为适应性[J]. 方兴丽,张启信,夏东坡,李进华. 兽类学报. 2020(01)
[2]黄山雄性短尾猴的拥抱行为[J]. 刘一鸣,王希,张启信,方兴丽,李进华. 兽类学报. 2019(06)
[3]Interchange between grooming and infant handling in female Tibetan macaques（Macaca thibetana）[J]. Qi Jiang,Dong-Po Xia,Xi Wang,Dao Zhang,Bing-Hua Sun,Jin-Hua Li. Zoological Research. 2019(02)
[4]野生短尾猴集群运动的跟随者特征研究[J]. 李博文,王希,吴伟,李进华. 生物学杂志. 2019(01)
[5]圈养条件下黑猩猩月经、排卵和妊娠周期[J]. 朱迎娣. 动物学杂志. 2018(05)
[6]雄性短尾猴个体特征与临时配偶关系研究[J]. 吴义兵,张启信,王希,李博文,李进华. 兽类学报. 2018(05)
[7]雄性短尾猴的等级顺位、睾酮水平与肠道寄生虫感染强度的关系[J]. 吴伟,孙丙华,王希,李文博,李博文,李进华. 兽类学报. 2018(05)
[8]滇金丝猴粪便类固醇激素抽提及检测方法评估[J]. 黎嘉欣,杨秋立,普天春,卢雁平,王伟,刘学锋,刘定震. 野生动物学报. 2018(03)
[9]虎粪便类固醇激素检测及影响因素的评估[J]. 傅文源. 野生动物学报. 2018(02)
[10]近20年白马雪山国家级自然保护区研究综述[J]. 代万,李春叶,周顺福,王有兵. 林业调查规划. 2017(06)
硕士论文
[1]人工辅助投食雌性滇金丝猴（Rhinopithecus bieti）的性激素水平与繁殖行为关系研究[D]. 李小玉.西华师范大学 2019
[2]秦岭金丝猴（Rhinopithecus roxellana）繁殖群雌性个体性激素和交配对策研究[D]. 刘燚.西北大学 2017
[3]川金丝猴雌二醇和孕酮检测方法评估及其在繁殖周期水平研究[D]. 陈伟贞.华中农业大学 2016
本文编号：3131471
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