水稻OsNAC45基因参与脱落酸和盐响应的功能研究

发布时间：2021-04-21 10:16

　　盐胁迫是导致世界上农作物产量减少的重要非生物胁迫原因之一,我国盐渍化土地分布广泛,约占可耕种土地面积的四分之一,并且盐渍化的土地面积仍在逐年增加。水稻是世界上最重要的粮食作物之一,全世界大约一半的人口以水稻作为日常主食,因此水稻的产量和质量关系到人类最基本的生存问题。研究水稻耐盐机制,揭示其对盐胁迫的响应不仅对培育耐盐水稻提供了理论基础,而且有较高的实际应用价值,对解决世界粮食短缺问题有重要的意义。NAC转录因子是植物特有的基因家族,目前的研究发现NAC在植物一生过程中均发挥重要的作用,如植物根的生长与发育,顶端分生组织的形成,花器官的形态建成,叶片的衰老以及非生物胁迫抗性等方面均有报道。Os NAC45在盐胁迫响应过程中起到关键作用,研究Os NAC45的功能可以为耐盐水稻的培育提供重要的基因资源。本论文以水稻转录因子基因Os NAC45作为研究对象,主要取得结果如下:1.用荧光定量PCR的技术分析了水稻不同组织中Os NAC45的表达量,结果发现其在根、茎、叶、叶鞘和穗中均有表达,其中根部的表达量最高,穗中的表达量最低。Na Cl可以诱导该基因在根中的表达,Na Cl处理的时间梯度... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 土壤盐渍化现状
    1.2 盐胁迫对植物的危害
        1.2.1 盐胁迫影响植物的生长
        1.2.2 盐胁迫影响植物离子内稳态
        1.2.3 盐胁迫影响植物光合作用
        1.2.4 盐胁迫影响植物对水分的吸收
        1.2.5 盐胁迫影响植物生物膜系统
    1.3 植物的耐盐机制
        1.3.1 细胞区隔化
        1.3.2 渗透调节
    1.4 NAC转录因子家族的研究进展
        1.4.1 NAC转录因子的结构
        1.4.2 NAC转录因子的表达调控
        1.4.3 NAC转录因子功能多样化
        1.4.4 NAC转录因子参与植物生长发育
        1.4.5 NAC转录因子参与植物细胞壁的形成
        1.4.6 NAC转录因子参与植物应对非生物胁迫
    1.5 OsNAC45研究进展
    1.6 研究目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 本研究中主要使用的仪器
        2.1.2 本研究中各种溶液的配制
        2.1.3 本研究中各种培养基的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 植物基因组总DNA的提取
        2.2.2 质粒DNA的提取
        2.2.3 水稻总RNA的提取
        2.2.4 cDNA的合成
        2.2.5 荧光定量PCR
        2.2.6 PCR反应
        2.2.7 DNA的纯化
        2.2.8 DNA的酶切
        2.2.9 DNA的连接
        2.2.10 大肠杆菌的转化
        2.2.11 大肠杆菌阳性克隆的验证
        2.2.12 敲除载体的构建
        2.2.13 水稻原生质体相关实验
        2.2.14 水稻根免疫组化实验
        2.2.15 水稻植株表型相关实验
        2.2.16 酵母实验
        2.2.17 转录组测序
第三章 实验结果与分析
    3.1 OsNAC45基因的表达、蛋白定位与自激活
        3.1.1 OsNAC45基因的表达
        3.1.2 OsNAC45蛋白的亚细胞定位
        3.1.3 OsNAC45蛋白的组织定位
        3.1.4 OsNAC45蛋白的自激活验证
    3.2 OsNAC45转基因植株表型
        3.2.1 OsNAC45敲除植株的鉴定
        3.2.2 OsNAC45超表达植株的鉴定
        3.2.3 外源ABA对 OsNAC45 转基因植株发芽的影响
        3.2.4 外源ABA对 OsNAC45 转基因植株幼苗生长的影响
        3.2.5 OsNAC45突变体的盐胁迫表型
    3.3 转录组相关实验
        3.3.1 转录组结果分析
        3.3.2 转录组结果的验证
    3.4 转基因植株的农艺性状分析
第四章 结论与讨论
    4.1 结论与讨论
第五章 展望
    5.1 展望
参考文献
附录
缩略词对照表
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3151572