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细胞内局部Ca 2+ 释放的实时成像研究

发布时间:2021-04-24 00:09
  钙离子是细胞内普遍存在的第二信使,在神经元内参与了神经递质分泌等一系列重要活动。神经元中胞质Ca2+的瞬变会通过细胞膜上钙通道介导胞外Ca2+内流,或从细胞内Ca2+储存库(如内质网、线粒体、内溶酶体和分泌泡)释放。尽管目前Ca2+成像已取得进展,但是“快”钙信号和缓慢“关闭”特征要求使得直接观察个体钙库的Ca2+释放存在挑战。本研究创新了胞内Ca2+成像方法,以获得超快速、高分辨局部胞内钙信号,为胞内钙信号研究提供了快捷高效的研究新手段。(1)采用LAMP-EGFP指示溶酶体,EGTA作为胞内钙离子螯合剂,以Rhod2为钙指示剂,采用Confocal线扫模式,实现了TRPA1介导的溶酶体钙释放的实时成像,该钙信号不依赖于胞外钙离子,但采用GPN可完全阻断TRPA1介导的局部钙信号,表明这种方法可实时检测胞内溶酶体钙释放;(2)在原代海马神经元中,以Mitotracker green作为线粒体指示剂,采用相似的Confocal线扫模式,实时监测到FCCP介... 

【文章来源】:聊城大学山东省

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
前言
第一章 细胞内溶酶体中钙离子释放
    1.1 前言
    1.2 材料与方法
    1.3 实验方法
    1.4 实验结果
    1.5 讨论
第二章 细胞膜钙离子通道介导的钙离子内流
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
    2.3 实验方法
    2.4 实验结果
    2.5 结论
第三章 细胞内线粒体中钙离子信号
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
    3.3 实验方法
    3.4 实验结果
    3.5 讨论
结论与展望
附录
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的学术论文



本文编号:3156299

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