MicroRNA200b/a-TET3-REST调控小鼠嗅觉介导的行为和球形干细胞的增殖分化
发布时间：2021-04-27 15:58
嗅觉在动物的生命活动中发挥重要功能。作为哺乳动物嗅觉系统重要组成部分,主要嗅觉表皮（MOE）的主要作用是感知外界气味分子。MOE是一个活跃的组织,其嗅觉神经细胞具有终身再生能力。由于MOE暴露于鼻腔,与外界环境直接接触,因而包括Micro RNAs（miRNAs）在内的表观遗传因子对于多变环境下的MOE内嗅觉神经细胞增殖和分化具有重要的调控作用,因此MOE是研究表观遗传调控与组织神经分化发生关系的良好外周器官,但目前其机制仍不清楚。为了探究在嗅觉缺失小鼠模型[腺苷酸环化酶3（AC3）全身敲除小鼠]MOE组织内,哪些miRNAs表达发生改变。对成年雄性野生小鼠和同窝出生的AC3敲除小鼠MOE组织进行小RNA测序和荧光定量PCR（q PCR）,结果显示在AC3敲除小鼠MOE组织中miR-200b和miR-200a（miR-200b/a）的表达显著下调;为了探究AC3对miR-200b/a的调控关系,利用q PCR检测AC3基因敲入小鼠MOE组织中miR-200b/a的表达,结果显示在AC3基因敲入小鼠MOE组织中,miR-200b/a的表达显著升高;以上结果说明在小鼠MOE组织中AC3调控...
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略词表
第一章 序言
1.1 MOE组织神经分化及其中的表观遗传调控因子
1.1.1 MOE组织神经细胞组成
1.1.2 MOE组织神经分化
1.1.3 MOE组织与表观遗传调控
1.1.4 MiRNA简介
1.1.5 DNA去甲基化酶
1.1.6 抑制因素1(RE-1)沉默转录因子(REST/NRSF)
1.2 基因编辑技术和腺相关病毒
1.2.1 CRISPR-Cas9 基因编辑技术
1.2.2 腺相关病毒(AAV)
1.3 本研究思路与方法、主要研究内容
1.4 本研究目的与意义
第二章 miRNA调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化过程
2.1 材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验细胞
2.1.3 实验试剂与配方
2.1.4 实验仪器
2.1.5 实验方法
2.1.6 数据统计分析
2.2 研究结果
2.2.1 AC3 调控miR-200b/a的表达
2.2.2 MOE miR-200b/a敲低小鼠构建
2.2.3 miR-200b/a的嗅觉行为学功能
2.2.4 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中细胞增殖能力加强
2.2.5 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中GBCs细胞周期异常
2.2.6 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中Mash1 marked GBCs显著增多
2.2.7 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织内神经元分化减少
2.2.8 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织内神经元凋亡增加
2.2.9 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织GBC增殖异常,OSN分化异常及凋亡同时发生
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 miR-200b/a通过靶基因TET3 调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化过程
3.1 材料与方法
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验细胞
3.1.3 实验试剂与配方
3.1.4 实验仪器
3.1.5 实验方法
3.1.6 数据统计分析
3.2 研究结果
3.2.1 在细胞水平上miR-200a调控TET3 表达
3.2.2 在MOE组织水平上miR-200b/a调控TET3 表达
3.2.3 miR-200b/a+TET3 双敲低小鼠的构建
3.2.4 TET3 表达降低能够部分恢复miR-200b/a敲低导致的小鼠嗅觉介导的行为缺陷
3.2.5 TET3 表达降低能够恢复miR-200b/a敲低导致的小鼠MOE组织神经分化缺陷
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 REST参与调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化
4.1 材料与方法
4.1.1 实验动物
4.1.2 实验细胞
4.1.3 实验试剂与配方
4.1.4 实验仪器
4.1.5 实验方法
4.1.6 数据统计分析
4.2 研究结果
4.2.1 在小鼠MOE组织中TET3与REST相互作用
4.2.2 miR-200b/a+REST双敲低小鼠构建
4.2.3 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠嗅觉介导的行为缺陷
4.2.4 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE组织中GBCs增殖异常
4.2.5 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE组织中神经细胞分化和凋亡异常
4.3 讨论
4.4 小结
结论
参考文献
致谢
个人简介及攻读学位期间取得的研究成果
本文编号：3163750
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略词表
第一章 序言
1.1 MOE组织神经分化及其中的表观遗传调控因子
1.1.1 MOE组织神经细胞组成
1.1.2 MOE组织神经分化
1.1.3 MOE组织与表观遗传调控
1.1.4 MiRNA简介
1.1.5 DNA去甲基化酶
1.1.6 抑制因素1(RE-1)沉默转录因子(REST/NRSF)
1.2 基因编辑技术和腺相关病毒
1.2.1 CRISPR-Cas9 基因编辑技术
1.2.2 腺相关病毒(AAV)
1.3 本研究思路与方法、主要研究内容
1.4 本研究目的与意义
第二章 miRNA调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化过程
2.1 材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验细胞
2.1.3 实验试剂与配方
2.1.4 实验仪器
2.1.5 实验方法
2.1.6 数据统计分析
2.2 研究结果
2.2.1 AC3 调控miR-200b/a的表达
2.2.2 MOE miR-200b/a敲低小鼠构建
2.2.3 miR-200b/a的嗅觉行为学功能
2.2.4 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中细胞增殖能力加强
2.2.5 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中GBCs细胞周期异常
2.2.6 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织中Mash1 marked GBCs显著增多
2.2.7 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织内神经元分化减少
2.2.8 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织内神经元凋亡增加
2.2.9 miR-200b/a敲低小鼠MOE组织GBC增殖异常,OSN分化异常及凋亡同时发生
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 miR-200b/a通过靶基因TET3 调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化过程
3.1 材料与方法
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验细胞
3.1.3 实验试剂与配方
3.1.4 实验仪器
3.1.5 实验方法
3.1.6 数据统计分析
3.2 研究结果
3.2.1 在细胞水平上miR-200a调控TET3 表达
3.2.2 在MOE组织水平上miR-200b/a调控TET3 表达
3.2.3 miR-200b/a+TET3 双敲低小鼠的构建
3.2.4 TET3 表达降低能够部分恢复miR-200b/a敲低导致的小鼠嗅觉介导的行为缺陷
3.2.5 TET3 表达降低能够恢复miR-200b/a敲低导致的小鼠MOE组织神经分化缺陷
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 REST参与调控小鼠嗅觉介导的行为和MOE组织神经分化
4.1 材料与方法
4.1.1 实验动物
4.1.2 实验细胞
4.1.3 实验试剂与配方
4.1.4 实验仪器
4.1.5 实验方法
4.1.6 数据统计分析
4.2 研究结果
4.2.1 在小鼠MOE组织中TET3与REST相互作用
4.2.2 miR-200b/a+REST双敲低小鼠构建
4.2.3 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠嗅觉介导的行为缺陷
4.2.4 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE组织中GBCs增殖异常
4.2.5 REST表达抑制能够恢复miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE组织中神经细胞分化和凋亡异常
4.3 讨论
4.4 小结
结论
参考文献
致谢
个人简介及攻读学位期间取得的研究成果
本文编号：3163750
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3163750.html
