新型电镜技术研究酵母细胞及小鼠胰岛细胞和组织的超微结构

发布时间：2021-05-05 17:01

　　目前生命科学的研究进入到了系统生物学阶段,对于整体生命现象的研究,需要解决很多关键科学问题。1、如何保持样品接近生理状态?2、如何在细胞乃至组织层面上对样品进行大尺度的三维重构,得到细胞器、细胞和组织等的空间分布?电镜常应用广泛的常规化学固定方法,但化学固定剂与生物样品的交联具有选择性,容易造成假象。而近年来出现的高压快速冷冻（High Pressure Freezing,HPF）和冷冻替代技术（Freezing Substitution,FS）可以使生物样品快速冷冻固定,有效减少了样品制备过程中化学试剂对细胞结构的破坏,能够观察到细胞器近似自然状态下的超微结构。本文发展和完善了新的高压冷冻技术和冷冻替代技术样品制备方法用于电镜超微结构的观察,并分别在酵母细胞、哺乳动物细胞和胰岛组织的电镜样品制备中,获得了细胞器在接近生理状态的超微结构。同时发展了聚焦离子束扫描电镜（Focused Ion Beam scanning electron microscopy,FIB/SEM）三维重构技术,研究了II型糖尿病模型ob/ob小鼠胰岛β细胞致密核心囊泡的变化,为糖尿病的发生提供了依据。单细胞生... 

【文章来源】：浙江海洋大学浙江省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 研究背景
        1.1.1 电子显微镜概述
        1.1.2 电镜样品制备技术
        1.1.3 电镜三维重构
        1.1.4 模式生物-酵母
        1.1.5 糖尿病与胰岛素
    1.2 研究现状
        1.2.1 模式生物-酵母超微结构研究现状
        1.2.2 胰岛素瘤细胞及胰岛致密核心囊泡的超微结构研究现状
    1.3 研究意义及内容
        1.3.1 研究意义
        1.3.2 研究内容
第二章 新型高压冷冻和冷冻替代技术制备酵母细胞电镜样品和超微结构观察
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 实验结果
    2.4 实验讨论
第三章 高压冷冻和冷冻替代技术研究大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)的超微结构
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 INS-1细胞形态观察
        3.3.2 INS-1细胞超微结构观察
    3.4 实验讨论
第四章 双束扫描电镜技术研究小鼠胰岛超微结构
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 胰岛β细胞的超微结构
        4.3.2 β细胞的FIB/SEM重构
        4.3.3 FIB/SEM三维重构对ob/ob小鼠胰岛素囊泡分布的研究
    4.4 实验讨论
第五章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]胰岛素受体底物的功能及其基因多态性与2型糖尿病的关系[J]. 孙加琳,荆凡波,徐文,全香花,李晓,郭切,李欣,隋忠国.  中国药房. 2018(03)
[2]高压快速冷冻技术在两种培养细胞超微结构中的应用[J]. 肖丽国,李茵茵,李红梅,张雪晴,贾旭东,张勤奋.  电子显微学报. 2017(02)
[3]透射电镜负染色技术常见影响因素与对策[J]. 刘湘花,张彩丽,张俊霞,卢小康,李瑞琴.  临床与实验病理学杂志. 2016(10)
[4]酵母常规透射电镜样品制备方法的比较与改进[J]. 梁静南,杨琳,赵彤,刘一苇.  电子显微学报. 2015(01)
[5]电子断层成像技术及其在细胞生物学中的应用[J]. 何勇宁,何万中.  中国细胞生物学学报. 2013(11)
[6]胰岛素瘤动物模型的建立及特性研究[J]. 成兰云,许世清,张文健,娄晋宁,门秀丽.  中国病理生理杂志. 2013(04)
[7]透射电镜样品制备技术改良研究[J]. 毛晓霞,黄敏毅.  现代农业科技. 2013(07)
[8]酿酒酵母和异常毕赤酵母混菌发酵对白酒液态发酵效率和风味物质的影响[J]. 唐洁,王海燕,徐岩.  微生物学通报. 2012(07)
[9]高压冷冻技术在拟南芥细胞微结构研究中的应用[J]. 王广超,冯振华,孙旭东,郭建胜,祝建.  电子显微学报. 2010(02)
[10]应用高压冷冻-冷冻置换技术研究受Potyvirus侵染的寄主细胞超微结构[J]. 郑瑛,洪健,祝建,陈集双.  电子显微学报. 2010(02)



本文编号：3170256