巴戟天MoDXR基因及其启动子的克隆与分析

发布时间：2021-05-11 16:14

　　从巴戟天中克隆MEP途径中的1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶基因MoDXR及其启动子序列,并进行生物信息学分析、启动子区顺式作用元件分析,以及进行原核表达分析。根据巴戟天转录组中DXR基因原始序列和NCBI-ORFfinder分析,设计特异性引物,并进行RT-PCR扩增和生物信息学分析;采用染色体步移克隆MoDXR基因的5′端启动子序列;通过亚细胞定位分析MoDXR基因在细胞中的位置;构建原核表达载体pET-28a-MoDXR,导入BL21（DE3）表达感受态细胞后,在IPTG诱导下表达。从巴戟天中克隆的MoDXR基因,其cDNA全长2 015 bp,预测的阅读框大小为1 425 bp,编码474个氨基酸,分子质量为51.27 kDa; BlastP序列比对分析表明MoDXR基因与其他植物的DXR基因具有高度同源性,如:咖啡树DXR （CaDXR）、萝芙木DXR （RvDXR）;系统进化发育树分析显示,巴戟天MoDXR蛋白与小粒咖啡和栀子的DXR蛋白聚为一类,其亲缘关系最近;由亚细胞定位可知MoDXR基因所编码的蛋白定位于叶绿体上; MoDXR基因5′端启动子序列长度为1 493... 

【文章来源】：药学学报. 2020,55(02)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
材料与方法
结果与分析
    1 巴戟天MoDXR基因克隆
    2 巴戟天MoDXR生物信息学分析
    3 巴戟天MoDXR基因启动子区顺式作用元件分析
    4 MoDXR亚细胞定位分析
    5 巴戟天MoDXR蛋白原核表达分析
    6 巴戟天MoDXR基因相对表达量分析
讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3181711