苦楝根际促生菌的筛选及其提高苦楝耐铅能力的研究
发布时间：2021-06-09 05:28
土壤Pb污染作为一个长期存在且十分严峻的环境问题,在国内引起广泛关注。采用植物-微生物联合修复土壤重金属污染,属于理想的生态治理方案。而木本植物因为其生物量大、不会轻易流入食物链等优点,逐渐开始替代草本植物和农作物。根际促生菌PGPR,作为土壤-植物系统中,自然存在且与植物生长联系紧密的微生物群体,成为植物-微生物联合修复的应用主体之一。植物-微生物联合修复土壤Pb污染的关键,在于Pb胁迫条件下微生物对植物体生长及耐铅性的促进效果。本文模拟Pb矿渣污染环境,在矿渣/土壤总质量比例为10%、50%盆栽中种植苦楝,一年后取根际土进行根际促生菌（PGPR）的筛选和鉴定。得到耐铅PGPR共17株,其中菌株B1-B7为同一种菌,属假单胞菌属（Pseudomonas sp.）;D1-D10为同一种菌,为蒙太利假单胞菌（Pseudomonas montalli sp.）。选取ACC脱氨酶活性较强、产生IAA含量较高并具有一定的产铁载体能力的假单胞菌（B1）、蒙太利假单胞菌（D8）为供试菌株,进行盆栽接种实验,接种量为108 cfu菌液40mL共2次,设置三个Pb污染浓度:Omg/kg（CK）、100...
【文章来源】：中南林业科技大学湖南省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１分离菌株１６ＳｒＤＮＡ的进化树图??Ｆｉｇ?２．１?Ｎｅｉｇｈｂｏｕｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ?ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?
中南林业科技大学硕士学位论文?苦棟根际促生菌的筛选及其提高苦楝耐铅能力的研究??能力初步说明，菌株Ｂ３、Ｂ７产铁载体能力较弱，而Ｄｌ、Ｄ３、Ｄ１０不具备产铁载体??的能力。??图２．４菌株解磷能力??Ｆｉｇ?２．４?Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ?ｄｉｓｓｏｌｖａｔｉｏｎ?ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎｓ??表２．１菌株产铁载体含量及解磷能力??Ｔａｂｌｅ?２．１?ｉｒｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ａｎｄ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｒｅｍｏｖａｌ?ｃａｐａｃｉｔｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｒａｉｎｓ??土壤矿渣含量?菌株编号?铁载体含量（Ｄ／ｄ）?解磷能力（有／无）??Ｂ１?１．２２４４?有??Ｂ２?１．２０４４?无??Ｂ３?１．１７３２?芩无??１０％?Ｂ４?１．０８９４?无??Ｂ５?１．１７２９?无??Ｂ６?１．１５１７?无???Ｂ７?ｉ．１０４５?Ｗ???Ｄ１?山无??Ｄ２?１．１７８９?无??Ｄ３?无??Ｄ４?无??５０％?Ｄ５?１．１６７８?有??Ｄ６?１．０９０４?无??Ｄ７?１．１３１８?无??Ｄ８?１．２０１４?无??Ｄ９?１．０６５０?无??Ｄ１０?无??最终确定ＡＣＣ脱氨酶活性较高，同时产生较多含量ＩＡＡ，并具备产铁载体能力??的菌株Ｂｌ、Ｂ４、Ｂ６及Ｄ７、Ｄ８、Ｄ９测定其生长曲线（如图２．５）。４－１２ｈ为菌株Ｂ１、??Ｂ４、Ｂ６的生长期，１２－２４ｈ内为稳定期；菌株Ｄ７、Ｄ８、Ｄ９的生长期为０－８ｈ，?８－２４??１７??
中南林业科技大学硕士学位论文?苦楝根际促生菌的筛选及其提高苦棟耐铅能力的研究??ｈ稳定生长。生长曲线基本一致。??１．４???１．４????１．２?－?１２?■??１。?Ｉｆ?－??Ｓ?０６＇?ｋ?０?８?ｉｆ??８－?／?＾??ｈ?—Ｂ１?／：／?〇７??０．４?■?？？？０…Ｂ４?０．４?－?／?：／?…Ｏ…Ｄ８??／Ｍ?ＢＳ?／?ｐｆ?＿，一?０９??－ｖｆ?一＂?－ｒ??００＇??０．０????０?２?４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４?２６?０?２?４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４?２６??培养时间（ｈ）??图２．５细菌生长曲线??Ｆｉｇ?２．５?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ??２．４本章小结??本实验通过传统的微生物分离纯化的方法，从铅锌矿渣污染土壤中苦楝根际土??壤中筛选出菌株，通过１６Ｓ?ｒＤＮＡ基因同源性序列比较，鉴定为假单胞菌属??和蒙太利假单胞菌？獅；７／（７／／／ｓｐ．）。通过对初筛得??到的１７株菌株的ＡＣＣ脱氨酶、产ＩＡＡ、产铁载体、解磷能力的研宄，得出Ｂ１、??Ｄ８在各项指标中表现最优，确定使用这两支菌株进行后续的耐铅促进实验。??１８??
本文编号：3220035
【文章来源】：中南林业科技大学湖南省
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【学位级别】：硕士
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图２．１分离菌株１６ＳｒＤＮＡ的进化树图??Ｆｉｇ?２．１?Ｎｅｉｇｈｂｏｕｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ?ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?
中南林业科技大学硕士学位论文?苦棟根际促生菌的筛选及其提高苦楝耐铅能力的研究??能力初步说明，菌株Ｂ３、Ｂ７产铁载体能力较弱，而Ｄｌ、Ｄ３、Ｄ１０不具备产铁载体??的能力。??图２．４菌株解磷能力??Ｆｉｇ?２．４?Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ?ｄｉｓｓｏｌｖａｔｉｏｎ?ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎｓ??表２．１菌株产铁载体含量及解磷能力??Ｔａｂｌｅ?２．１?ｉｒｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ａｎｄ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｒｅｍｏｖａｌ?ｃａｐａｃｉｔｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｒａｉｎｓ??土壤矿渣含量?菌株编号?铁载体含量（Ｄ／ｄ）?解磷能力（有／无）??Ｂ１?１．２２４４?有??Ｂ２?１．２０４４?无??Ｂ３?１．１７３２?芩无??１０％?Ｂ４?１．０８９４?无??Ｂ５?１．１７２９?无??Ｂ６?１．１５１７?无???Ｂ７?ｉ．１０４５?Ｗ???Ｄ１?山无??Ｄ２?１．１７８９?无??Ｄ３?无??Ｄ４?无??５０％?Ｄ５?１．１６７８?有??Ｄ６?１．０９０４?无??Ｄ７?１．１３１８?无??Ｄ８?１．２０１４?无??Ｄ９?１．０６５０?无??Ｄ１０?无??最终确定ＡＣＣ脱氨酶活性较高，同时产生较多含量ＩＡＡ，并具备产铁载体能力??的菌株Ｂｌ、Ｂ４、Ｂ６及Ｄ７、Ｄ８、Ｄ９测定其生长曲线（如图２．５）。４－１２ｈ为菌株Ｂ１、??Ｂ４、Ｂ６的生长期，１２－２４ｈ内为稳定期；菌株Ｄ７、Ｄ８、Ｄ９的生长期为０－８ｈ，?８－２４??１７??
中南林业科技大学硕士学位论文?苦楝根际促生菌的筛选及其提高苦棟耐铅能力的研究??ｈ稳定生长。生长曲线基本一致。??１．４???１．４????１．２?－?１２?■??１。?Ｉｆ?－??Ｓ?０６＇?ｋ?０?８?ｉｆ??８－?／?＾??ｈ?—Ｂ１?／：／?〇７??０．４?■?？？？０…Ｂ４?０．４?－?／?：／?…Ｏ…Ｄ８??／Ｍ?ＢＳ?／?ｐｆ?＿，一?０９??－ｖｆ?一＂?－ｒ??００＇??０．０????０?２?４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４?２６?０?２?４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４?２６??培养时间（ｈ）??图２．５细菌生长曲线??Ｆｉｇ?２．５?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ??２．４本章小结??本实验通过传统的微生物分离纯化的方法，从铅锌矿渣污染土壤中苦楝根际土??壤中筛选出菌株，通过１６Ｓ?ｒＤＮＡ基因同源性序列比较，鉴定为假单胞菌属??和蒙太利假单胞菌？獅；７／（７／／／ｓｐ．）。通过对初筛得??到的１７株菌株的ＡＣＣ脱氨酶、产ＩＡＡ、产铁载体、解磷能力的研宄，得出Ｂ１、??Ｄ８在各项指标中表现最优，确定使用这两支菌株进行后续的耐铅促进实验。??１８??
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