MiR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响研究

发布时间：2021-06-14 01:30

　　目的:探究miR-186-5p对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其潜在的分子机制。方法:qRT-PCR检测miR-186-5p在不同周龄小鼠白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞增殖分化过程中的表达变化;通过脂质体将miR-186-5p mimics、inhibitors转染入增殖液或分化液培养的3T3-L1细胞后,利用CCK-8、EdU和qRT-PCR检测3T3-L1前脂肪细胞增殖变化,油红O染色观察其脂滴形态;通过生物信息软件TargetScan和双荧光报告系统分别对miR-186-5p靶基因进行预测和确认。结果:（1） miR-186-5p在1～6周龄小鼠的白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞自然分化过程中表达量均逐渐上调。（2）与阴性对照相比,mimics或inhibitors转染分别显著地促进或抑制了miR-186-5p的表达。（3）过表达miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞的增殖速率减慢,脂滴增大增多;而抑制miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞增殖速率增快,脂滴数量减少,且粒径变小。其中过表达miR-186-5p显著地降低了野生型Wnt5a和M... 

【文章来源】：中国生物工程杂志. 2020,40(03)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

miR-186-5p在各组织、3T3-L1前脂肪细胞中的表达量

转染和诱导3T3-L1前脂肪细胞分化8天后，油红O染色显示:与阴性对照组相比，过表达miR-186-5p组细胞分化明显，形成红色脂滴较多，而抑制miR-186-5p处理组细胞分化能力降低，红色脂滴较少(图3a)。甘油三酯含量检测结果表明:相比于对照组，mimics组甘油三酯含量显著增多，而inhibitors组甘油三酯含量减少(图3b)。实时荧光定量结果与上述观察相一致，即与阴性对照相比，过表达组的脂肪生成关键基因PPARγ、C/EBPα、a P2、FABP4、ELOVL6、LPL的表达量分别增加2.8倍、4.0倍、3.8倍、2.1倍、2.5倍、4.0倍，抑制剂处理组PPARγ、C/EBPα、aP2、ELOVL6、LPL的表达量分别减少了38.8%、49.7%、60.6%、44.4%、56.5%(图3c)。综上所述，miR-186-5p可在细胞水平上促进3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。图3 miR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

miR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-130b靶向PPARγ抑制家兔前体脂肪细胞分化[J]. 何洪炳,蔡明成,梁小虎,贾先波,赖松家.  畜牧兽医学报. 2017(11)
[2]miR-92a-3p对3T3-L1前体脂肪细胞增殖与分化的影响[J]. 张丽华,欧阳丹,徐立凤,马勇江,张媛,李玉谷.  中国兽医科学. 2016(11)
[3]Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用[J]. 陈芳,周畅,陆艳霞,袁理,彭皤莉,郑林,李学农.  南方医科大学学报. 2013(05)



本文编号：3228771