小分子探针发现的Hsp70/Bim二聚体的功能研究

发布时间：2021-07-14 10:07

　　细胞凋亡是细胞程序性死亡。Bcl-2家族蛋白作为内源凋亡的关键蛋白在内源凋亡途径中发挥重要功能。Bcl-2家族蛋白中的抗凋亡蛋白通过BH3结构域（motif）与促凋亡蛋白相互作用,阻止促凋亡蛋白改变线粒体外膜的通透性（MOMP）引发细胞凋亡,从而导致癌症的发生与发展。诸多研究表明除16个经典的Bcl-2家族蛋白以外,生物体中还存在许多未知的含BH3沟槽的BH3受体蛋白,能够与BH3 motif相互作用从而影响凋亡的发生。发现这些蛋白并揭示它们与其所在通路调控凋亡的新机制将为抗肿瘤治疗提供新的癌症靶标,为精准治疗提供依据。然而BH3结构域介导的蛋白-蛋白相互作用通常具有结合力弱、结合瞬时发生、可逆等特点,传统的生物学手段例如免疫共沉淀难以发现新的BH3受体蛋白。近年来化学蛋白质组学技术快速发展,其中应用最广泛的是基于活性的小分子探针技术（activity-based probes,ABPs）。ABPs技术的核心是设计一个能与蛋白质活性氨基酸残基发生共价反应的活性分子探针。该探针以小分子蛋白抑制剂为结构核心,在保留对靶点蛋白的抑制能力的基础上,通过光交联反应实现细胞内原位识别-捕获抑制剂靶... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 引言
    1.2 凋亡相关蛋白是肿瘤治疗的分子靶标
        1.2.1 Bcl-2 家族蛋白是内源凋亡的关键蛋白
        1.2.2 热休克70 家族蛋白平衡蛋白质质量与细胞凋亡
        1.2.3 其他调控细胞凋亡的分子靶标
    1.3 未知BH3 受体蛋白
    1.4 化学蛋白质组学与肿瘤靶标的发现
        1.4.1 基于活性的小分子探针技术(ABPs)
        1.4.2 发现新的BH3 受体蛋白
2 利用S1b-probe发现Hsp70 是新的BH3 受体蛋白
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验材料、试剂与仪器
        2.2.2 实验方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 基于BH3 功能模拟物设计、合成探针分子库
        2.3.2 基于表型筛选获得活性小分子探针S1b-probe
        2.3.3 Hsp70是S1b的靶蛋白
        2.3.4 Hsp70 是新的BH3 受体蛋白
3 Hsp70与Bim的二聚体及其功能
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验材料,试剂与仪器
        3.2.2 实验原理与方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 Hsp70/Bim二聚体正向调控HSP70 的分子伴侣功能
        3.3.2 Hsp70/Bim二聚体通过稳定癌蛋白AKT和 Raf来抗凋亡
结论
展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3283927