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中间锦鸡儿CiCPK32基因的克隆与功能分析

发布时间:2021-09-27 21:21
  钙依赖型蛋白激酶(Calcium dependent proteinkinase,CDPK/CPK),广泛存在于植物和原生生物中,作为Ca2+的受体蛋白和效应蛋白在信号转导过程中起着关键的作用。并且,CPKs在植物正常生长和抵抗逆境过程中具有重要作用。中间锦鸡儿(Caragana intermedia),具有耐旱、耐寒、耐高温、耐盐碱特点,是我国北方荒漠化地区的优良造林树种。本研究以中间锦鸡儿为材料,通过RACE技术克隆到一个CiCPK32基因,并对其在不同胁迫响应中所发挥的功能做了初步的研究,结果如下:1.CiCPK32基因cDNA长2074bp,开放阅读框长1566bp,编码521个氨基酸,预测的蛋白的分子量为58.91kD。经氨基酸序列比对与系统进化分析显示,该蛋白与拟南芥CPK32(AT3G53040)一致性达77%,因此将其命名为CiCPK32。2.通过实时荧光定量PC R对CiCPK32基因在不同逆境胁迫下表达量进行了检测,结果显示该基因受干旱、ABA、高盐等处理的诱导,推测该基因可能与中间锦鸡儿响应逆境胁迫机制有关。3.构建了过表达载体p35S::CiCPK32-HA,并... 

【文章来源】:内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

中间锦鸡儿CiCPK32基因的克隆与功能分析


ePK结构图脚f够11七.盆1和以坦

诱导基因,干旱胁迫


干旱胁迫下,拟南芥中acpk/d/cd/^/通过与热休克蛋白hs参与ABA和钙离子介导的气孔运动的调节,从而提高植物的抗旱性[66],表现出较高的抗盐和抗旱性,并且在两种胁迫下,转基因植物比野多的脯氨酸[?。通过对水稻研宄发现,该基因可以通过增加脯糖的含量以及改善干旱胁迫下气孔的开度,从而提高植物的保水性能和.?2?ABA??落酸(Abscisic?acid,ABA)被认为是一种关键植物激素,调节植物的[68?69]。ABA是在60年代时被分离和鉴定出来,最初人们对它的认识是剂,经过后人们大量的研宄发现ABA参与植物胚胎发育、种子休眠、逆境胁迫等多个方面to7°]。??使用ABA处理植物时,从刺激到做出准确反应这一过程分为5个阶段:、细胞间信号传递、膜上信号转换,细胞内信号转导及蛋白质可逆磷酸A信号的细胞识别、以第二信使为中心的胞内信号转换和以蛋白磷酸化

模型图,转录调控,模型,中间锦鸡儿


6?中间锦鸡儿C/g/光及基因的克隆与功能分析或者是外源ABA含量增加时,ABA受体蛋白和ABA结合,形ABA-PYR/PYL/RCAR复合体,然后与A类PP2C结合并抑制其激酶活性,从致SnRK2激酶活性被激活,磷酸化下游转录因子ABF/AREB或离子通道,从节ABA应答基因的表达,调控机体做出相应的反应?。??Osmotic?stress??

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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[2]中间锦鸡儿3个DUF基因的生物信息学分析和CiDUF966-1基因功能分析[D]. 杨天瑞.内蒙古农业大学 2018
[3]普通小麦钙依赖蛋白激酶基因TaCDPK1的抗旱功能研究[D]. 赵婉莹.西北农林科技大学 2018
[4]甜瓜CDPK和CRK基因家族的鉴定及表达分析[D]. 张海斐.西北农林科技大学 2017
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[7]两种不同生境植物CDPK1基因的克隆及功能初探[D]. 田晓涵.石河子大学 2016
[8]玉米CDPK基因家族的克隆、表达分析及ZmCPK12功能初探[D]. 张毓露.新疆农业大学 2012
[9]组成型和可诱导型启动子驱动的AtCDPK1过表达增强拟南芥对干旱和盐胁迫的抗性[D]. 刘贞.内蒙古农业大学 2012
[10]柠条锦鸡儿咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因cDNA和gDNA全长克隆及生物信息学分析[D]. 张烨.内蒙古农业大学 2011



本文编号:3410636

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