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单细胞解析不同来源脂肪间充质干细胞的特征研究

发布时间:2021-10-04 23:47
  间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)是一类起源于中胚层的成体多能干细胞,具有自我更新、增殖分化的能力。目前,MSC已广泛应用于多种疾病治疗的临床试验,有望成为未来细胞治疗的主力军。MSC来源众多,骨髓、脂肪、脐带、胎盘、牙髓等组织都被发现存在MSC。然而,如何根据疾病来选择MSC的类型仍是一个难题。根据已注册的临床试验,脂肪来源间充质干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSC)和骨髓来源 间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)都被用于骨关节炎的临床治疗研究,但尚不清楚何种MSC更合适。为解决这一关键科学问题,本论文第一章对ADSC和BMSC的特征差异及临床疗效进行比较性研究;第二章将根据第一章的结论,比较研究不同部位和不同年龄的脂肪组织及其来源ADSC的特征。第一章本研究对ADSC和BMSC进行单细胞转录组测序分析,发现ADSC具有更低的转录组异质性、更低的免疫原性和更高的免疫调节能力。Meta分析结果提示在骨关节炎的细胞治疗临床试验中,ADSC的治疗效果较BMSC更为稳... 

【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:144 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

单细胞解析不同来源脂肪间充质干细胞的特征研究


图1-1?ADSC和BMSC表面标志物流式分析??

诱导时间,骨诱导,茜素,软骨


撕CCfe麵士麵论文?鑛一g比较麵:宄郷和顧sc??ADSC和BMSC在成脂、成骨、成软骨诱导培养基下诱导培养一定时间,分别??行茜素红染色、油红染色和番红?染色,实验结果验证了?ADSC和BMSC均具有向??骨、脂肪、软骨分化的能力(图1-2)。以上结果证实了体外分离培养的ADSC和??BMSC符合ISCT对MSC制定盼标准,表明这两种细胞可以用于后续实验。??Alizarin?Red?Oil?Red?Safranin?O??■I'?1麵??图1-2?ADSC和BMSC三系分化和染色结果??成骨诱导结果为茜素红染色,诱导时间21天;成脂诱导.结果为油红染色,诱导时间14天;成??软骨诱导參皋为番,|1染?色,.诱导时:间21天;!?Alizarin?Red:薺素红.;.Oil?Red:油|為Safranin??0:赘:fc|?見*,咸骨诱导成脂诱导和,成较脅诱导如叫1??本章节共获取并利用■了?6个供体来源的ADSC和BMSC,供体和样本的详细??信息见表1-1。??表1-1?ADSC和BMSC的供者和样本信息表??年齡性别?BMI?,断?取样部位??供者1?38?男?21.22?股骨骨折?大腿皮下脂肪和股骨骨傭??17??

示意图,平台,示意图,文库


辦驗?籮一攀比:辕德爾?flADSig:和挪芄??2.3.3单细胞转录组异质性分析??首先利用R中dist〇函数j分别计算ADSC、BMSC各自每两+细胞之间的欧几??里得距离,对得到的所有距离值求平均,比较ADSC和BMSC内部的平均距离并??利用?wi_lcox.test():函敷进行■?Wilcoxon?rank?sum?test?橋验_^??2.3.4统计学分析??未作特殊说明,所有的数据表示为均值±标准差(SD),每组祥本量1123,用'??t-test骚验进行统计检■验,P<〇.〇5为具有显著性差异〇??2.4实验结果??为了分析ADSC和BMSC在单细胞水平的异质性,对前期分离培养的同一个??体来源的ADSC和BMSC行单细胞转录俎测序。对获得的数据进行预处理,过滤??掉不合格的细胞及基因,最终分别有83个ADSC转录组文库及69个BMSC转录??组文库用于后续分析(图2-1)、??Donor?1??A??Hi???i?,??i?i??@?@??ADSC?BMSC??C1?scRNA-seq??图2-1用于Fluidigm?Cl平台单细胞实验的ADSC和BMSC培养示意图??同一个徐:乘魏的ADSC和BMSC在##壤#爾第代迸音单细逾袁摩的■备??2.1??

【参考文献】:
期刊论文
[1]自体骨髓间充质干细胞移植对膝骨性关节炎的疗效观察[J]. 吕晓霞,黄诚,尹至,洪必根,姜洪江,黄相杰.  中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2015(02)
[2]关节镜清理联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗膝骨关节炎的疗效观察[J]. 谭勇海,姜苗苗,于海勇,李佳林,苘志英.  中医正骨. 2013(10)

硕士论文
[1]自体骨髓间充质干细胞治疗早期膝骨性关节炎的临床研究[D]. 张春琪.河南中医学院 2015



本文编号:3418570

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