木薯MeCAMTA基因的克隆与原核表达

发布时间：2021-10-11 07:50

　　木薯是全世界尤其是热带地区十分重要的粮食作物,植物中钙调蛋白转录因子（calmodulin-binding transcription activator, CAMTA）参与植物生长发育调控。为更好地了解CAMTA基因结构和特征,探究木薯钙调蛋白转录因子在抗病免疫反应中的功能。本研究从木薯中克隆得到一个MeCAMTA基因,并构建pET32a-MeCAMTA原核表达载体,分析不同温度对原核表达菌株生长情况的影响,探究不同温度条件下CAMTA蛋白诱导表达情况,并对MeCAMTA启动子元件进行分析。结果显示,温度对原核表达菌株生长情况有一定影响,在28℃的诱导条件下可在原核表达pET32a-MeCAMTA菌株上清中获得CAMTA蛋白,MeCAMTA启动子元件分析结果表明该基因启动子中含有多个参与胁迫反应的顺式作用元件。探究木薯免疫调控相关基因CAMTA的功能,有助于完善木薯抗病免疫反应中相关的信号通路,有助于提高木薯抗病性。 

【文章来源】：分子植物育种. 2020,18(03)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 MeCAMTA基因的克隆
    1.2 原核表达载体的构建
    1.3 不同温度对原核表达MeCAMTA菌株的生长影响
    1.4 MeCAMTA重组蛋白的诱导表达
    1.5 MeCAMTA重组蛋白的纯化和Western Blot验证
    1.6 MeCAMTA启动子元件预测
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 试验材料
    3.2 木薯总RNA的提取及cDNA的合成
    3.3 MeCAMTA基因的克隆
    3.4 原核表达载体的构建
    3.5 不同温度对原核表达MeCAMTA菌株的生长影响
    3.6 SDS-PAGE电泳检测
    3.7 MeCAMTA重组蛋白的纯化
    3.8 MeCAMTA重组蛋白的Western Blot验证
    3.9 MeCAMTA启动子元件预测
作者贡献


【参考文献】：
期刊论文
[1]人参Cu/Zn SOD原核可溶性表达条件的优化[J]. 高云鹏,赵雨,王思明,刘美辰,王佳雯.  长春中医药大学学报. 2018(04)

硕士论文
[1]鲫鱼MBSP重组表达系统的优化及其稳定性机制研究[D]. 李婷.集美大学 2016



本文编号：3430097