蓝藻不同类型胶被提取方法

发布时间：2021-10-17 15:53

　　胶被作为蓝藻细胞外的一层功能性结构,其提取方法仍不清晰完善.本研究选取具有不同胶被形态的鱼腥藻Anabaena sp.和念珠藻Nostoc sp.为实验材料,通过归纳近10年有关藻类胶被的提取方法,总结影响胶被提取效果的主要因素（温度、提取剂浓度、时间等）范围,并设置一系列因素及其梯度的双因素实验和正交实验对胶被提取方法进行优化,观察提取过程中藻细胞形态、自发荧光以及藻细胞密度变化.结果表明,粘液可通过离心法与藻细胞分离;荚膜提取的硫酸水浴法的最优条件为:1 mol/L、60℃、30 min,氢氧化钠水浴法为:0.01 mol/L、50℃、20 min;鞘提取的最优方法条件为氢氧化钠水浴法（0.01 mol/L、80℃、40 min）和超声法（20 kHz,30 W,on:3 s,off:3 s,2 min）结合处理.此外,通过高效液相色谱法测定提取的蓝藻胶被多糖组分,结果显示,鞘具有较强的疏水性,未水化为粘液或RPS,而荚膜中含有的氨基葡萄糖（1.261±0.02 mg/g）使得荚膜比鞘更具有粘附力.将本研究得到的荚膜和鞘的最优提取法运用到胶被形态以荚膜和鞘为主的其他藻种,均有很好的... 

【文章来源】：湖泊科学. 2020,32(03)北大核心EICSCD

【文章页数】：12 页

【部分图文】：

鱼腥藻和念珠藻的胶被形态:(a～c)FACHB-82鱼腥藻;(d～e)FACHB-599念珠藻(a、b:未染色;c:印度墨水染色，荚膜(白箭头)，粘液(红箭头);d:未染色，鞘(黑箭头);e:印度墨水染色)

念珠藻在高速离心(>15000g,>1 h)后，鞘结构发生小部分破裂，少部分藻链逸出，经印度墨水染色发现逸出藻链周围无胶被存在(图2d)．超声法对胶被提取效果不明显，且功率过高容易导致细胞破裂(图2e)．阳离子交换树脂法只能提取最外层鞘，内层鞘提取效果不明显(图2f)．在温度、时间阈值内适当提高温度、延长处理时间，氢氧化钠水浴法(0.01 mol/L,80℃，40 min)可以使鞘结构变得松散(图2g)，但胶被依然存在(图2h)，再用超声法冰浴超声(20 kHz，≥30 W，≥2 min,on:3 s,off:3 s)，即可将念珠藻藻丝与鞘层完全分离(图2i).2.2 蓝藻胶被提取方法条件优化

念珠藻在高温、长时间的氢氧化钠水浴法(0.01 mol/L,80℃，40 min)条件下鞘结构才变得松散，在光学显微镜下未见明显边缘(图2g)，由于超声功率过大，时间过长易对藻细胞产生一定的机械破坏，因此选择低功率、短时间冰浴超声(20 kHz,30 W,2 min,on:3 s,off:3 s)结合处理即可将胶被和藻丝完全分离(图2i)，且自发荧光依然存在(图3C).图4 鱼腥藻完全提取胶被实验组下藻细胞密度

【参考文献】：
期刊论文
[1]微囊藻胶鞘多糖和水溶性胞外多糖的化学特性[J]. 陈毛珍,谢梅娟,巫伟,喻富根,李朋富.  湖泊科学. 2016(03)
[2]铜绿微囊藻（Microcystic aeruginosa var.major）胞外酸性多糖的分离、纯化及其理化特性[J]. 梅秋红,缪月秋,张成武,陆长梅,吴国荣.  湖泊科学. 2005(04)



本文编号：3442020