抗铁蛋白杂交瘤细胞无血清培养技术研究
发布时间：2021-10-17 18:56
杂交瘤细胞具有无限繁殖和抗体分泌的双重优势,其规模化培养工艺是当前生产抗体产品的重要技术。规模化无血清培养杂交瘤细胞具有简化工艺、降低生产成本、提高抗体产量等优点。本文研究了血清对骨髓瘤及杂交瘤细胞生长的影响,在此基础上研发了适合杂交瘤细胞生长的无血清培养基,并进一步研究了杂交瘤细胞无血清培养基的转瓶扩大培养,主要内容包括以下几个部分:第一,配制含不同血清浓度（10%、7.5%、5%）的DMEM培养基,将生长状态良好、处于对数期的5H2、Sp2/0-Ab、Sp2/0三种细胞分别以三种不同的接种密度接种到含上述培养基的12孔细胞培养板中,考查了不同血清浓度、不同接种密度对细胞生长与增殖的影响。通过细胞计数仪测量的数据表明血清浓度对三种细胞都有较大影响,三种细胞在10%血清浓度培养基中正常生长而在低血清浓度中不能正常生长,在相同的血清浓度下,具有高细胞接种密度的细胞增殖较快并且倍增时间短。第二,将DMEM培养基、Ham’s F-12培养基和RPMI1640培养基按照一定比例配制成基础培养基,在此基础上加入不同量的胰岛素、水解蛋白、转铁蛋白、胆固醇和乙醇胺等成分配制成无血清低蛋白培养基。通过...
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
H2细胞在不同血清浓度下低密度接种生长曲线
图 2-2 5H2 细胞在不同血清浓度下中密度接种生长曲线Figure 2-2 Medium density seeding growth curve of 5H2 cells at different serum concentration图 2-3 5H2 细胞在不同血清浓度下高密度接种生长曲线Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration
13图 2-3 5H2 细胞在不同血清浓度下高密度接种生长曲线Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration从表2-3中可以看出，在目前常用的10%血清浓度的培养基中，以三种接种密度0.5×105个/mL，中密度1.4×105个/mL，高密度2.8×105个/mL）的细胞都能够的生长，且细胞大小均匀、状态良好。其中即使以较低的0.5×105个/mL来进细胞也能正常存活，并且最终达到4.84×105个/mL。而当以2.8×105个/mL接种4天的培养，细胞密度最高达到了18.07×105个/mL（见图2-3）。这些结果表明，浓度的培养基能够为细胞的生长和增殖提供必需的各种因子和营养物质。
【参考文献】：
期刊论文
[1]动物细胞无血清培养技术研究进展[J]. 阿尔祖古丽,马桂兰,阿依木古丽,乔自林. 甘肃畜牧兽医. 2018(10)
[2]杂交瘤细胞体外大规模培养研究进展[J]. 孙静静,周伟伟,周雷鸣,赵巧辉,李桂林. 中国生物工程杂志. 2018(10)
[3]靶点介导的药物处置模型在单克隆抗体药物研发中应用的探讨[J]. 季双敏,朱校. 中国临床药理学与治疗学. 2018(03)
[4]不同pH值聚乙二醇对鸡红细胞融合的影响[J]. 张丽娇,丁亦男,魏健,高立宏. 黑龙江畜牧兽医. 2018(05)
[5]毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用[J]. 陈泓序,屈锋. 色谱. 2018(03)
[6]动物细胞规模化培养技术现状[J]. 楚品品,蒋智勇,勾红潮,宋帅,李淼,李艳,李春玲,蔡汝健. 动物医学进展. 2018(02)
[7]无血清培养基的研究进展[J]. 张松,乔自林,王家敏. 江西畜牧兽医杂志. 2018(01)
[8]单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病病原体检测中的应用[J]. 赵笑,张冬梅. 中国病原生物学杂志. 2016(08)
[9]单克隆抗体纯化技术研究进展[J]. 汪立法. 黑龙江科技信息. 2016(24)
[10]抗表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体高表达细胞株的克隆筛选[J]. 李郑武,姜媛媛,李国军,高晶,袁淑杰. 黑龙江科技信息. 2016(13)
博士论文
[1]哺乳动物细胞培养工艺优化[D]. 贡向辉.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2006
硕士论文
[1]CHO DG44稳定细胞株无血清培养基的研发与优化[D]. 郭纪元.厦门大学 2014
[2]CHO细胞表达rhFSH的大规模无血清培养工艺的研究[D]. 石欣欣.吉林大学 2012
[3]重组CHO细胞的无血清悬浮培养[D]. 张大鹤.华东理工大学 2011
本文编号：3442257
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
H2细胞在不同血清浓度下低密度接种生长曲线
图 2-2 5H2 细胞在不同血清浓度下中密度接种生长曲线Figure 2-2 Medium density seeding growth curve of 5H2 cells at different serum concentration图 2-3 5H2 细胞在不同血清浓度下高密度接种生长曲线Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration
13图 2-3 5H2 细胞在不同血清浓度下高密度接种生长曲线Figure 2-3 High-density inoculation growth curve of 5H2 cells at different serum concentration从表2-3中可以看出，在目前常用的10%血清浓度的培养基中，以三种接种密度0.5×105个/mL，中密度1.4×105个/mL，高密度2.8×105个/mL）的细胞都能够的生长，且细胞大小均匀、状态良好。其中即使以较低的0.5×105个/mL来进细胞也能正常存活，并且最终达到4.84×105个/mL。而当以2.8×105个/mL接种4天的培养，细胞密度最高达到了18.07×105个/mL（见图2-3）。这些结果表明，浓度的培养基能够为细胞的生长和增殖提供必需的各种因子和营养物质。
【参考文献】：
期刊论文
[1]动物细胞无血清培养技术研究进展[J]. 阿尔祖古丽,马桂兰,阿依木古丽,乔自林. 甘肃畜牧兽医. 2018(10)
[2]杂交瘤细胞体外大规模培养研究进展[J]. 孙静静,周伟伟,周雷鸣,赵巧辉,李桂林. 中国生物工程杂志. 2018(10)
[3]靶点介导的药物处置模型在单克隆抗体药物研发中应用的探讨[J]. 季双敏,朱校. 中国临床药理学与治疗学. 2018(03)
[4]不同pH值聚乙二醇对鸡红细胞融合的影响[J]. 张丽娇,丁亦男,魏健,高立宏. 黑龙江畜牧兽医. 2018(05)
[5]毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用[J]. 陈泓序,屈锋. 色谱. 2018(03)
[6]动物细胞规模化培养技术现状[J]. 楚品品,蒋智勇,勾红潮,宋帅,李淼,李艳,李春玲,蔡汝健. 动物医学进展. 2018(02)
[7]无血清培养基的研究进展[J]. 张松,乔自林,王家敏. 江西畜牧兽医杂志. 2018(01)
[8]单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病病原体检测中的应用[J]. 赵笑,张冬梅. 中国病原生物学杂志. 2016(08)
[9]单克隆抗体纯化技术研究进展[J]. 汪立法. 黑龙江科技信息. 2016(24)
[10]抗表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体高表达细胞株的克隆筛选[J]. 李郑武,姜媛媛,李国军,高晶,袁淑杰. 黑龙江科技信息. 2016(13)
博士论文
[1]哺乳动物细胞培养工艺优化[D]. 贡向辉.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2006
硕士论文
[1]CHO DG44稳定细胞株无血清培养基的研发与优化[D]. 郭纪元.厦门大学 2014
[2]CHO细胞表达rhFSH的大规模无血清培养工艺的研究[D]. 石欣欣.吉林大学 2012
[3]重组CHO细胞的无血清悬浮培养[D]. 张大鹤.华东理工大学 2011
本文编号：3442257
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